新城疫病毒（Newcastle Disease Virus,NDV）是一種呈球形、有囊膜的RNA病毒,具有單股、負(fù)鏈、不分節(jié)段的RNA基因組。該病毒也是引起家禽養(yǎng)殖業(yè)重大經(jīng)濟(jì)損失的一種禽類病毒。NDV作為一種很重要的溶瘤病毒,能夠在腫瘤細(xì)胞中選擇性復(fù)制,引起腫瘤細(xì)胞凋亡。目前研究表明,NDV感染誘導(dǎo)內(nèi)源性和外源性細(xì)胞凋亡,且通過誘導(dǎo)死亡配體TNFα和TRAIL的表達(dá)介導(dǎo)外源性細(xì)胞凋亡。然而,NDV感染如何引起內(nèi)源性細(xì)胞凋亡還沒有系統(tǒng)、具體的報道。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（endoplasmic reticulum,ER）壓力應(yīng)激,也稱為未折疊蛋白反應(yīng)（unfold protein response,UPR）,是指在營養(yǎng)不足、鈣離子失衡、病毒感染等不同的生理和/或病理條件下,導(dǎo)致未折疊或錯誤折疊蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中的蓄積,以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能的紊亂所引起的應(yīng)答反應(yīng)。3種跨內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的ER應(yīng)激感受蛋白已被鑒定,包含PKR樣ER調(diào)節(jié)激酶（protein kinase RNA（PKR）-like ER kinase,PERK）、轉(zhuǎn)錄激活因子6（activating transcription factor 6,ATF6）和... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

NDV感染誘導(dǎo)CHOP表達(dá)Fig.2.1InductionofCHOPduringNDVinfection

NDV感染誘導(dǎo)CHOP表達(dá)及入核Fig.2.2TheexpressionandnucleartranslocationofCHOPduringNDVinfection.

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院博士學(xué)位論文第二章新城疫病毒感染通過CHOP信號通路介導(dǎo)細(xì)胞凋亡研究20而高濃度則抑制PKR活性(IC50:696nM)(Axtenetal.,2012)。WesternBlot檢測樣品中eIF2α、p-eIF2α、CHOP、NDVNP和β-actin蛋白水平的變化。NDV感染時，低劑量的GSK260641不影響eIF2α磷酸化(Liao,etal.,2016a)。如圖2-3所示，與DMSO對照組相比，高劑量GSK260641處理組eIF2α的磷酸化水平顯著減少（0.1倍），且CHOP表達(dá)水平降低至0.2倍。以上結(jié)果顯示，NDV感染可以通過激活PKR-eIF2α信號通路，誘導(dǎo)表達(dá)CHOP蛋白。圖2-3磷酸化的eIF2α誘導(dǎo)CHOP表達(dá)Fig.2.3CHOPisinducedbyphosphorylationofeIF2α2.2.2NDV感染下調(diào)抗凋亡蛋白BCL-2和MCL-1BCL-2家族蛋白可以分為抗凋亡蛋白BCL-2、Mcl-1，BCL-XL，BCL-w和BFL1/A1；促凋亡效應(yīng)蛋白Bax、Bak，以及Bim、Bid、PUMA和NOXA等只含有BH3結(jié)構(gòu)域的促凋亡蛋白3類。BCL-2家族蛋白能夠通過調(diào)控線粒體內(nèi)、外膜的通透性，激活一系列下游信號通路，引起細(xì)胞凋亡(BrunelleandLetai,2009)。研究表明，NDV感染能夠誘導(dǎo)內(nèi)源性細(xì)胞凋亡和外源性細(xì)胞凋亡，并且通過誘導(dǎo)表達(dá)死亡配體TNFα和TRAIL，引起死亡受體介導(dǎo)的外源性細(xì)胞凋亡(Liao,etal.,2016a)。CHOP可以通過下調(diào)表達(dá)抗凋亡BCL-2家族蛋白，引起線粒體源的細(xì)胞凋亡(McCullough,etal.,2001)。為了驗證NDV感染是否調(diào)控BCL-2家族，我們用NDVHerts/33毒株感染HeLa細(xì)胞，且分別于感染后0h、4h、8h、12h、16h、20h和24h收取細(xì)胞樣品。WesternBlot結(jié)果表明，NDV感染后16h和20h，抗凋亡蛋白BCL-2和MCL-1分別降低0.5、0.1倍，而BCL-xL變化不明顯（如圖2-4）。同時，病毒感染后16h、20h和24h，在蛋白水平，促凋亡BH3-only蛋白BIM和Puma沒有明顯變化，而效應(yīng)凋亡蛋白BAX有輕微減少分別為0.8、0

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Diverse Functions of VDUP1 in Cell Proliferation,Differentiation,and Diseases[J]. Sang Yong Kim,Hyun-Woo Suh,Jin Woong Chung,Suk-Ran Yoon,Inpyo Choi.  Cellular & Molecular Immunology. 2007(05)



本文編號：3575372