從江蘇省射陽縣某化工廠廢水處理池的活性污泥中分離到兩株菲降解菌株,分別命名為PHE-1和PHE-2,根據(jù)其形態(tài)特征、生理生化特性和16S rRNA基因相似性分析,將PHE-1鑒定為鞘酯菌屬（Sphingobium sp.）,將PHE-2鑒定為蒼白桿菌屬（Ochrobactrum sp.）。兩株菌均在pH6.0-9.0范圍生長良好,最適生長pH分別為7.0和8.0,最適生長溫度均為30℃。在以100mg/L菲為唯一碳源的無機鹽培養(yǎng)基中,PHE-1和PHE-2在18h內(nèi)對菲降解率分別為99.12%和99.56%。Cu2+濃度高于800mg/L,Cd2+濃度高于450mg/L會明顯抑制PHE-1對菲的降解,Cu2+濃度高于400mg/L,Cd2+濃度高于1000mg/L會明顯抑制PH.E-2對菲的降解。對菌株P(guān)HE-2的菌落形態(tài)進行觀察發(fā)現(xiàn),在高于300mg/L的Cd2+脅迫下,PHE-2菌落邊緣出現(xiàn)透明化,內(nèi)部出現(xiàn)絮狀沉淀,初步推測可能是其對Cd2+毒害的一種耐性反應(yīng)。 多環(huán)芳烴芳香環(huán)雙加氧酶是菲降解途徑中第一個酶,它決定降解反應(yīng)的起始。我們根據(jù)已報道的多環(huán)芳烴雙加氧酶α亞基基因（a... 

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 多環(huán)芳烴的研究進展
        1.1 多環(huán)芳烴的來源、分布以及遷移轉(zhuǎn)化
        1.2 多環(huán)芳烴的毒性
        1.3 多環(huán)芳烴的污染現(xiàn)狀
        1.4 多環(huán)芳烴的修復(fù)
    2 菲的研究進展
        2.1 菲的結(jié)構(gòu)特點
        2.2 菲的代謝途徑
        2.3 細(xì)菌的菲降解過程中的關(guān)鍵酶及其基因
    3 復(fù)合污染土壤的原位修復(fù)
第二章 菲降解菌株的篩選、鑒定及其降解特性研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 培養(yǎng)基與試劑
        2.2 菲降解菌株的篩選
        2.3 降解菌株的培養(yǎng)特征及生理生化鑒定
        2.4 降解菌株的16S rRNA基因序列的克隆和測定
        2.5 降解菌株的生長特性研究
        2.6 降解菌株的降解特性研究
        2.7 菲的含量測定
    3 結(jié)果與分析
        3.1 菲降解菌株的分離
        3.2 菌株P(guān)HE-1和菌株P(guān)HE-2的形態(tài)及生理生化特征
        3.3 16S rRNA基因的擴增、序列分析及菌株的初步鑒定
        3.4 菌株P(guān)HE-1和PHE-2的生長特性
        3.5 菌株降解特性的研究
    4 本章小結(jié)
第三章 鄰苯二酚-2,3-雙加氧酶基因的克隆及其轉(zhuǎn)錄特性研究
    1 材料與方法
        1.1 培養(yǎng)基、試劑與儀器
        1.2 菌株與質(zhì)粒
        1.3 菌體基因組DNA的提取,質(zhì)粒DNA的提取
        1.4 RNA的提取
        1.5 cDNA的制備
        1.6 鄰苯二酚-2,3-雙加氧酶基因(xylE)的克隆
        1.7 菲對鄰苯二酚-2,3-雙加氧酶基因(xylE)轉(zhuǎn)錄的影響
        1.8 Cu~(2+)、Cd~(2+)對xylE基因轉(zhuǎn)錄的影響
    2 結(jié)果與分析
        2.1 鄰苯二酚-2,3-雙加氧酶基因(x-ylE)的克隆
        2.2 xylE基因核苷酸序列的分析
        2.3 菲對xylE基因的轉(zhuǎn)錄影響
        2.4 Cu~(2+)、Cd~(2+)對xylE基因轉(zhuǎn)錄的影響
    3 本章小結(jié)
第四章 芳香環(huán)雙加氧酶基因簇的克隆及其轉(zhuǎn)錄特性研究
    1 材料與方法
        1.1 培養(yǎng)基、試劑與儀器
        1.2 菌株與質(zhì)粒
        1.3 菌體基因組DNA和質(zhì)粒DNA的提取
        1.4 RNA的提取及cDNA的制備
        1.5 PCR擴增
        1.6 PCR產(chǎn)物的TA克隆
        1.7 序列分析
        1.8 菲對ahdAlb基因轉(zhuǎn)錄特性的影響
        1.9 Cu~(2+)、Cd~(2+)脅迫對ahdAlb轉(zhuǎn)錄特性的影響
    2 結(jié)果與分析
        2.1 芳香環(huán)雙加氧酶α亞基的克隆
        2.2 核苷酸序列分析
        2.3 ahdAlb基因的上下游擴增
        2.4 核苷酸序列分析
        2.5 菲對ahdAlb基因轉(zhuǎn)錄的影響
        2.6 Cu~(2+)、Cd~(2+)對ahdAlb基因轉(zhuǎn)錄的影響
    3 本章小結(jié)
第五章 植物與微生物聯(lián)合修復(fù)菲-重金屬復(fù)合污染土壤的初步研究
    1 前言
    2 材料
        2.1 供試菌株
        2.2 供試植物
        2.3 供試土壤
        2.4 培養(yǎng)基與試劑
    3 方法
        3.1 實驗土樣的處理
        3.2 盆栽試驗
        3.3 土壤中菲含量的測定
        3.4 植物體中Cu~(2+)含量的測定
        3.5 熒光定量PCR技術(shù)對土壤中xylE拷貝數(shù)的測定
    4 結(jié)果與分析
        4.1 污染土壤中黑麥草的生長情況
        4.2 黑麥草地上部的質(zhì)量分析
        4.3 植物中重金屬Cu~(2+)離子的積累情況分析
        4.4 菲的降解情況分析
        4.5 士壤中xylE拷貝數(shù)的測定
    5 本章小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄一 文中所用培養(yǎng)基及試劑配方
附錄二 論文中的核酸序列
致謝



本文編號：3737161