本文關(guān)鍵詞：植物性神經(jīng)對(duì)妊娠早期大鼠子宮內(nèi)Dickkopf-1和Dickkopf-3表達(dá)的影響

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【摘要】：胚胎著床的順利進(jìn)行是成功妊娠的關(guān)鍵,目前人類(lèi)社會(huì)不孕不育問(wèn)題普遍,畜牧養(yǎng)殖業(yè)也常常受到畜禽繁殖率低的困擾,許多研究報(bào)道了胚胎著床與腫瘤發(fā)生發(fā)展的相關(guān)性,已經(jīng)證明多種分子及蛋白既參與腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程,也參與胚胎著床過(guò)程。Dickkopf-1 (DKK-1)和Dickkopf-3 (DKK-3)已被廣泛證明參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展,但對(duì)于其是否參與胚胎著床過(guò)程還未見(jiàn)報(bào)道。因此本試驗(yàn)將對(duì)DKK-1和DKK-3在胚胎著床過(guò)程中的角色進(jìn)行研究,同時(shí)分析植物性神經(jīng)對(duì)胚胎著床過(guò)程中子宮內(nèi)DKK-1、DKK-3的調(diào)控作用,以進(jìn)一步為胚胎著床機(jī)制的研究提供理論依據(jù)。本試驗(yàn)通過(guò)手術(shù)切斷支配子宮的植物性神經(jīng)和藥物注射單獨(dú)阻斷交感和副交感神經(jīng)的方法建立大鼠植物性神經(jīng)損毀模型,應(yīng)用HE染色、免疫組織化學(xué)法、實(shí)時(shí)熒光定量方法從組織學(xué)水平、蛋白水平以及RNA水平三個(gè)層面觀察植物性神經(jīng)對(duì)大鼠胚胎著床過(guò)程中子宮內(nèi)DKK-1和DKK-3的影響,綜合判定植物性神經(jīng)、胚胎著床以及DKK-1和DKK-3之間的相互關(guān)系。我們觀察發(fā)現(xiàn)DKK-1和DKK-3在子宮內(nèi)主要表達(dá)于子宮腔上皮、子宮腺上皮以及部分蛻膜細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì),正常組DKK-1和DKK-3 mRNA以及蛋白在著床前水平較低而著床啟動(dòng)后較高,且在胚胎著床位點(diǎn)均發(fā)現(xiàn)了二者表達(dá)。提示DKK-1和DKK-3可能參與胚胎著床過(guò)程。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)了在妊娠早期子宮內(nèi)血管壁也有DKK-1和DKK-3表達(dá),且DKK-1和DKK-3的陽(yáng)性血管數(shù)量隨著子宮內(nèi)膜血管數(shù)量增加而增加,提示二者可能還參與妊娠子宮內(nèi)膜血管生成或血流調(diào)控。植物性神經(jīng)的損毀對(duì)卵巢排卵點(diǎn)數(shù)量影響不大,但對(duì)子宮著床點(diǎn)數(shù)量影響顯著,植物性神經(jīng)損毀后表現(xiàn)胚胎著床數(shù)量下降,其中以植物性神經(jīng)全部切除組胚胎著床數(shù)量最低,同時(shí)神經(jīng)處理組均表現(xiàn)胚胎發(fā)育不良或著床延遲。說(shuō)明植物性神經(jīng)可影響胚胎著床過(guò)程。植物性神經(jīng)損毀對(duì)子宮組織結(jié)構(gòu)的影響主要表現(xiàn)在子宮腔上皮和子宮腺上皮發(fā)育不良,子宮內(nèi)膜血管數(shù)量下降等。子宮組織結(jié)構(gòu)的顯著變化可能是造成母體子宮容受性建立與胚胎發(fā)育之間不同步而最終著床失敗的關(guān)鍵原因。植物性神經(jīng)損毀對(duì)子宮的影響還體現(xiàn)在DKK-1和DKK-3的mRNA和蛋白表達(dá)發(fā)生顯著變化。植物性神經(jīng)全部損毀后DKK-1和DKK-3在胚胎著床前超高表達(dá),單獨(dú)損毀交感神經(jīng)DKK-1和DKK-3在著床前也高表達(dá),但較植物性神經(jīng)全部切除組稍弱,而單獨(dú)阻斷副交感神經(jīng)DKK-1和DKK-3mRNA和蛋白均維持在較低水平。植物性神經(jīng)損毀后DKK-1和DKK-3表達(dá)的差異性提示植物性神經(jīng)可參與調(diào)控DKK-1和DKK-3的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：大鼠 子宮 植物性神經(jīng) 胚胎著床 Dickkopf-1 Dickkopf-3
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S814
【目錄】：

