本文關鍵詞： 豬鏈球菌 血清學調(diào)查 分離鑒定 毒力基因 致病性 耐藥性　出處：《四川農(nóng)業(yè)大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：豬鏈球菌病是豬場的一種常見細菌性傳染病,呈世界性分布,給全球養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大損失。該病主要引起豬的腦膜炎、關節(jié)炎、敗血癥、心內(nèi)膜炎、腦炎、流產(chǎn)、多發(fā)性漿膜炎和支氣管肺炎等。該菌可分為35個血清型,血清1型～34型和1/2型。研究發(fā)現(xiàn),對豬致病的血清型主要有1型、2型、7型和9型,尤其2型毒性最強,其中3型還與肺炎有關。為了解四川地區(qū)豬鏈球菌病的感染情況、流行的血清型、致病性和耐藥性,本實驗主要做了以下研究。1、四川地區(qū)豬2型鏈球菌血清流行病學調(diào)查為了解四川地區(qū)豬2型鏈球菌的流行情況,本研究應用商品化豬2型鏈球菌ELISA檢測試劑盒對近兩年從四川成都、雅安、資陽等15市(共32個區(qū)縣)43家豬場采集526份豬血清進行豬2型鏈球菌血清抗體檢測。結果豬2型鏈球菌陽性豬場33個,豬場陽性檢出率為76.74%。212份血清樣品檢測陽性,陽性檢出率為40.30%,表明四川地區(qū)豬2型鏈球菌感染嚴重。其中種母豬的陽性檢出率最高,其次為育肥豬和保育豬,分別為65.77%、39.88%、29.15%。2、四川地區(qū)流行豬鏈球菌病原優(yōu)勢血清型調(diào)查對四川成都、雅安、廣安等12個市(18縣)豬場采集的病料進行豬鏈球菌的分離,共分離到34株豬鏈球菌。用PCR分型方法對分離株進行血清1型、2型、7型、9型和3型鑒定,結果2型16株,占47.1%,7型9株,占26.5%,1株9型,占2.9%,3型4株,占11.8%,未定型4株,占11.8%。表明四川地區(qū)存在多種血清型豬鏈球菌感染,其中2型為主要流行血清型,其次為血清7型和3型。3、豬鏈球菌四川分離株主要毒力基因檢測分析及2型代表株致病性研究對34株豬鏈球菌3種主要毒力基因mrp、epf和sly進行PCR檢測,結果9株為mrp+(26.5%)、14株為epf+(41.2%)、26株為sly+(76.5%)。16株豬2型鏈球菌中存在3個毒力基因表型,mrp+epf+sly+為9株(56.3%)、mrp-epf+sly+為5株(31.3%)、mrp-epf-sly-為2株(12.5%),其中mrp+epf+sly+為優(yōu)勢基因型。對16株豬2型鏈球菌分離株的4種毒力基因cps 2J、mrp、epf和sly的PCR擴增產(chǎn)物進行測序分析,16株分離株的4種毒力基因核苷酸序列與國內(nèi)外豬鏈球菌參考株相應毒力基因序列同源性分別為98.5%～100%、99.6%-100%、99.4%-100%、98.2%-100%,表明四川地區(qū)流行的豬2型鏈球菌的毒力基因相對穩(wěn)定,變異程度小。對3株豬2型鏈球菌代表株進行小鼠致病性試驗表明毒力基因型為mrp+epf+sly+的菌株毒力最強,其次是mrp-epf+sly+, mrp-epf-sly-菌株致病力最弱。4、四川地區(qū)豬鏈球菌耐藥普調(diào)查用18種臨床常用抗生素對34株豬鏈球菌進行藥物敏感性試驗,結果四川地區(qū)豬鏈球菌對多種抗生素耐藥,耐藥性嚴重。多重耐藥譜(70%以上分離株耐藥)為慶大霉素-卡那霉素-丁胺卡那霉素-四環(huán)素-多西環(huán)素-紅霉素-阿奇霉素-林可霉素-磺胺甲惡唑。而對阿莫西林、氨芐西林、先鋒霉素V、頭孢曲松等的敏感率在90%以上,在豬場發(fā)生豬鏈球菌病時,可以使用這些抗生素進行治療。
[Abstract]:Streptococcus suis is a common bacterial infectious disease in pig farms, which has a worldwide distribution and brings great losses to the global pig industry. The disease mainly causes meningitis, arthritis, septicemia, endocarditis, encephalitis, abortion in pigs. Polyserositis and bronchopneumonia. The strain can be divided into 35 serotypes, serotype 1, serotype 34 and serotype 1/2. Among them, type 3 is also related to pneumonia. In order to understand the infection situation of streptococcus suis in Sichuan, the prevalent serotype, pathogenicity and drug resistance, In order to understand the epidemic situation of Streptococcus suis type 2 in Sichuan province, the seroepidemiology of Streptococcus suis type 2 was investigated. In this study, commercial Streptococcus suis type 2 (ELISA) detection kit was used to detect Streptococcus suis from Chengdu, Sichuan Province in recent two years. 526 pig serum samples were collected from 43 pig farms in 32 districts of Ziyang and other cities. Results there were 33 positive swine farms for Streptococcus suis type 2, and 76.74.212 serum samples were positive in pig farms. The positive rate was 40.30, which indicated that the infection rate of Streptococcus type 2 in Sichuan pigs was serious. The positive rate of sows was the highest, followed by fattening pigs and conservation pigs. 65.77 and 39.88, respectively. A