伴隨著我國養(yǎng)殖業(yè)的飛速發(fā)展,水產(chǎn)養(yǎng)殖動物健康管理手段的落后導(dǎo)致大規(guī)模病害時有發(fā)生,藥物濫用破壞了養(yǎng)殖水體中的微生態(tài)平衡,殘留的抗生素類藥物更是威脅著人類的健康,這些問題極大的限制了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。且大規(guī)模集約化養(yǎng)殖產(chǎn)生大量廢水,這些廢水?dāng)y帶大量殘餌及養(yǎng)殖生物排泄物,未經(jīng)處理直接排放入開放水體,不僅污染水體環(huán)境,破壞養(yǎng)殖場周圍水域生態(tài)平衡,且易造成養(yǎng)殖水體二次污染,養(yǎng)殖用水含氮量過高,嚴(yán)重時可導(dǎo)致養(yǎng)殖生物大批死亡。因此,如何應(yīng)對這些問題便成為了提高水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益的關(guān)鍵。有益微生物也叫益生菌,是來源于自然界,具有益生作用的有益菌的統(tǒng)稱,具有抑制有害菌生長、提高宿主免疫力、提供營養(yǎng)成分、凈化水體的功能。且具有生產(chǎn)成本低,適應(yīng)性強(qiáng),環(huán)境友好,使用簡便等優(yōu)點(diǎn),成為水產(chǎn)養(yǎng)殖健康管理的熱點(diǎn)。本文利用實(shí)驗(yàn)室分離保存的有益微生物,進(jìn)行了包括針對提高海水養(yǎng)殖動物抗病性和水質(zhì)提高方面的工作,其中通過在大菱鲆幼苗養(yǎng)殖中單獨(dú)或聯(lián)合使用有益微生物,研究對養(yǎng)殖動物的成活率和生長率以及水質(zhì)指標(biāo)的影響；同時篩選了新型的具有異養(yǎng)氨氧化細(xì)菌和好氧反硝化作用的微生物并對其在高效脫氮性能方面進(jìn)行了相關(guān)研究,結(jié)果如下：1、通過活化培養(yǎng)本研究室分離保存的光合細(xì)菌(嗜硫小紅卵菌)、海水小球藻、枯草芽孢桿菌和瑞士乳桿菌,經(jīng)規(guī)模培養(yǎng)后收獲菌體,單獨(dú)或與瑞士乳桿菌組合成二聯(lián)菌劑應(yīng)用于大菱鲆幼苗養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)；在整個的5周的實(shí)驗(yàn)過程中,發(fā)現(xiàn)投喂瑞士乳桿菌能顯著提高大菱鲆幼苗的存活率,前三周存活率分別比對照組高13、10和11%,在停止投喂瑞士乳桿菌的后兩周成活率明顯下降。單獨(dú)投喂枯草芽孢處理組的大菱鲆成活率也顯著高于對照組,在前三周的成活率分別高于對照組3、10和11%,在停止給喂后的兩周后依然保存較高的成活率,比對照高15%；而光合細(xì)菌處理組的大菱鲆幼魚前三周的成活率也高于對照,但停止使用后的存活率明顯下降；而單獨(dú)小球藻處理組的大菱鲆成活率顯著低于對照；單獨(dú)使用光合細(xì)菌可降低養(yǎng)殖水體中氨氮含量；聯(lián)用小球藻與瑞士乳桿菌可使大菱鲆幼魚存活率提高12%,增重率提高13%；聯(lián)用瑞士乳桿菌與芽孢桿菌可提升最終總重,高于對照組10.8%。2、對取自青島近海海水、南海海水菌200株異養(yǎng)細(xì)菌進(jìn)行活化,通過氨氧化,硝化和反硝化測試篩選和復(fù)篩確定出具有明顯氨氧化作用的Luf6、Luf45、 Luf45-2、Luf 99、S1、S3、S12、S22、F6和F7等十株海洋細(xì)菌,其中菌株Luf 99具有生長快速、脫氮能力強(qiáng)的特點(diǎn),是一株具有應(yīng)用潛力的高效海水異養(yǎng)氨氧化-好氧反硝化細(xì)菌；進(jìn)而對Luf 99菌株的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,結(jié)果表明該菌株的最佳碳源為葡萄糖,其次為乙酸鈉和檸檬酸鈉。菌株Luf99能利用銨鹽,硝酸鹽等無機(jī)氮源生長,在以氯化銨為氮源,葡萄糖為碳源時,生長最優(yōu)佳C/N比為]0：1。3、有機(jī)氮源蛋白胨和酵母粉等能明顯促進(jìn)菌株Luf99生長,在異養(yǎng)條件下,pH7.5-8.0,溫度25-30。C,好氧培養(yǎng)條件下能夠快速降解氨氮。菌株Luf 99的氨氧化性能測試發(fā)現(xiàn),不同C/N比能夠顯著影響菌株Luf 99的氨氧化能力,其中C/N比10：1和15：1情況下氨氮去除率最高,而C/N為6：1時氨氮的比去除率最高。C/N比在6-30：1的范圍內(nèi)都能在24小時內(nèi)高效降解氨氮,但C/N較低的時候比去除率較高。
【學(xué)位單位】：中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：S917.1
