桿菌肽是一類多肽類抗生素,主要用于治療革蘭氏陽性菌引發(fā)的局部感染。但由于其在畜牧養(yǎng)殖中可以促進(jìn)動(dòng)物生長,提高飼料轉(zhuǎn)化率,并能抑制動(dòng)物腸道中有害病原菌的繁殖,因此我國食品動(dòng)物的養(yǎng)殖過程中,桿菌肽作為促生長劑和預(yù)防用藥在我國畜禽養(yǎng)殖業(yè)中廣泛使用。然而隨著桿菌肽類藥物在獸醫(yī)臨床的大量使用,其所引發(fā)的細(xì)菌耐藥問題不容忽視。介導(dǎo)革蘭氏陽性菌桿菌肽耐藥的耐藥基因主要為bcrR,bcrA,bcrB,bcrD等4個(gè)基因所組成的基因簇bcrRABD,其中bcrA和bcrB兩個(gè)基因所組成的ATP結(jié)合盒家族的外排泵,發(fā)揮主要作用。目前動(dòng)物源腸球菌中桿菌肽耐藥情況,以及bcrRABD基因簇流行情況研究均相對(duì)缺乏,這將為我國獸醫(yī)臨床桿菌肽的應(yīng)用帶來很大的潛在風(fēng)險(xiǎn)。因此本研究將針對(duì)我國動(dòng)物源腸球菌,以桿菌肽耐藥基因簇bcrRABD基因簇作為研究對(duì)象,調(diào)查其在我國養(yǎng)殖場環(huán)境內(nèi)的流行情況和傳播機(jī)制。為桿菌肽在獸醫(yī)臨床應(yīng)用的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以及抗生素壓力下,動(dòng)物源腸球菌桿菌肽耐藥性的產(chǎn)生和傳播提供科學(xué)依據(jù)和參考數(shù)據(jù)。本論文以2014年間從全國6個(gè)省份(廣東、廣西、湖南、海南、江西、浙江)11個(gè)雞場,分離的109株雞源腸球菌,及...

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖2.1bcrA-1基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖

根據(jù)primerwalking的2.4bcrA-1、bcrD-1），利用新D-1均為陽性,經(jīng)凝膠成像系rR、bcrA、bcrB、bcrD4個(gè)%。其中根據(jù)報(bào)道引物4個(gè)6)序列相似度較高相似度與

圖2.2bcrD-1基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖

基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電DL2,000；P：陽性對(duì)照；1：樣品gelelectrophoresisofthePCRprodDL2,000marker,P:positivecontrol,1:

圖3.1雞源bcrRABD基因簇陽性腸球菌的PFGE譜圖及菌株信息MLST分型信息a腸球菌EF21、EF24和EF176中攜帶的bcrRABD基因簇序列與質(zhì)粒pTW9（NC014726）;相似度較高，b本文中發(fā)現(xiàn)的腸球菌新的ST型

RABD基因簇陽性腸球菌的PFGE譜圖及菌株信息ML24和EF176中攜帶的bcrRABD基因簇序列與質(zhì)粒pTW9(N現(xiàn)的腸球菌新的ST型。HUN，湖南；GX，廣西；GD，廣東；H.1PFGEpattern,isolationdateandM....

圖3.2雞源株bcrRABD基因簇陽性腸球菌及接合子S1-PFGE及Southern雜交Figure3.2(a)S1-PFGEofthebcrABDR-positivestrains,(b)subsequentsouthern

交進(jìn)行bcrB基因定位，其結(jié)果如（圖3.2）。S1-PFGE結(jié)果顯示部分接合子含有不只一個(gè)質(zhì)粒，表明除了bcrRABD基因簇陽性質(zhì)粒，部分其它質(zhì)粒也通過接合轉(zhuǎn)移，轉(zhuǎn)進(jìn)了受體菌。Southern雜交結(jié)果表明37株野生菌及7株接合子中bcrRABD基因簇均位于質(zhì)粒上，且....

本文編號(hào)：3900761