【摘要】：南美白對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)和羅氏沼蝦(Macrobrachium rosenbergii)已經(jīng)成為我國(guó)主要養(yǎng)殖品種。本實(shí)驗(yàn)主要探討了感染W(wǎng)SSV后羅氏沼蝦及南美白對(duì)蝦生長(zhǎng)及免疫調(diào)控機(jī)理。首先在免疫方面,本實(shí)驗(yàn)初步研究了羅氏沼蝦感染不同濃度WSSV 45天后,體內(nèi)3種Toll樣受體基因及免疫相關(guān)基因在不同組織中的表達(dá)情況,以及南美白對(duì)蝦感染W(wǎng)SSV病毒14天后,體內(nèi)相關(guān)免疫基因表達(dá)水平的變化情況。在生長(zhǎng)方面本實(shí)驗(yàn)初步揭示了羅氏沼蝦感染不同濃度WSSV 45天后,3種生長(zhǎng)相關(guān)基因在肝胰腺中的表達(dá)情況及南美白對(duì)蝦感染W(wǎng)SSV 14天后,3種生長(zhǎng)相關(guān)基因在肝胰腺中的表達(dá)情況。三方面研究結(jié)果如下:(1)羅氏沼蝦感染不同濃度WSSV后3種Toll樣受體基因及相關(guān)免疫基因在不同組織中的表達(dá)情況首先通過RT-PCR檢測(cè)養(yǎng)殖45d后,各試驗(yàn)組蝦3種Toll樣受體基因在鰓和血淋巴中的表達(dá)情況。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)WSSV的感染濃度會(huì)影響羅氏沼蝦3種Toll樣受體基因在鰓和血淋巴中的表達(dá)情況。隨著感染W(wǎng)SSV濃度的增加,羅氏沼蝦3種Toll樣受體基因在不同組織的表達(dá)量會(huì)上升。在第五組(1x103copy/ul)中3種Toll基因表達(dá)量均達(dá)到最大值。從第6組開始,感染W(wǎng)SSV濃度的上升會(huì)抑制三種Toll樣受體基因的表達(dá)量。從不同感染組在不同養(yǎng)殖時(shí)間的死亡率上看,隨著感染濃度的增加,養(yǎng)殖時(shí)間的推遲,羅氏沼蝦的死亡率呈上升趨勢(shì),當(dāng)養(yǎng)殖到45d后第八組死亡率達(dá)到了70%是對(duì)照組的2.8倍。其次本實(shí)驗(yàn)中得到pro PO及PO基因的表達(dá)量變化趨勢(shì)同3種Toll基因相似。結(jié)果表明,羅氏沼蝦的三種Toll基因均可以參加WSSV感染的免疫應(yīng)答,在本試驗(yàn)第5組(1x103copy/ul)前,3種Toll樣受體基因的表達(dá)量會(huì)隨著感染W(wǎng)SSV的濃度增加而增加,在第5組濃度時(shí)達(dá)到最大值,但是感染W(wǎng)SSV濃度的進(jìn)一步上升會(huì)抑制3種Toll樣受體基因的表達(dá)。(2)羅氏沼蝦感染不同濃度WSSV后組織蛋白酶L、幾丁質(zhì)酶、胰凝乳蛋白酶基因在肝胰腺中的表達(dá)情況本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖45d后,羅氏沼蝦的組織蛋白酶L、幾丁質(zhì)酶和胰凝乳蛋白酶基因在肝胰腺中表達(dá)情況出現(xiàn)隨著感染W(wǎng)SSV濃度升高而下降的趨勢(shì)。其中第五組(1x103copy/ul)3種基因出現(xiàn)了最低值,表明羅氏沼蝦在這個(gè)感染濃度下3種基因的表達(dá)量受到強(qiáng)烈抑制。從表中不同養(yǎng)殖階段相對(duì)增重率和相對(duì)生長(zhǎng)率可以看出,隨著感染W(wǎng)SSV濃度的增加和養(yǎng)殖時(shí)間的延長(zhǎng),羅氏沼蝦出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢現(xiàn)象。(3)感染W(wǎng)SSV 14天后南美白對(duì)蝦組織蛋白酶L、幾丁質(zhì)酶和胰凝乳蛋白酶基因及相關(guān)免疫基因在肝胰腺中的表達(dá)情況本試驗(yàn)表示了南美白對(duì)蝦在感染W(wǎng)SSV(1×103 copy/ul)14d后,相關(guān)免疫基因及生長(zhǎng)基因分別在不同組織中的表達(dá)情況。感染W(wǎng)SSV 14天后,南美白對(duì)蝦的鰓和血淋巴中pro PO及PO基因的表達(dá)量明顯高于對(duì)照組和空白組(P0.05)。3個(gè)生長(zhǎng)相關(guān)基因的表達(dá)量明顯低于對(duì)照組(P0.05),說明存活個(gè)體可以通過提高并維持自身免疫相關(guān)基因的表達(dá)量來維持自身的免疫正常。
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S945.4

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