本文選題：精氨酸 + 草魚��； 參考：《華中農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：本實驗以草魚(Ctenopharyngodon idellus)幼魚為研究對象,通過向飼料中添加不同含量的精氨酸探索其對草魚幼魚生長性能、腸道健康、免疫機能以及氨基酸TOR代謝通路相關(guān)基因和腸道氨基酸轉(zhuǎn)運載體mRNA表達量的影響,從而確定精氨酸對草魚生長和腸道健康的調(diào)控作用;進而通過腸道黏膜細胞原代培養(yǎng)模型研究了不同水平的精氨酸對腸道細胞生長活性、TOR通路相關(guān)基因及緊密連接蛋白mRNA表達量的影響,以期深入探究精氨酸對草魚腸道健康的調(diào)控機制。主要研究結(jié)果如下:1.不同精氨酸含量飼料對草魚幼魚生長性能、TOR通路相關(guān)基因及氨基酸轉(zhuǎn)運載體mRNA的影響本實驗以魚粉為蛋白源作為對照組,以酪蛋白和晶體氨基酸為蛋白源配制了5個梯度精氨酸含量(7.6,12.3,17.9,22.4和28.6 g/kg飼料)的等能等氮的半純化飼料,在南湖養(yǎng)殖基地進行了為期8周的生長實驗。結(jié)果表明:終末體重(FB)、特定生長率(SGR)、飼料轉(zhuǎn)化效率(FE)和蛋白沉積效率(PPV)隨著飼料中精氨酸含量增加呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢,1.79%組出現(xiàn)峰值(P0.05)。血清NO含量隨著飼料中精氨酸含量的增加而增加(P0.05);肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性隨著飼料中精氨酸含量的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,對照組和1.79%組達到最大值(P0.05),肝臟丙二醛(MDA)活性呈現(xiàn)出相反的趨勢(P0.05)。肝臟IGF-1基因表達量隨著飼料中精氨酸含量的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,在2.24%組達到峰值(P0.05);飼料中適宜的精氨酸含量上調(diào)了肌肉TOR信號通路的TOR和S6K1的基因表達(P0.05)。前腸y+L氨基酸轉(zhuǎn)運載體-1(y+LAT1)、y+L氨基酸轉(zhuǎn)運載體-2(y+LAT2)和小肽轉(zhuǎn)運載體(PepT1)mRNA表達量及絨毛長度和絨毛寬度均在1.79%組出現(xiàn)最高值(P0.05),且1.23%,1.79%和2.24%組的隱窩深度低于其他組(P0.05)。中腸的絨毛寬度先增加(飼料精氨酸含量0.76%到1.79%)后降低(P0.05),中腸的絨毛長度、隱窩深度和腸壁厚度沒有顯著影響(P0.05)�；趯GR二次回歸分析判斷,草魚幼魚飼料最適精氨酸添加量為1.53%(占飼料蛋白的5.47%)。2.精氨酸對離體培養(yǎng)草魚腸道黏膜細胞生長、活性、TOR通路及緊密連接蛋白基因表達的影響研究用添加0,0.1,0.2,0.5,1,2mmol/L精氨酸鹽酸鹽的細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)原代腸道黏膜細胞3d。培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性在不添加精氨酸和添加2mmol/L精氨酸組最大,0.5mmol/L組活性最低(P0.05);細胞裂解液中堿性磷酸酶(AKP)活性隨著精氨酸含量的增加先升高后降低,0.5mmol/L組達到最大值(P0.05);Na+,K+-ATP酶活性不受培養(yǎng)液中精氨酸含量的影響(P0.05);細胞裂解液中NO含量隨著細胞培養(yǎng)液中精氨酸含量的升高而升高,2mmol/L組達到最高值(P0.05),NOS含量趨勢呈現(xiàn)與NO相反的態(tài)勢,2mmol/L組的含量最低(P0.05)。培養(yǎng)液中適量的精氨酸含量顯著的增加了細胞中TOR通路相關(guān)基因的表達,TOR和S6K1的基因表達水平均隨著培養(yǎng)液中精氨酸含量的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,0.2mmol/L和0.5mmol/L的活性高于其他各組(P0.05);4E-BP1的基因表達水平雖然有先降低后升高的趨勢,但各組之間無顯著性的差異(P0.05)。培養(yǎng)液中適量的精氨酸含量顯著上調(diào)了腸道黏膜細胞間緊密連接蛋白的的基因表達水平,ZO-1、Claudin c、Claudin 15a、Claudin 12和Claudin 3的基因表達水平的峰值均出現(xiàn)在0.5mmol/L(P0.05),而1mmol/L和2mmol/L的Occludin和Claudin b基因表達水平顯著低于其他組的活性(P0.05)。由此得出,適量的精氨酸通過調(diào)控mTOR通路、緊密連接蛋白的基因表達來保護腸道的屏障結(jié)構(gòu),從而保持細胞生長及功能的完整性,精氨酸濃度為0.2-0.5mmol/L時對細胞的保護作用明顯。本研究的結(jié)果表明:飼料中1.53%-1.79%精氨酸能夠通過調(diào)控mTOR通路,生長相關(guān)基因及氨基酸轉(zhuǎn)運載體基因表達顯著增加草魚幼魚的生長,肝臟抗氧化能力;培養(yǎng)基中添加0.2-0.5mmol/L精氨酸增加了原代培養(yǎng)腸道黏膜細胞mTOR通路和緊密連接蛋白的表達量,以及細胞的存活率。
[Abstract]:The effects of arginine on growth performance , intestinal health , immune function and expression of amino acid TOR metabolic pathway related genes and intestinal amino acid transporter mRNA were studied . the antioxidant capacity of the liver ; 0.2 - 0.5mmol / L arginine is added into the culture medium to increase the expression amount of the mtor pathway and the tightly linked protein in the primary cultured intestinal mucosa cell , and the survival rate of the cells .

