本文選題：精氨酸 + 草魚��； 參考：《華中農業(yè)大學》2017年碩士論文

【摘要】：本實驗以草魚(Ctenopharyngodon idellus)幼魚為研究對象,通過向飼料中添加不同含量的精氨酸探索其對草魚幼魚生長性能、腸道健康、免疫機能以及氨基酸TOR代謝通路相關基因和腸道氨基酸轉運載體mRNA表達量的影響,從而確定精氨酸對草魚生長和腸道健康的調控作用;進而通過腸道黏膜細胞原代培養(yǎng)模型研究了不同水平的精氨酸對腸道細胞生長活性、TOR通路相關基因及緊密連接蛋白mRNA表達量的影響,以期深入探究精氨酸對草魚腸道健康的調控機制。主要研究結果如下:1.不同精氨酸含量飼料對草魚幼魚生長性能、TOR通路相關基因及氨基酸轉運載體mRNA的影響本實驗以魚粉為蛋白源作為對照組,以酪蛋白和晶體氨基酸為蛋白源配制了5個梯度精氨酸含量(7.6,12.3,17.9,22.4和28.6 g/kg飼料)的等能等氮的半純化飼料,在南湖養(yǎng)殖基地進行了為期8周的生長實驗。結果表明:終末體重(FB)、特定生長率(SGR)、飼料轉化效率(FE)和蛋白沉積效率(PPV)隨著飼料中精氨酸含量增加呈現先升高后下降的趨勢,1.79%組出現峰值(P0.05)。血清NO含量隨著飼料中精氨酸含量的增加而增加(P0.05);肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性隨著飼料中精氨酸含量的增加呈現先升高后降低的趨勢,對照組和1.79%組達到最大值(P0.05),肝臟丙二醛(MDA)活性呈現出相反的趨勢(P0.05)。肝臟IGF-1基因表達量隨著飼料中精氨酸含量的增加呈現先升高后降低的趨勢,在2.24%組達到峰值(P0.05);飼料中適宜的精氨酸含量上調了肌肉TOR信號通路的TOR和S6K1的基因表達(P0.05)。前腸y+L氨基酸轉運載體-1(y+LAT1)、y+L氨基酸轉運載體-2(y+LAT2)和小肽轉運載體(PepT1)mRNA表達量及絨毛長度和絨毛寬度均在1.79%組出現最高值(P0.05),且1.23%,1.79%和2.24%組的隱窩深度低于其他組(P0.05)。中腸的絨毛寬度先增加(飼料精氨酸含量0.76%到1.79%)后降低(P0.05),中腸的絨毛長度、隱窩深度和腸壁厚度沒有顯著影響(P0.05)�；趯GR二次回歸分析判斷,草魚幼魚飼料最適精氨酸添加量為1.53%(占飼料蛋白的5.47%)。2.精氨酸對離體培養(yǎng)草魚腸道黏膜細胞生長、活性、TOR通路及緊密連接蛋白基因表達的影響研究用添加0,0.1,0.2,0.5,1,2mmol/L精氨酸鹽酸鹽的細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)原代腸道黏膜細胞3d。培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性在不添加精氨酸和添加2mmol/L精氨酸組最大,0.5mmol/L組活性最低(P0.05);細胞裂解液中堿性磷酸酶(AKP)活性隨著精氨酸含量的增加先升高后降低,0.5mmol/L組達到最大值(P0.05);Na+,K+-ATP酶活性不受培養(yǎng)液中精氨酸含量的影響(P0.05);細胞裂解液中NO含量隨著細胞培養(yǎng)液中精氨酸含量的升高而升高,2mmol/L組達到最高值(P0.05),NOS含量趨勢呈現與NO相反的態(tài)勢,2mmol/L組的含量最低(P0.05)。培養(yǎng)液中適量的精氨酸含量顯著的增加了細胞中TOR通路相關基因的表達,TOR和S6K1的基因表達水平均隨著培養(yǎng)液中精氨酸含量的增加呈現先升高后降低的趨勢,0.2mmol/L和0.5mmol/L的活性高于其他各組(P0.05);4E-BP1的基因表達水平雖然有先降低后升高的趨勢,但各組之間無顯著性的差異(P0.05)。培養(yǎng)液中適量的精氨酸含量顯著上調了腸道黏膜細胞間緊密連接蛋白的的基因表達水平,ZO-1、Claudin c、Claudin 15a、Claudin 12和Claudin 3的基因表達水平的峰值均出現在0.5mmol/L(P0.05),而1mmol/L和2mmol/L的Occludin和Claudin b基因表達水平顯著低于其他組的活性(P0.05)。由此得出,適量的精氨酸通過調控mTOR通路、緊密連接蛋白的基因表達來保護腸道的屏障結構,從而保持細胞生長及功能的完整性,精氨酸濃度為0.2-0.5mmol/L時對細胞的保護作用明顯。本研究的結果表明:飼料中1.53%-1.79%精氨酸能夠通過調控mTOR通路,生長相關基因及氨基酸轉運載體基因表達顯著增加草魚幼魚的生長,肝臟抗氧化能力;培養(yǎng)基中添加0.2-0.5mmol/L精氨酸增加了原代培養(yǎng)腸道黏膜細胞mTOR通路和緊密連接蛋白的表達量,以及細胞的存活率。
[Abstract]:The effects of arginine on growth performance , intestinal health , immune function and expression of amino acid TOR metabolic pathway related genes and intestinal amino acid transporter mRNA were studied . the antioxidant capacity of the liver ; 0.2 - 0.5mmol / L arginine is added into the culture medium to increase the expression amount of the mtor pathway and the tightly linked protein in the primary cultured intestinal mucosa cell , and the survival rate of the cells .

【學位授予單位】：華中農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S965.112

【參考文獻】

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本文編號：1742610