【摘要】：甜高粱是最具優(yōu)勢(shì)的生物質(zhì)能源作物之一,篩選耐鹽堿性甜高粱品種,對(duì)于開發(fā)利用我國(guó)廣大鹽堿土地和發(fā)展乙醇燃料產(chǎn)業(yè)具有重要意義。構(gòu)建快速、高效的甜高粱離體再生技術(shù),是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)快速改良甜高粱農(nóng)藝性狀的基礎(chǔ)。本研究首先以不同比例的中性鹽和堿性鹽混合,模擬符合自然狀況的4種混合鹽堿脅迫土壤,對(duì)9個(gè)甜高粱品種進(jìn)行芽期和幼苗期脅迫處理,基于12種不同抗逆指標(biāo)的變化規(guī)律,通過隸屬函數(shù)法和灰色關(guān)聯(lián)分析法判定了9個(gè)甜高粱品種的抗鹽堿性,并對(duì)12個(gè)指標(biāo)在甜高粱耐鹽堿性判定中的可靠性進(jìn)行了分析。其次,以篩選出的耐鹽堿性強(qiáng)的甜高粱品種成熟種子為外植體,以胚性愈傷組織細(xì)胞誘導(dǎo)率、愈傷細(xì)胞分化率、不定芽生根率為鑒定指標(biāo),通過優(yōu)化愈傷組織細(xì)胞誘導(dǎo)分化過程中相關(guān)培養(yǎng)基激素種類和水平、培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)條件等因素,構(gòu)建一套適合甜高粱遺傳轉(zhuǎn)化所需的離體再生培養(yǎng)體系,并進(jìn)而篩選出具有非常高的效率再生能力品種。研究結(jié)果如下：1.根據(jù)加權(quán)抗鹽堿指數(shù)和抗鹽堿度量值D的大小對(duì)9份材料進(jìn)行抗鹽堿性排序,結(jié)果表明,9個(gè)品種的綜合抗鹽堿性由強(qiáng)到弱的排序?yàn)樗碾s25號(hào)雅津4340號(hào)雅津4184號(hào)雅津106號(hào)雅津2號(hào)雅津4589號(hào)雅津4590號(hào)雅津10號(hào)龍雜9號(hào)。四雜25號(hào)和雅津4340號(hào)的加權(quán)抗鹽堿指數(shù)和抗鹽堿度量值D均是第一和第二,屬于抗鹽堿性強(qiáng)的材料。而龍雜9號(hào)和雅津10號(hào)的加權(quán)抗鹽堿指數(shù)和抗鹽堿度量值D均最小,屬于鹽堿敏感材料。2.12個(gè)性狀(種子發(fā)芽率、莖葉鮮重、根長(zhǎng)、須根數(shù)、葉片電導(dǎo)率、葉片SOD酶活性、葉片脯氨酸含量和5個(gè)葉綠素?zé)晒鈪?shù))與綜合抗鹽堿指數(shù)的關(guān)聯(lián)分析顯示,莖葉鮮重、葉片相對(duì)電導(dǎo)率、根長(zhǎng)和Fv/Fo比值的關(guān)聯(lián)度均大于0.9,是評(píng)價(jià)甜高粱耐鹽堿脅迫程度的最佳指標(biāo)；其次為Fv/Fm和發(fā)芽率,其關(guān)聯(lián)度均大于0.8,是可選指標(biāo)；須根數(shù)、Fm、Fv和Fo的關(guān)聯(lián)度最小,應(yīng)謹(jǐn)慎使用。3.影響甜高粱成熟種子胚愈傷組織再生苗的相關(guān)因素研究結(jié)果表明：1)用0.1%升汞處理甜高粱種子10分鐘,并添加2滴的增效劑Tween20,種子具有較低的污染率(低于20%)和較高的發(fā)芽率(76.7%)。2)在MSB5基本培養(yǎng)基上加入3.0mg/L的生長(zhǎng)素2,4-D和0.3mg/L的6-BA,成熟種子具有最高出愈率(68.3%)。3)基因型對(duì)愈傷誘導(dǎo)效果分析顯示,雅津106、雅津4184、雅津4340、四雜25在該培養(yǎng)基上出愈率差異顯著,其中雅津4184出愈率最高,為81.7%。4)雅津4184成熟種子愈傷組織在添加0.2 mg/L NAA和1.6 mg/L KT的B5培養(yǎng)基上出芽率最高,為93.3%。5)用雅津4184成熟種子愈傷組織誘導(dǎo)的芽分別在添加不同濃度的IBA的1×MS、0.5×MS和MSB5培養(yǎng)基上培養(yǎng)誘導(dǎo)生根,結(jié)果顯示在添加2.Omg/L IBA的1 xMS培養(yǎng)基上培養(yǎng)3周,具有最大的生根率(96.7%)。
【圖文】：

圖３－８不同濃度的升未處理甜高梁成熟種子并培養(yǎng)３周后的萌發(fā)情況（Ａ）、污染率逡逑（Ｂ）、發(fā)芽率（Ｃ）和０．１％升錄添加不同滴數(shù)的Ｔｗｅｅｎ邋２０處理成熟種子１０分鐘并逡逑培養(yǎng)３周后的污染率（Ｄ）、發(fā)芽率（Ｅ）逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋３－８邋Ｔｈｅ邋ｃｕｌｔｕｒｅ邋ｒｅｓｕＩｔ（Ａ），邋ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ邋ｒａｔｅ邋（Ｂ），邋ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ邋ｒａｔｅ邋（Ｃ）邋ｏｆ邋Ｓｗｅｅｔ邋ｓｏｒｇｈｕｍ逡逑ｓｅｅｄｓ邋ｏｎ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ邋ｏｆ邋ｍｅｒｃｕｒｉｃ邋ｃｈｌｏｒｉｄｅ邋ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｆｏｒ邋３邋ｗｅｅｋｓ邋ａｎｄ邋ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ逡逑ｒａｔｅ邋（Ｄ），邋ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ邋ｉ＊ａ化（Ｅ）邋ｏｆ邋Ｓｗｅｅｔ邋ｓｏｒｇｈｕｍ邋ｓｅｅｄｓ邋ｏｎ邋０．１％邋ｍｅｒｃｕｒｉｃ邋ｃｈｌｏｉ＇ｉｄｅ邋化邋ａｄｄ逡逑Ｔｗｅｅｎ邋２０邋ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｆｏｒ邋３邋ｗｅｅｋｓ逡逑綜合考慮１＾上分析，在不添加增效劑得情況下，用０．１％的升隸處理逡逑種子１０分鐘是最好的消毒處理，此時(shí)，所選取的甜高梁種子同時(shí)具有較逡逑第巧頁（共巧頁）逡逑

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【學(xué)位授予單位】：南陽師范學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S566.5

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本文編號(hào)：2541118