• 中文摘要8-10
• Abstract10-12
• 1 前言12-25
• 1.1 哺乳動(dòng)物妊娠過(guò)程12-15
• 1.1.1 子宮組織學(xué)結(jié)構(gòu)在妊娠過(guò)程中的變化12-14
• 1.1.2 胚胎著床過(guò)程14-15
• 1.2 子宮內(nèi)植物性神經(jīng)分布的研究15-17
• 1.2.1 植物性神經(jīng)的阻斷劑15-16
• 1.2.2 植物性神經(jīng)與胚胎著床的研究進(jìn)展16-17
• 1.3 腫瘤與胚胎著床關(guān)系17-18
• 1.4 DKK-1研究現(xiàn)狀18-21
• 1.5 DKK-3研究現(xiàn)狀21-23
• 1.6 DKK家族其他成員23-24
• 1.7 Wnt信號(hào)通路24-25
• 2 材料與方法25-33
• 2.1 試驗(yàn)材料25-28
• 2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及方案25-26
• 2.1.2 樣品取材26-27
• 2.1.3 主要試劑和試驗(yàn)用品27-28
• 2.1.4 試驗(yàn)試劑的配制28
• 2.2 試驗(yàn)方法28-33
• 2.2.1 切片標(biāo)本制備28
• 2.2.2 HE染色法28-29
• 2.2.3 免疫組織化學(xué)法29-30
• 2.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR法30-33
• 3 試驗(yàn)結(jié)果33-46
• 3.1 植物性神經(jīng)對(duì)子宮著床點(diǎn)和卵巢排卵點(diǎn)數(shù)量的影響33-34
• 3.2 植物性神經(jīng)對(duì)子宮組織結(jié)構(gòu)的影響34-36
• 3.2.1 正常組34-35
• 3.2.2 手術(shù)同時(shí)切除交感和副交感神經(jīng)組(手術(shù)組)35-36
• 3.2.3 阿托品阻斷副交感神經(jīng)組(阿托品組)36
• 3.2.4 6-OHDA損毀交感神經(jīng)組(6-OHDA組)36
• 3.2.5 假手術(shù)組36
• 3.3 植物性神經(jīng)對(duì)子宮內(nèi)DKK-1、DKK-3免疫陽(yáng)性的影響36-44
• 3.3.1 植物性神經(jīng)對(duì)DKK-1免疫陽(yáng)性的影響36-40
• 3.3.2 植物性神經(jīng)對(duì)DKK-3免疫陽(yáng)性的影響40-44
• 3.4 植物性神經(jīng)對(duì)DKK-1 mRNA和DKK-3 mRNA相對(duì)表達(dá)量的影響44-46
• 3.4.1 植物性神經(jīng)對(duì)DKK-1 mRNA相對(duì)表達(dá)量的影響44
• 3.4.2 植物性神經(jīng)對(duì)DKK-3 mRNA相對(duì)表達(dá)量的影響44-46
• 4 討論46-51
• 4.1 植物性神經(jīng)對(duì)胚胎著床的影響46-47
• 4.2 DKK-1和DKK-3參與胚胎著床過(guò)程47-48
• 4.3 植物性神經(jīng)調(diào)控DKK-1和DKK-3的表達(dá)48-49
• 4.4 DKK-1和DKK-3參與血管生成和血流調(diào)控49-51
• 5 結(jié)論51-52
• 6 參考文獻(xiàn)52-71
• 7 致謝71

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1 寧淑杰;植物性神經(jīng)對(duì)妊娠早期大鼠子宮內(nèi)Dickkopf-1和Dickkopf-3表達(dá)的影響[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：900469