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MC1R和ASIP基因在馬毛色中的協(xié)同作用研究及馬微衛(wèi)星13重PCR體系的構(gòu)建

發(fā)布時間:2024-02-14 18:33
  近年來我國馬產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速,許多具有優(yōu)質(zhì)血統(tǒng)的純種馬匹被進(jìn)口至國內(nèi)用于參加各項(xiàng)賽事和繁育優(yōu)秀的后代,純正的血統(tǒng)和不同的毛色直接影響著馬匹的價值。以往研究表明,melanocortin-1 receptor(MC1R)和agouti signaling protein(ASIP)是調(diào)控哺乳動物毛色的兩個最為重要的基因。在對馬毛色的研究中,已發(fā)現(xiàn)MC1R基因C901T位置的突變可導(dǎo)致栗色毛色的產(chǎn)生,而ASIP基因第二外顯子中11 bp的缺失能導(dǎo)致黑色毛色的產(chǎn)生。然而,這兩個基因在深淺不同的馬毛色中發(fā)揮了怎樣的精細(xì)和協(xié)調(diào)調(diào)控作用尚不清楚。本研究共采集15個品種的709匹毛色由深到淺(黑色、褐騮色、深騮色、騮色、栗色、青色、白色)的馬匹毛發(fā)樣本,檢測了所有馬匹在MC1R和ASIP基因上特定功能位點(diǎn)的基因分型,通過統(tǒng)計和分析各種基因型組合和分布規(guī)律,發(fā)現(xiàn)了這兩個基因在馬毛色深淺變化中可能的重要協(xié)同作用關(guān)系。為證明新生馬駒的血統(tǒng),各國馬業(yè)協(xié)會通過微衛(wèi)星親子鑒定技術(shù)為馬駒做血統(tǒng)鑒定,并進(jìn)行登記、頒發(fā)護(hù)照和建立繁育記錄。國際動物遺傳學(xué)會推薦了17個用于馬匹個體識別和親子鑒定的微衛(wèi)星位點(diǎn),分為12個核心位...

【文章頁數(shù)】:99 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 毛色基因MC1R與 ASIP及其在馬屬動物中的作用研究進(jìn)展
        1.1.1 MC1R與 ASIP基因研究進(jìn)展
        1.1.2 馬屬動物毛色研究進(jìn)展
    1.2 微衛(wèi)星標(biāo)記研究進(jìn)展
        1.2.1 微衛(wèi)星標(biāo)記概述
        1.2.2 微衛(wèi)星多重PCR體系研究進(jìn)展
        1.2.3 微衛(wèi)星多重PCR技術(shù)的其他應(yīng)用
    1.3 本研究的目的與意義
        1.3.1 MC1R和 ASIP基因在馬匹毛色中的協(xié)同作用研究
        1.3.2 馬微衛(wèi)星DNA檢測多重PCR體系的構(gòu)建
第二章 MC1R與ASIP基因在馬匹毛色中的協(xié)同作用研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 毛發(fā)樣本基因組DNA提取
        2.2.2 PCR產(chǎn)物測序
        2.2.3 MC1R基因分型與毛色關(guān)聯(lián)分析
        2.2.4 ASIP基因分型與毛色關(guān)聯(lián)分析
        2.2.5 MC1R-ASIP基因分型組合與毛色關(guān)聯(lián)分析
    2.3 討論與小結(jié)
        2.3.1 討論
        2.3.2 小結(jié)
第三章 馬微衛(wèi)星DNA檢測13重PCR體系的構(gòu)建
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 試驗(yàn)方法
        3.1.3 數(shù)據(jù)分析
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 樣本基因組DNA提取
        3.2.2 多重PCR微衛(wèi)星引物設(shè)計
        3.2.3 多重PCR體系構(gòu)建與優(yōu)化
        3.2.4 標(biāo)準(zhǔn)樣品微衛(wèi)星序列克隆測序
        3.2.5 靈敏度試驗(yàn)
        3.2.6 物種特異性試驗(yàn)
        3.2.7 法醫(yī)類樣品試驗(yàn)
        3.2.8 可重復(fù)性試驗(yàn)
        3.2.9 Allele ladder
        3.2.10 Stutter分析
        3.2.11 數(shù)據(jù)分析
    3.3 討論與小結(jié)
        3.3.1 討論
        3.3.2 小結(jié)
第四章 馬微衛(wèi)星DNA檢測五重PCR體系的構(gòu)建
    4.1 材料與方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 樣品基因組DNA提取
        4.2.2 多重PCR微衛(wèi)星引物設(shè)計
        4.2.3 多重PCR體系構(gòu)建與優(yōu)化
        4.2.4 標(biāo)準(zhǔn)樣品微衛(wèi)星序列克隆測序
        4.2.5 靈敏度試驗(yàn)
        4.2.6 物種特異性試驗(yàn)
        4.2.7 法醫(yī)類樣品試驗(yàn)
        4.2.8 可重復(fù)性試驗(yàn)
        4.2.9 Allele ladder
        4.2.10 Stutter分析
        4.2.11 數(shù)據(jù)分析
    4.3 討論與小結(jié)
        4.3.1 討論
        4.3.2 小結(jié)
第五章 結(jié)論、創(chuàng)新點(diǎn)與展望
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點(diǎn)
    5.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號:3898414

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