植物內(nèi)生菌是豐富的微生物資源,放線菌是活性天然產(chǎn)物的重要產(chǎn)生菌,因此,植物內(nèi)放線菌作為微生物資源開發(fā)具有很大潛能。鐵皮石斛是一種珍貴的中藥材,具有重要的生理活性,其內(nèi)生放線菌與宿主之間可能會發(fā)生水平基因轉(zhuǎn)移或基因重組,從而使內(nèi)生放線菌產(chǎn)生與宿主相同或相似的生理活性物質(zhì)。因此,本研究以鐵皮石斛植物內(nèi)生放線菌為研究對象,對其次級代謝產(chǎn)物生物活性進行了研究,主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下:本研究以河北省微生物多樣性研究與應(yīng)用實驗室分離、保藏的13株鐵皮石斛內(nèi)生放線菌作為研究對象,首先對13株供試菌株進行系統(tǒng)發(fā)育分析,研究結(jié)果表明,13株供試菌株中,鏈霉菌屬(Streptomyces)有6株,假諾卡氏屬(Pseudonocardia)4株,分枝桿菌屬(Mycobacterium)1株,分枝酸桿菌屬(Mycolicibacter)1株,擬諾卡氏菌屬(Nocardiopsis)1株,表明鐵皮石斛內(nèi)生放線菌物種多樣性較豐富。對供試菌株的次級代謝產(chǎn)物進行α-葡萄糖苷酶、乳腺癌MCF-7細胞系、病原指示菌抑制活性測定實驗,結(jié)果表明,有6株供試菌株表現(xiàn)出對α-葡萄糖苷酶50%以上的抑制活性,2株菌株對α-葡萄糖苷...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 鐵皮石斛
    1.2 植物內(nèi)生菌
    1.3 植物內(nèi)生放線菌研究進展
        1.3.1 植物內(nèi)生放線菌多樣性
        1.3.2 植物內(nèi)生放線菌生物活性多樣性
    1.4 鐵皮石斛內(nèi)生菌研究現(xiàn)狀
    1.5 本研究的目的意義及內(nèi)容
第二章 13株鐵皮石斛內(nèi)生放線菌系統(tǒng)發(fā)育分析
    2.1 實驗材料
        2.1.1 供試菌株
        2.1.2 培養(yǎng)基
        2.1.3 實驗試劑
        2.1.4 實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 基因組DNA的提取
        2.2.2 16 S r RNA基因的擴增
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 13 株內(nèi)生放線菌16S r RNA基因PCR擴增結(jié)果:
        2.3.2 13 株內(nèi)生放線菌種屬系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果
        2.3.3 13 株內(nèi)生放線菌多樣性分析
    2.4 本章小結(jié)
第三章 鐵皮石斛內(nèi)生放線菌活性測定
    3.1 實驗材料
        3.1.1 供試材料
        3.1.2 培養(yǎng)基
        3.1.3 實驗儀器
        3.1.4 實驗試劑
    3.2 實驗方法
        3.2.1 菌株的發(fā)酵和處理
        3.2.2 α-葡萄糖苷酶提取
        3.2.3 α-葡萄糖苷酶抑制率的測定
        3.2.4 乳腺癌MCF-7 腫瘤細胞抑制活性測定
        3.2.5 病原指示菌抑制活性測定
        3.2.6 活性菌株的次級代謝產(chǎn)物初步分析
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 活性測定結(jié)果
        3.3.2 活性菌株次級代謝產(chǎn)物的初步分析
    3.4 本章小結(jié)
第四章 菌株205527 次級代謝產(chǎn)物的分離純化
    4.1 實驗材料
        4.1.1 供試內(nèi)生放線菌菌株
        4.1.2 指示菌
        4.1.3 培養(yǎng)基
        4.1.4 實驗儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 菌株的發(fā)酵和處理
        4.2.2 次級代謝產(chǎn)物分離純化
        4.2.3 化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 分離純化結(jié)果
        4.3.2 純化合物結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果
    4.4 本章小結(jié)
第五章 結(jié)論與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間獲得的研究成果



本文編號：3783227