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遼藁本DNA條形碼鑒定及規(guī)范化種植技術(shù)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-06-21 12:17

  本文關(guān)鍵詞:遼藁本DNA條形碼鑒定及規(guī)范化種植技術(shù)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:遼藁本(Ligusticum jeholense Nakai et Kitag)是傘形科藁本屬(Ligusticum L.)多年生草本植物。以根及根莖入藥,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,列為中品,具有抑菌、散風(fēng)、祛寒、祛濕止痛之功效,主治風(fēng)寒頭痛、寒濕腹痛、風(fēng)濕肢節(jié)痹痛等癥,為治療感冒、頭巔頂痛、風(fēng)濕之要藥。由于藥材市場(chǎng)對(duì)遼藁本野生資源需求旺盛,人們大量采挖,嚴(yán)重破壞其生態(tài)環(huán)境,使野生資源面臨瀕?萁叩木车。而人工種植栽培技術(shù)還不完善,不能適應(yīng)中藥現(xiàn)代化生產(chǎn)的要求。本研究旨在通過(guò)對(duì)遼藁本種源鑒定、快速繁殖、種子生物學(xué)特性、關(guān)鍵栽培技術(shù)和采收時(shí)間的研究,為遼藁本生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GAP)的建立提供理論依據(jù)。主要結(jié)論如下:1.八種DNA候選序列(NrITS、ITS2、accD、rbcL、trnH-psbA、ndhJ、rpoC1和rpoB)對(duì)不同產(chǎn)地遼藁本和新疆藁本、藁本混淆品的DNA分子鑒定分析表明,NrITS和ITS2序列在這8種候選序列中能較好地區(qū)分遼藁本與新疆藁本及其混淆品,trnH-psbA序列對(duì)區(qū)別遼藁本與其易混淆品有一定參考價(jià)值。2.初步建立了遼藁本快速繁殖體系。選擇未成熟種胚作為外植體,在MS+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L 6BA+0.5 mg/L KT培養(yǎng)基上誘導(dǎo)產(chǎn)生胚性愈傷和不定芽;不定芽能在B5+0.1mg/L NAA+0.1 mg/L 6BA培養(yǎng)基上穩(wěn)定地增殖生長(zhǎng),增殖倍數(shù)可達(dá)10以上;無(wú)根苗在B5+0.6mg/LNAA培養(yǎng)基上生根率最高,為92.17%;組培苗敞口煉苗一周后,轉(zhuǎn)入蛭石和營(yíng)養(yǎng)土混合物(v營(yíng)養(yǎng)土:V蛭石=1:1)中,成活率可達(dá)80.00%以上。3.種子發(fā)芽試驗(yàn)結(jié)果表明,15℃、紙上(TP)發(fā)芽可作為遼藁本種子標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽參考。光照或黑暗對(duì)遼藁本種子萌發(fā)沒(méi)有顯著影響,但對(duì)子葉轉(zhuǎn)綠有顯著影響。百粒法和千粒法均可以用來(lái)進(jìn)行遼藁本種子重量測(cè)定。4.種植密度和氮磷鉀配方施肥試驗(yàn)結(jié)果表明,三種密度處理(A 40 cm×40 cm, B40cm ×30cm、C40cm×25cm)下,A密度和B密度處理下的鮮重、干物質(zhì)積累量、阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量普遍高于C密度處理,B密度處理下的產(chǎn)量顯著高于A密度和C密度處理。氮磷鉀配方施肥對(duì)遼藁本根中鮮重、干物質(zhì)積累量、產(chǎn)量和阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量影響顯著。綜合產(chǎn)量和品質(zhì)兩方面考慮,采用氮磷鉀低水平施肥效果較佳。5.三年生植株的株高、地上部和根部鮮重、地上部和根部干物質(zhì)積累量、產(chǎn)量、阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量在各個(gè)生育時(shí)期均顯著高于二年生植株。三年生根部鮮重在盛果期時(shí)達(dá)到最大值,與枯萎期相比無(wú)顯著性差異;根部干物質(zhì)積累量均在枯萎期時(shí)達(dá)到最大值;藁本內(nèi)酯含量均是在盛果期達(dá)到最大值;阿魏酸含量則是三年生植株在盛果期時(shí)達(dá)到最大值,二年生植株在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)期含量最高。