【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S965.112

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉博;劉小雷;潘桂蘭;肖云峰;張媛彥;呂瑩雪;劉小玲;;乳鼠心肌細胞的原代培養(yǎng)方法改良[J];中南藥學(xué);2017年01期

2 黃雨薇;葉元土;蔡春芳;吳萍;陳科全;吳韜;徐登輝;彭侃;林秀秀;羅其剛;;飼料氧化魚油引起草魚腸道黏膜結(jié)構(gòu)屏障損傷[J];水產(chǎn)學(xué)報;2015年10期

3 姚仕彬;葉元土;蔡春芳;張寶彤;蕭培珍;劉漢超;黃雨薇;;丙二醛對離體草魚腸道黏膜細胞的損傷作用[J];水生生物學(xué)報;2015年01期

4 姚仕彬;葉元土;蔡春芳;張寶彤;董嬌嬌;黃雨薇;陳科全;;酵母培養(yǎng)物水溶物對離體草魚腸道黏膜細胞生長及細胞膜完整性的影響[J];動物營養(yǎng)學(xué)報;2014年11期

5 劉立鶴;張恒;聶偉;陳進;張志勇;劉軍;黃峰;范偉;;草魚配合飼料添加酵母培養(yǎng)物對草魚生長性能、肝腸功能的影響[J];武漢輕工大學(xué)學(xué)報;2014年01期

6 馮軍廠;劉臻;魯雙慶;聶國興;周玲;孫浪;;草魚小肽轉(zhuǎn)運載體PepT1基因的克隆與表達特征[J];中國水產(chǎn)科學(xué);2013年02期

7 姚仕彬;葉元土;蔡春芳;姚林杰;許凡;劉猛;蕭培珍;王麗宏;;草魚腸道粘膜上皮細胞的分離與原代培養(yǎng)[J];上海海洋大學(xué)學(xué)報;2013年01期

8 石桂城;董曉慧;陳剛;譚北平;遲淑艷;楊奇慧;劉泓宇;;飼料脂肪水平對吉富羅非魚生長性能及其在低溫應(yīng)激下血清生化指標和肝臟脂肪酸組成的影響[J];動物營養(yǎng)學(xué)報;2012年11期

9 郁二蒙;畢香梅;謝駿;王廣軍;余德光;龔?fù)麑?王海英;李志斐;;攝食不同餌料草魚腸道菌群PCR-DGGE指紋圖譜構(gòu)建及分子鑒定[J];生物技術(shù)通報;2012年09期

10 劉揚;池磊;馮琳;姜俊;周小秋;;維生素C對建鯉腸上皮細胞增殖分化的影響[J];動物醫(yī)學(xué)進展;2012年08期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 曾黎明;精氨酸對豬腸道上皮細胞IPEC-1精氨酸轉(zhuǎn)運、細胞增殖及基因表達水平影響的研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

2 周凡;飼料賴氨酸和精氨酸對黑鯛幼魚生長影響及其拮抗作用機理研究[D];浙江大學(xué);2011年

3 馮琳;蘇氨酸對幼建鯉消化吸收能力和抗病力以及組織器官中蛋白質(zhì)調(diào)控信號分子TOR表達的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

4 吳莉芳;大豆蛋白源對不同食性魚類的影響[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

1 陳啟明;精氨酸對黃顙魚生長、免疫及腸道健康的影響[D];華南農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

2 楊敏;氧化魔芋葡苷露聚糖酸解物對齊口裂腹魚腸道消化酶、腸道微生物及腸黏膜免疫的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 王標;精氨酸對中期草魚肉質(zhì)和銅誘導(dǎo)的鰓屏障功能的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 楊吉軒;草魚堿性氨基酸轉(zhuǎn)運載體y~+LAT1和y~+LAT2的基因克隆及其mRNA表達研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

5 許凡;草魚（Ctenopharyngodon idellus）腸道緊密連接蛋白基因克隆與表達活性分析[D];蘇州大學(xué);2013年

6 胡曉霞;生長中期草魚的蘇氨酸需要量研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

7 鄭嚴嚴;包膜賴氨酸鹽酸鹽的制備及其對羅非魚生長性能、飼料利用的影響和作用機理的探討[D];浙江大學(xué);2009年

8 馮仁勇;維生素A對幼建鯉消化能力和免疫功能的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

，

本文編號：1742610