survey of the predominant serotypes of streptococcus suis in Sichuan area was carried out to isolate Streptococcus suis from pig farms in Chengdu, Ya'an, Guangan and other 12 cities and 18 counties in Sichuan Province. A total of 34 strains of Streptococcus suis were isolated and identified by PCR typing. The results showed that 16 strains of serotype 2, 9 strains of serotype 2, 9 strains of serotype 2, 9 strains of serotype 2, 9 strains of serotype 2, 9 strains of serotype 2, 9 strains of serotype 26.5, 4 strains of serotype 2, accounted for 11. 8 strains, 4 strains of undefined type, 4 strains of serotype 2, 4 strains of serotype 2, 4 strains of serotype 2 and 4 strains of serotype 3 were identified by PCR typing. The results showed that there were many serotypes of Streptococcus suis infection in Sichuan, among which serotype 2 was the main prevalent serotype. The main virulence genes of Streptococcus suis isolated from Sichuan Province and the pathogenicity of the representative strain 2 were detected by PCR in 34 strains of Streptococcus suis. Results among the 9 strains, 14 strains were mrp strain 26.50.14 strains were epf strain 41.2 and 26 strains were sly 76.5 strains and 16 strains of Streptococcus suis type 2. There were 3 virulence gene phenotype mrp epf sly 9 strains 56.3mrp-epf sly 5 strains 31.3mrp-epf-sly-2 strains, in which mrp epf sly was the dominant genotype of Streptococcus suis type 2. The nucleotide sequences of the four virulence genes cps 2J mrpP epf and sly were sequenced. The nucleotide sequences of the four virulence genes of 16 isolates were homologous to the corresponding virulence genes of the reference strains of Streptococcus suis at home and abroad. The sequence homology of the four virulence genes of the four virulence genes from the four virulence genes to the reference strains of Streptococcus suis at home and abroad were 98.50.4-99.4- 99.2- 1000.The results showed that. The virulence gene of Streptococcus suis type 2, which is prevalent in Sichuan Province, is relatively stable. The pathogenicity test of three representative strains of Streptococcus suis type 2 in mice showed that the virulence genotype of the strain with mrp epf sly was the most virulent. Secondly, mrp-epf sly, mrp-epf-sly- strain virulence was the weakest. 4. The susceptibility tests of 34 strains of Streptococcus suis were carried out with 18 kinds of commonly used antibiotics in Sichuan Province. The results showed that Streptococcus suis in Sichuan area was resistant to multiple antibiotics. Serious drug resistance. More than 70% of the isolates were resistant to gentamicin-kanamycin-amikacin-tetracycline-doxycycline-erythromycin-azithromycin-lincomycin-sulfamethoxazole. Ampicillin, vancomycin V and ceftriaxone are more sensitive than 90%, and can be treated with these antibiotics in pig farms with streptococcus suis.
【學位授予單位】：四川農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S858.28

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