【摘要】：新城疫病毒(NDV)、禽白血病病毒(ALV)、禽傳染性支氣管炎病病毒(IBV)、禽傳染性法氏囊病病毒(IBDV)是最常見的四種禽病的致病因子,給家禽養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經濟損失。為初步了解野生鳥類中NDV、ALV、IBV、IBDV的病毒感染狀況,本實驗基于四種病毒基因組的特異性高度保守核酸序列,設計了四對通用引物,克隆得到目的片段重組質粒,通過正交法優(yōu)化四重RT-PCR反應體系,建立了可同時檢測NDV、ALV、IBV、IBDV的四重RT-PCR檢測方法,并進行了特異性和靈敏度檢驗,最后對67只野生鳥類的四種臟器進行了實際樣本檢測。結果表明,該方法可以擴增得到大小不一的四種目的片段158 bp (NDV)、131 bp (IBV)、 109 bp (ALV)、94 bp (IBDV);特異性實驗表明該方法可以有效檢出四種病毒任意混合樣品,但檢測不出馬利克病毒、禽痘病毒、禽減蛋綜合征病毒和禽流感病毒；靈敏度實驗表明該方法可檢出102 copy的pMD-18T-NDV,102 copy的pMD-18T-ALV,10 copy的pMD-18T-IBV,10 copy的pMD-18T-IBDV。實際樣本檢測顯示,該方法可以從野生鳥類臟器組織中檢出四種病毒。結論：優(yōu)化后的四重RT-PCR檢測方法可應用于NDV、ALV、IBV、IBDV的臨床診斷和流行病學研究。
【學位授予單位】：華中師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S852.65

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 寧曉檬，金衛(wèi)紅，關智慧，朱秀芝，趙領娣;雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)干擾新城疫病毒(NDV)增殖現(xiàn)象的研究[J];中國預防獸醫(yī)學報;1999年02期

2 陳功義;郝振芳;王建超;;黃芩苷在雞胚上對雞常見病毒AIV、NDV、IBV的作用效果[J];中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志;2015年02期

3 張進良;張文通;胡思順;畢丁仁;王喜亮;肖運才;;試紙條法與瓊脂擴散法檢測IBDV抗體的比較(英文)[J];Agricultural Science & Technology;2012年09期

4 楊克禮;潘玲;李玉;王金玲;劉永松;;安徽省雞傳染性法氏囊病流行病學初步調查[J];畜牧與獸醫(yī);2006年01期

5 ;青島禽白血病研究取得新進展 獲科技進步大獎[J];家禽科學;2018年09期

6 黃騰;;“種雞場禽白血病防控與凈化技術的集成”年度總結匯報會在邕召開[J];廣西畜牧獸醫(yī);2017年01期

7 王洪娟;;禽白血病的防控措施[J];中國畜牧獸醫(yī)文摘;2017年02期

8 秦愛建;;禽白血病防控的思考[J];中國家禽;2011年12期

9 崔治中;朱承如;孫懷昌;;禽白血病及禽網狀內皮細胞增生病感染情況的調查[J];中國畜禽傳染病;1987年01期

10 徐亞萍;曾祥偉;李志軍;李夢溪;;珍珠雞源IBDV的分離鑒定及其卵黃抗體的制備[J];經濟動物學報;2012年02期

相關會議論文 前10條

1 李新華;李艷麗;楊芳;;同胚接種NDV與IBV制備二聯(lián)油乳劑滅活疫苗的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物傳染病學分會第十二次學術研討會論文集[C];2007年

2 王開功;文明;周碧君;羅明星;汪德生;史開志;曹冰玉;李永明;;禽白血病A亞群病毒引起的淋巴細胞性白血病[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學分會第十五次學術研討會論文集[C];2010年

3 王秀臻;張培培;梁才芝;劉紹瓊;王波;秦華洋;孫淑紅;;凈化雞群中禽白血病所用檢測材料的比較研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學分會第十六次學術研討會論文集[C];2012年

4 高玉龍;秦立廷;王笑梅;;禽白血病的防治[A];全球肉雞產業(yè)論壇暨第二屆中國白羽肉雞產業(yè)發(fā)展大會會刊[C];2010年

5 崔治中;朱承如;孫懷昌;;禽白血病及禽網狀內皮細胞增生病感染情況的調查[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學分會雞淋巴白血病防控技術研討會論文集[C];2010年

6 荊汝頂;宋予震;朱鳳先;朱方兵;郝付全;董青;;禽白血病的診斷[A];禽類新發(fā)傳染病高層論壇論文集[C];2009年

7 錢晶;歐陽偉;王晶宇;王曉麗;夏興霞;諸玉梅;王永山;;IBDV和NDV共感染對DF-1細胞的協(xié)同致病作用[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2018年學術年會禽病學分會第十九次學術研討會論文集[C];2018年

