發(fā)布時間：2020-07-14 17:03

【摘要】：地毯草[Axonopus compressus (Sw.) Beauv.],別名：大葉油草,屬禾本科(Gramineae)地毯草屬(Axonopus)多年生草本植物,起源于熱帶南美洲,屬暖季型草坪草。其中地毯草屬約有40個種,我國有地毯草和近緣地毯草2個種。主要分布在熱帶和亞熱帶等氣候溫暖濕潤地區(qū)。目前對地毯草的研究還主要局限在種質(zhì)調(diào)查、形態(tài)學特征和生理特性的研究上,對地毯草種質(zhì)遺傳多樣性研究很少見報道。因此,本研究目的是采用形態(tài)學標記和分子標記對來自國內(nèi)外的64份地毯草種質(zhì)的遺傳多樣性和遺傳關(guān)系進行分析,結(jié)合形態(tài)學標記和生境分布特點,為地毯草種質(zhì)的遺傳特性提供更全面理論參考,也為篩選優(yōu)質(zhì)抗逆的新品系提供基礎(chǔ)。主要結(jié)果有以下幾點： 1、地毯草種質(zhì)資源形態(tài)多樣性研究 64份地毯草種質(zhì)的形態(tài)多樣性變異僅節(jié)間長、穗柄長和花序直徑達到顯著(P0.05),其他指標皆達到極顯著(P0.01),表明地毯草的外部形態(tài)在不同品系間具有多樣性。各指標的變異系數(shù)范圍為20.79%-338.64%,其中節(jié)間長的變異系數(shù)最大為338.64%,匍匐莖節(jié)間葉片長的變異系數(shù)最小為20.79%,所有指標變異系數(shù)平均為111.17%。從所測各指標間相關(guān)性可以看出,大部分指標都呈現(xiàn)顯著(P0.05)或極顯著差異(P0.01)。 2、地毯草種質(zhì)ISSR標記的遺傳多樣性分析 25條ISSR引物共擴增出208條清晰譜帶,大小在300-1500bp之間,其中多態(tài)性條帶有196條,多態(tài)性比率為94.23%,25個引物擴增條帶數(shù)在4-15條之間,平均每個引物8.32條,遺傳相似系數(shù)是0.46-0.99。 3、地毯草種質(zhì)SRAP標記的遺傳多樣性分析 27對SRAP引物共擴增出691條條帶,其中多態(tài)性條帶668條,多態(tài)性比率為96.67%,擴增條帶的片段大小為200-1500bp,擴增的總條帶數(shù)在16-35條之間,平均每對引物有25.6條帶,遺傳相似系數(shù)是0.52-0.82。 4、地毯草種質(zhì)微衛(wèi)星標記的開發(fā) 地毯草微衛(wèi)星標記的開發(fā)采用羅氏454測序法與FIASCO磁珠富集相結(jié)合的方法,從53193個序列中挑選9735個(占18.3%)含SSRs的序列,其中適于引物設(shè)計的有1942個(占3.65%)。為了測試引物的擴增效率,隨機選了100對微衛(wèi)星序列進行引物設(shè)計并保存這些序列在基因庫中(KM110835-KM110934)。這100對引物中有66對由于擴增產(chǎn)物與SSR標記的特征不符,不能被用作SSR的引物,剩余34對用于24份材料的擴增測試,僅有14對引物擴增位點表現(xiàn)出多態(tài)性等位基因擴增位點的范圍從2(Ac019, Ac021, Ac094)-6(Ac087)個,平均3.5個；Shannon指數(shù)范圍0.169(Ac067)-0.650(Ac091),平均0.393；Nei’s指數(shù)范圍0.108(Ac067)-0.457(Ac091),平均0.271。 5、地毯草種質(zhì)SSR標記的遺傳多樣性分析 14對SSR引物共擴增出49條譜帶,其中48條為多態(tài)性條帶,多態(tài)性比率為97.96%,平均每個引物對擴增3.5條帶,擴增條帶分子片段在100-400bp之間。遺傳形似系數(shù)是0.24-0.98,聚類分析可以聚為3類,出現(xiàn)交叉遺傳的現(xiàn)象。 6、三種標記(ISSR+SSR+SRAP)的綜合分析 ISSR和SSR標記Mantel檢測的相似系數(shù)矩陣的相關(guān)系數(shù)為0.8367,表明結(jié)果匹配良好,而SRAP和ISSR、SRAP和SSR檢測的相似系數(shù)矩陣的相關(guān)系數(shù)分別為0.7541和0.7253,匹配性較差,聚類結(jié)果可以分為3類,其中SSR與ISSR的聚類結(jié)果有很多相似處,但SSR多態(tài)性比率高于ISSR標記。
【學位授予單位】：海南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S688.4

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本文編號：2755246