【關(guān)鍵詞】:遼藁本 分子鑒定 快速繁殖 栽培技術(shù)
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S567.239
【目錄】:
  • 摘要3-4
  • Abstract4-10
  • 縮略詞10-11
  • 第一章 前言11-25
  • 1.1 遼藁本資源研究進(jìn)展11-22
  • 1.1.1 藁本屬植物資源11-13
  • 1.1.2 遼藁本本草特征及藥用價(jià)值13
  • 1.1.3 遼藁本化學(xué)成分研究13-15
  • 1.1.4 遼藁本藥理作用研究15-16
  • 1.1.5 遼藁本鑒定研究16-20
  • 1.1.6 遼藁本繁殖技術(shù)研究20-21
  • 1.1.7 遼藁本栽培技術(shù)研究21
  • 1.1.8 遼藁本采收技術(shù)研究21-22
  • 1.2 本研究意義與研究目標(biāo)22-25
  • 1.2.1 研究意義22-23
  • 1.2.2 研究目標(biāo)23-25
  • 第二章 藥用植物遼藁本DNA條形碼序列鑒定研究25-49
  • 2.1 材料與方法25-30
  • 2.1.1 植物材料25-26
  • 2.1.2 儀器與試劑26
  • 2.1.3 樣品DNA提取26-28
  • 2.1.4 PCR擴(kuò)增和測(cè)序28-30
  • 2.1.5 序列拼接和數(shù)據(jù)分析方法30
  • 2.2 結(jié)果與分析30-47
  • 2.2.1 序列特點(diǎn)分析30-42
  • 2.2.2 種內(nèi)種間遺傳距離考察42-44
  • 2.2.3 構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育NJ樹44-47
  • 2.3 小結(jié)47-49
  • 第三章 遼藁本組培快繁體系的建立49-57
  • 3.1 材料與方法49-51
  • 3.1.1 植物材料49
  • 3.1.2 試劑及配制49
  • 3.1.3 培養(yǎng)基的配制49-50
  • 3.1.4 誘導(dǎo)分化培養(yǎng)50-51
  • 3.1.5 不定芽增殖培養(yǎng)51
  • 3.1.6 生根培養(yǎng)51
  • 3.1.7 煉苗移栽51
  • 3.1.8 培養(yǎng)條件51
  • 3.1.9 數(shù)據(jù)分析51
  • 3.2 結(jié)果與分析51-55
  • 3.2.1 不同激素處理對(duì)葉片和葉柄的誘導(dǎo)影響51-52
  • 3.2.2 不同激素處理對(duì)未成熟種胚的誘導(dǎo)影響52-53
  • 3.2.3 不同激素處理對(duì)不定芽增殖的影響53-54
  • 3.2.4 不同激素處理對(duì)生根的影響54-55
  • 3.2.5 組培苗的煉苗移栽55
  • 3.3 小結(jié)55-57
  • 第四章 遼藁本種子生物學(xué)特性研究57-63
  • 4.1 材料與方法57-58
  • 4.1.1 植物材料57
  • 4.1.2 試驗(yàn)方法57-58
  • 4.1.3 數(shù)據(jù)分析58
  • 4.2 結(jié)果與分析58-62
  • 4.2.1 扦樣58-59
  • 4.2.2 凈度分析59
  • 4.2.3 發(fā)芽溫度對(duì)種子發(fā)芽率的影響59-60
  • 4.2.4 發(fā)芽床對(duì)種子發(fā)芽率的影響60
  • 4.2.5 光照對(duì)種子發(fā)芽率的影響60-61
  • 4.2.6 遼藁本種子發(fā)芽技術(shù)規(guī)程61
  • 4.2.7 重量測(cè)定61-62
  • 4.3 小結(jié)62-63