8 趙鵬;;種雞場禽白血病凈化的回顧與展望[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2018年學術年會禽病學分會第十九次學術研討會論文集[C];2018年

9 劉志剛;楊應立;劉冰心;金梅林;;蛋雞淋巴細胞性白血病的診斷[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2014年學術年會論文集[C];2014年

10 張志;趙宏坤;崔治中;;J亞群禽白血病的診斷和防制[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學分會雞淋巴白血病防控技術研討會論文集[C];2010年

相關重要報紙文章 前10條

1 山東省沂水縣三十里職業(yè)中專 王道坤;遏制禽白血病應從防御入手[N];河北科技報;2006年

2 黃秀英;種雞場禽白血病凈化技術[N];農民日報;2015年

3 記者 王東生;禽白血病檢測費將大降[N];中國畜牧報;2004年

4 郭翠華 記者 呂兵兵;山東農大建立禽白血病凈化技術體系[N];農民日報;2018年

5 德佳;禽白血病[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2005年

6 王道坤;禽白血病的綜合防治措施[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2006年

7 王德水 郭衛(wèi)東;傳染性法氏囊病的治療[N];中國畜牧報;2003年

8 記者 葉桂華　通訊員 謝志來 張科;海陵試行政策性肉雞保險[N];泰州日報;2009年

9 北京獸藥研究所 中青;傳染性法氏囊病診斷技術[N];中國畜牧水產報;2001年

10 古婧;東洞庭湖52只野生鳥類被毒殺[N];岳陽日報;2019年

相關博士學位論文 前10條

1 趙素芬;法氏囊結構發(fā)育與雛雞對IBDV易感性關系及大蒜合劑抗IBDV作用[D];中國農業(yè)大學;2016年

2 朱戰(zhàn)波;表達NDV、IBDV及FMDV基因的重組FPV載體活疫苗構建和實驗免疫研究[D];吉林大學;2012年

3 宋卉;雛鴕鳥免疫器官的形態(tài)學特點及雞源NDV對雛鴕鳥致病機理的研究[D];華中農業(yè)大學;2007年

4 叢鋒;IBV感染雞腎臟和脾臟轉錄組學分析及雞IFITM1抑制IBV和NDV復制機制的研究[D];中國農業(yè)科學院;2015年

5 李銀聚;河南省傳染性法氏囊病分子流行病學調查及其防制[D];南京農業(yè)大學;2005年

6 宇文延青;我國部分地區(qū)傳染性法氏囊病分子流行病學研究[D];中國農業(yè)科學院;2008年

7 孫軍峰;IBV，NDV，AIV H9感染雞氣管比較蛋白質組分析及雞galectin CG-1B在NDV感染中作用機制的研究[D];中國農業(yè)科學院;2014年

8 林詮彬;微粉化板藍根對雞冠狀病毒（IBV）作用的基礎研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2014年

9 毛婭卿;禽白血病病毒抗原/抗體ELISA檢測方法的建立及準種分析[D];中國農業(yè)大學;2014年

10 楊世發(fā);泰山松花粉多糖的成分分析及其對B亞群禽白血病的免疫調理作用[D];山東農業(yè)大學;2015年

相關碩士學位論文 前10條

1 閻浩;野鳥中NDV、ALV、IBV和IBDV四重RT-PCR檢測[D];華中師范大學;2015年

2 李鵬沖;IBV與IBDV二聯(lián)核酸疫苗構建及與雞IL-18共同免疫效力研究[D];東北農業(yè)大學;2011年

3 徐聰;山東省雞傳染性支氣管炎病毒進化分析及IBV、NDV、H9亞型AIV三重熒光RT-PCR方法的建立[D];山東農業(yè)大學;2016年

4 黃寧;NDV、IBV和ILTV診斷基因芯片的構建及初步應用[D];四川農業(yè)大學;2013年

5 唐中文;2015-2017年安徽、湖北兩省部分地區(qū)J亞群禽白血病的流行病學調查[D];安徽農業(yè)大學;2018年

6 何琪;鎮(zhèn)江地區(qū)禽白血病的流行病學調查及其凈化[D];揚州大學;2018年

7 任超琪;miR-125b和miR-221在J亞群禽白血病病毒感染過程中作用機制研究[D];中國農業(yè)科學院;2018年

8 常姍姍;7種中藥提取物及其硫酸化產物抗NDV和IBV活性的比較[D];南京農業(yè)大學;2012年

9 鄒娟;吉林省禽白血病流行情況調查[D];吉林農業(yè)大學;2017年

10 冷畢丹;龍勝鳳雞禽白血病流行調查及其病毒株的分離鑒定[D];廣西大學;2013年

本文編號：2738019