【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
    1 有益微生物在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用
        1.1 有益微生物和益生菌(Probiotic)的概念
        1.2 我國水產(chǎn)養(yǎng)殖病害防治困境
        1.3 海水養(yǎng)殖有益微生物研究進(jìn)展
            1.3.1 現(xiàn)有有益菌使用匯總
            1.3.2 乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)
            1.3.3 光合細(xì)菌(Photosynthetic bacteria,PSB)
            1.3.4 芽孢桿菌(Bacillus sp.)
            1.3.5 小球藻(Chlorella vulgaris)
    2 海水養(yǎng)殖廢水微生物脫氮技術(shù)進(jìn)展
        2.1 生物脫氮技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)
    3 本研究的目的意義
第二章 有益微生物在大菱鲆養(yǎng)殖中的應(yīng)用
    2.1 引言
    2.2 材料與方法
        2.2.0 實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基
        2.2.1 微生物來源及培養(yǎng)條件
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)用魚及幼苗的日常飼養(yǎng)管理
        2.2.3 有益菌、藻對大菱鲆幼魚生長影響的實(shí)驗(yàn)設(shè)置
        2.2.4 幼魚的生長率、餌料利用率及成活率指標(biāo)測定
        2.2.5 水質(zhì)指標(biāo)的測定
    2.3 結(jié)果及討論
        2.3.1 光合細(xì)菌菌株的16s rRNA基因序列分析
        2.3.2 有益菌對大菱鲆幼魚存活率的影響
        2.3.3 不同有益菌及組合對大菱鲆幼魚特定生長率的影響
        2.3.4 不同有益菌及組合對大菱鲆幼魚水體水質(zhì)影響
    2.4 結(jié)論
第三章 海水異養(yǎng)硝化和好氧反硝化細(xì)菌的篩選分離鑒定
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 菌種來源及培養(yǎng)基配方
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)用異養(yǎng)海水菌種活化
        3.2.3 具有氨氧化能力的菌種初次篩選
        3.2.4 具有氨氧化能力的菌種二次篩選
        3.2.5 Biolog GN2 MicroPlate 96孔板碳源檢測
        3.2.6 最佳可利用碳源篩選
        3.2.7 分析檢測檢測項目
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 菌種篩選結(jié)果
        3.3.2 Luf 99菌的特性及Biolog GN2 MicroPlate 96孔板檢測
        3.3.3 最佳碳源篩選
    3.4 結(jié)論
第四章 海洋異養(yǎng)氨氧化-好氧反硝化細(xì)菌最佳脫氮條件的檢測
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 材料
            4.2.1.1 實(shí)驗(yàn)菌種
            4.2.1.2 實(shí)驗(yàn)用培養(yǎng)基
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)分析方法
            4.2.2.1 種子液制備與接種
            4.2.2.2 菌種生長指標(biāo)和水質(zhì)指標(biāo)測定
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 最佳碳氮比檢測結(jié)果
        4.3.2 最適溫度檢測結(jié)果
        4.3.3 最適培養(yǎng)條件檢測結(jié)果
    4.4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷

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本文編號：2842287