  • 第五章 種植密度對(duì)遼藁本產(chǎn)量和品質(zhì)的影響63-69
  • 5.1 材料與方法63-65
  • 5.1.1 供試材料63
  • 5.1.2 試驗(yàn)地點(diǎn)63-64
  • 5.1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)64
  • 5.1.4 田間管理64
  • 5.1.5 取樣及測(cè)定方法64
  • 5.1.6 數(shù)據(jù)分析64-65
  • 5.2 結(jié)果與分析65-68
  • 5.2.1 種植密度對(duì)植株高度的影響65
  • 5.2.2 種植密度對(duì)鮮重的影響65-66
  • 5.2.3 種植密度對(duì)干物質(zhì)積累量的影響66-67
  • 5.2.4 種植密度對(duì)阿魏酸含量的影響67
  • 5.2.5 種植密度對(duì)藁本內(nèi)酯含量的影響67-68
  • 5.3 小結(jié)68-69
  • 第六章 氮磷鉀配方施肥對(duì)遼藁本產(chǎn)量和品質(zhì)的影響69-77
  • 6.1 材料與方法69-72
  • 6.1.1 供試材料69
  • 6.1.2 試驗(yàn)地點(diǎn)69-70
  • 6.1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)70-71
  • 6.1.4 田間管理71
  • 6.1.5 取樣及測(cè)定方法71
  • 6.1.6 數(shù)據(jù)分析71-72
  • 6.2 結(jié)果與分析72-76
  • 6.2.1 氮磷鉀配方施肥對(duì)根部鮮重的影響72-73
  • 6.2.2 氮磷鉀配方施肥對(duì)根部干物質(zhì)積累量和產(chǎn)量的影響73-74
  • 6.2.3 氮磷鉀配方施肥對(duì)阿魏酸含量的影響74-75
  • 6.2.4 氮磷鉀配方施肥對(duì)藁本內(nèi)酯含量的影響75-76
  • 6.3 小結(jié)76-77
  • 第七章 采收時(shí)間對(duì)遼藁本產(chǎn)量和品質(zhì)的影響77-83
  • 7.1 材料與方法77-78
  • 7.1.1 供試材料77
  • 7.1.2 試驗(yàn)地點(diǎn)77
  • 7.1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)77
  • 7.1.4 田間管理77-78
  • 7.1.5 取樣及測(cè)定方法78
  • 7.1.6 數(shù)據(jù)分析78
  • 7.2 結(jié)果與分析78-81
  • 7.2.1 采收時(shí)間對(duì)植株高度的影響78
  • 7.2.2 采收時(shí)間對(duì)鮮重的影響78-79
  • 7.2.3 采收時(shí)間對(duì)干物質(zhì)積累量的影響79-80
  • 7.2.4 采收時(shí)間對(duì)阿魏酸含量的影響80
  • 7.2.5 采收時(shí)間對(duì)藁本內(nèi)酯含量的影響80-81
  • 7.3 小結(jié)81-83
  • 第八章 結(jié)論和討論83-89
  • 8.1 DNA條形碼技術(shù)鑒定遼藁本及其混淆品83
  • 8.2 遼藁本組培快繁體系的建立83-84
  • 8.3 遼藁本種子質(zhì)量評(píng)價(jià)與控制84
  • 8.4 遼藁本關(guān)鍵栽培技術(shù)研究84-86
  • 8.4.1 種植密度對(duì)遼藁本產(chǎn)量和品質(zhì)的影響85
  • 8.4.2 氮磷鉀配方施肥對(duì)遼藁本產(chǎn)量和品質(zhì)的影響85-86
  • 8.5 遼藁本采收時(shí)間研究86-89
  • 參考文獻(xiàn)89-95
  • 附錄95-107
  • 致謝107-109
  • 作者簡(jiǎn)介109

  本文關(guān)鍵詞:遼藁本DNA條形碼鑒定及規(guī)范化種植技術(shù)研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):468666

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