發(fā)布時(shí)間：2021-12-31 22:34

　　目的:分離純化藥用植物北桑寄生的內(nèi)生真菌,對(duì)其進(jìn)行形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定;篩選氧化自由基清除能力較強(qiáng)和抑菌效果較好的高活性菌株;大規(guī)模發(fā)酵活性菌株獲得其乙酸乙酯部分提取物,對(duì)活性菌株的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離及鑒定以及活性分析,為北桑寄生內(nèi)生真菌資源的開發(fā)和利用提供參考依據(jù)。方法:（1）設(shè)置不同消毒時(shí)間和不同濃度的次氯酸鈉溶液對(duì)北桑寄生葉片進(jìn)行表面消毒處理,采用組織塊法分離北桑寄生內(nèi)生真菌,菌絲尖端挑取法對(duì)其進(jìn)行純化,利用形態(tài)學(xué)結(jié)合ITS序列比對(duì)鑒定內(nèi)生真菌。（2）小規(guī)模液體發(fā)酵北桑寄生內(nèi)生真菌,乙酸乙酯萃取內(nèi)生真菌發(fā)酵液,減壓濃縮得提取物,測(cè)定其DPPH自由基清除活性和ABTS⁺自由基清除活性。（3）進(jìn)一步篩選具有抑菌活性的菌株,采用濾紙片瓊脂擴(kuò)散法進(jìn)行抑菌活性菌株的初篩,96孔板法測(cè)定初篩后具有抑菌活性菌株的最小抑菌濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MBC）。（4）對(duì)活性菌株進(jìn)行大規(guī)模的液體發(fā)酵培養(yǎng),采用柱色譜等方法分離其次級(jí)代謝產(chǎn)物,運(yùn)用波譜學(xué)對(duì)單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,測(cè)定單體化合物的抗氧化活性和抑菌活性。結(jié)果:（1）北桑寄生葉片消毒條件為:75%的乙醇浸泡消毒1 ... 

【文章來(lái)源】：山西醫(yī)科大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

北桑寄生（左圖）及其葉片（右圖）

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文16圖2-1結(jié)果表明，樣品濃度在0.02~0.2mg/mL時(shí)，北桑寄生內(nèi)生真菌BS06、BS07、BS27的發(fā)酵液提取物對(duì)DPPH自由基清除率為19.06%~95.17%，內(nèi)生真菌BS27的發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)DPPH自由基的清除能力較好，濃度為0.2mg/mL時(shí)，清除率達(dá)到95.17%，接近于同等濃度下Vc對(duì)DPPH自由基的清除能力。圖2-1內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)DPPH自由基的清除活性2.2ABTS+自由基清除結(jié)果圖2-2結(jié)果表明，樣品濃度在0.02~0.2mg/mL時(shí)，北桑寄生內(nèi)生真菌BS06、BS07、BS27的發(fā)酵液提取物對(duì)ABTS+自由基清除率為7.23%~50.05%，內(nèi)生真菌BS27的發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)ABTS+自由基的清除能力較好，濃度為0.2mg/mL時(shí)，清除率達(dá)到50.05%。圖2-2內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)ABTS+自由基的清除活性

山西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文16圖2-1結(jié)果表明，樣品濃度在0.02~0.2mg/mL時(shí)，北桑寄生內(nèi)生真菌BS06、BS07、BS27的發(fā)酵液提取物對(duì)DPPH自由基清除率為19.06%~95.17%，內(nèi)生真菌BS27的發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)DPPH自由基的清除能力較好，濃度為0.2mg/mL時(shí)，清除率達(dá)到95.17%，接近于同等濃度下Vc對(duì)DPPH自由基的清除能力。圖2-1內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)DPPH自由基的清除活性2.2ABTS+自由基清除結(jié)果圖2-2結(jié)果表明，樣品濃度在0.02~0.2mg/mL時(shí)，北桑寄生內(nèi)生真菌BS06、BS07、BS27的發(fā)酵液提取物對(duì)ABTS+自由基清除率為7.23%~50.05%，內(nèi)生真菌BS27的發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)ABTS+自由基的清除能力較好，濃度為0.2mg/mL時(shí)，清除率達(dá)到50.05%。圖2-2內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)ABTS+自由基的清除活性

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[4]毛泡桐內(nèi)生真菌的分離、鑒定及菌株KLBMP-Pt686代謝產(chǎn)物的研究[D]. 張健.江蘇師范大學(xué) 2018
[5]羅漢果果實(shí)內(nèi)生真菌的分離及其抗氧化活性研究[D]. 范彩琴.廣西師范大學(xué) 2018
[6]沙棘籽油、果油、全果油抗氧化活性研究[D]. 鄭滿榮.天津科技大學(xué) 2018
[7]砂引草內(nèi)生菌多樣性及一株內(nèi)生菌Alternaria sp. P8次級(jí)代謝產(chǎn)物研究[D]. 田雪瑩.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2018
[8]竹葉蘭內(nèi)生菌的分離鑒定及生物活性研究[D]. 湯冰雪.華南理工大學(xué) 2018
[9]貝加爾唐松草內(nèi)生真菌的分離純化及其次級(jí)代謝產(chǎn)物生物活性研究[D]. 康銀霞.蘭州理工大學(xué) 2017
[10]甘蔗葉產(chǎn)黃酮內(nèi)生真菌的篩選與鑒定[D]. 周寧.廣西大學(xué) 2017



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