【摘要】：雞安卡拉病的病原為禽腺病毒Ⅰ群血清4型(Fowl adenovirus 4,FAdV4),臨床上以心包積液為主要特征。該病最早發(fā)現(xiàn)于1987年,在巴基斯坦的安卡拉(Angara)地區(qū)一個(gè)肉雞場(chǎng)發(fā)生爆發(fā)性流行,因此通常稱作安卡拉病。目前該病在伊拉克、印度、智利、美國(guó)南部和中部、加拿大、匈牙利、波蘭、韓國(guó)、俄羅斯、日本等多個(gè)國(guó)家都有發(fā)病報(bào)道。我國(guó)自2015年開始,該病在遼寧、山西、山東、河北、吉林、江蘇等多個(gè)省市爆發(fā),給養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本實(shí)驗(yàn)對(duì)天津地區(qū)某養(yǎng)殖場(chǎng)65周齡肉種雞和遼寧撫順地區(qū)某養(yǎng)殖場(chǎng)11日齡商品蛋雞疑似發(fā)病雞群,采集病死雞的肝臟,提取DNA,根據(jù)Hexon基因設(shè)計(jì)特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,進(jìn)行測(cè)序和序列分析。對(duì)病變肝臟經(jīng)研磨后處理,反復(fù)凍融三次后離心取上清液,經(jīng)尿囊腔接種7-9日齡SPF雞胚,盲傳3代,觀察雞胚生長(zhǎng)發(fā)育及死亡情況。收集第三代尿囊液接種1日齡SPF雛雞,觀察臨床癥狀及死亡情況,未死亡的于7日齡撲殺,采集心臟、肝臟、脾臟、肺、腎臟、氣管、法氏囊、胰腺、小腸等組織器官做石蠟切片,經(jīng)HE染色觀察組織病理學(xué)損傷。同時(shí)采血檢測(cè)血液內(nèi)總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、堿性磷酸酶(AKP)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、肌酐(CRE)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)等9項(xiàng)與心臟、肝臟和腎臟相關(guān)的血液生化指標(biāo)。結(jié)果:兩株分離雞安卡拉病毒毒株均能導(dǎo)致雞胚發(fā)育遲緩,蜷縮,其中T組天津株接種雞胚后第6d后死亡,雞胚體表出血。SPF雞F組接種病毒(撫順株)后,從4d開始出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。組織學(xué)觀察表明,所分離的兩株病毒均能引起心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞以及腎小管上皮細(xì)胞等多種組織發(fā)生顆粒變性、水泡變性以及壞死等損傷。血液生化指標(biāo)檢測(cè)表明,所分離的兩株雞安卡拉病毒均可引起雛雞血清內(nèi)白蛋白含量下降,乳酸脫氫酶含量輕微上升,尿素氮、肌酐和肌酸激酶含量顯著上升,堿性磷酸酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和尿酸含量極顯著上升,表明兩株分離株均可影響SPF雞的心臟功能、肝功能和腎功能。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)成功分離鑒定兩株雞安卡拉病毒,分別命名為天津株T和撫順株F,兩株病毒均可引起雞胚和雛雞出現(xiàn)特征性病理學(xué)損傷和心臟、肝臟和腎臟功能性改變。
【學(xué)位授予單位】：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S858.31

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本文編號(hào)：2538837