【摘要】：本文以紅螯光殼螯蝦(Cherax quadricarinatus)為研究對象,運用生物化學、免疫毒理學以及分子生物學等相關學科的研究方法及生物技術,通過控制外部的環(huán)境溫度條件,初步探討了溫度變化尤其是低溫對紅螯光殼螯蝦生長及免疫的影響,具體研究結果如下:1.不同溫度對紅螯光殼螯蝦生長性能及抗氧化指標的影響為探究溫度對紅螯光殼螯蝦生長性能、抗氧化指標、免疫力及抗病力的影響,進行了 8周的養(yǎng)殖試驗,試驗設置了四個溫度組,分別為10℃、16℃、22℃、28℃,每組3個重復。結果表明,不同溫度的紅螯光殼螯蝦存活率和增長率存在顯著差異,低溫條件(10℃)下會顯著抑制紅螯光殼螯蝦的攝食、生長和存活,而適宜的溫度,則對紅螯光殼螯蝦的存活和生長有顯著促進作用。研究溫度對紅螯光殼螯蝦肝胰腺、胃、鰓三種組織消化酶和抗氧化酶活性的影響時,發(fā)現(xiàn)28℃組紅螯光殼螯蝦的淀粉酶和胰蛋白酶活性最高,顯著高于其余組,而10℃組的淀粉酶和胰蛋白酶活性最低,顯著低于其余組。三種組織SOD酶活性在28℃時達到峰值,10℃時SOD酶活性最低。結果表明,低溫能夠顯著抑制紅螯光殼螯蝦消化酶和抗氧化酶的活性,從而影響其生長和存活。2.不同溫度對紅螯光殼螯蝦免疫指標的影響研究溫度對紅螯光殼螯蝦肝胰腺、鰓、肌肉三種組織ACP、AKP、LSZ活性影響時,發(fā)現(xiàn)22℃組的ACP和AKP活性最高,10℃組ACP和AKP活性最低且顯著低于其它組(P0.05)。溶菌酶活性在10℃組最低,22℃組的溶菌酶活性和28℃沒有顯著差異。實驗結果表明,低溫會顯著抑制紅螯光殼螯蝦的免疫酶活性,從而對其免疫系統(tǒng)造成損害,而適宜的溫度,則能增強紅螯光殼螯蝦的免疫力。3.不同溫度對紅螯光殼螯蝦抗病力的影響試驗蝦紅螯光殼螯蝦經(jīng)注射0.1m1,1.0× 108cfu/ml濃度的嗜水氣單胞桿菌,不同溫度組SOD酶活力有顯著差異。結果表明,低溫條件(10℃)時,嗜水氣單胞桿菌感染能力很弱,SOD酶活力較強,但隨著感染時間的延長,也會降低SOD酶活力,表明感染程度與溫度和時間都有關,雖然低溫條件下,嗜水氣單胞桿菌的感染能力比較弱,但若長時間處于低溫條件中,也會顯著影響免疫酶的活性。而隨著感染時間的延長,22℃組和28℃組SOD活力卻逐漸增強恢復到原水平,表明適宜的溫度能顯著增強紅螯光殼螯蝦的抗病力。4.紅螯光殼螯蝦α-淀粉酶基因的克隆和表達分析運用分子生物學技術,克隆了紅螯光殼螯蝦α-淀粉酶基因的片段,該片段長970bp,開放閱讀框長528bp,編碼175個氨基酸殘基,對α-淀粉酶做基因同源性比對,結果表明,序列與克氏原螯蝦和凡納濱對蝦的同源性最高,分別為89%和85%,對其生物起源進行分析發(fā)現(xiàn)與克氏原螯蝦親緣關系最近。熒光定量PCR結果顯示,不同溫度組的紅螯光殼螯蝦α-淀粉酶基因表達量存在顯著差異,28℃組表達量最高,10℃組最低,顯著低于其余組,表明α-淀粉酶基因參與了紅螯光殼螯蝦生長過程,對紅螯光殼螯蝦的生長有顯著的促進作用。5.紅螯光殼螯蝦HSP70和Mn-SOD基因的表達分析運用實時熒光定量PCR技術,RT-PCR結果顯示,不同溫度對兩條基因的表達都有顯著的影響。HSP70基因在10℃和28℃時都有高表達,Mn-SOD基因在10℃組時表達量最低。表明,高溫和低溫環(huán)境都會提高HSP70基因的表達,從而誘導合成HSP70蛋白,而Mn-SOD基因在適宜溫度時才會誘導其表達。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：華東師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S917.4

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本文編號：2458147