副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis,HPS）是豬上呼吸道的常在菌,可引起多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎和腦膜炎為主要特征的革拉澤氏�。℅l?sser’s Disease）。Qse B/Qse C雙組份調(diào)控系統(tǒng)由組氨酸蛋白激酶和反應(yīng)調(diào)節(jié)子組成,在腸桿菌科和巴斯德菌科中是重要的毒力調(diào)控因子。探究副豬嗜血桿菌Qse B/Qse C雙組份系統(tǒng)在副豬嗜血桿菌致病過程中的作用和機制對認識該病原和防控該病具有重要的意義。本研究以臨床分離的野生菌株（SC1401和MY1902）為參考對照株,采用自然轉(zhuǎn)化法分別構(gòu)建副豬嗜血桿菌Δqse B、Δqse C和Δqse BC基因缺失株。通過抗血清殺菌試驗、生物被膜形成試驗、壓力耐受試驗、抗生素耐藥性試驗和小鼠毒力試驗等比較缺失株和野生菌株的差異,鑒定Qse B/Qse C雙組份調(diào)控系統(tǒng)的毒力相關(guān)性。利用比較轉(zhuǎn)錄組學(xué)探究Qse B在副豬嗜血桿菌致病過程中的作用和調(diào)控機制。主要研究內(nèi)容包括:1.構(gòu)建副豬嗜血桿菌Δqse B、Δqse C和Δqse BC基因缺失株和互補株選擇“自殺質(zhì)�！眕 K18mobsac B構(gòu)建外源“打靶載體”p LQ1、p LQ2和... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：132 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

-15血清型副豬嗜血桿菌標準菌株擴增qseB基因（A）和qseC基因（B）

基因上下游同源臂，經(jīng)凝膠電泳鑒定分別約 964bp 和 945bp（如圖 2-4A/B）；以菌株 SC1401 菌株基因組為模板，用引物 qseBC-Up-F/qseBC-Up-R 和 qseBC-DowqseBC-Down-R 擴增 qseBC 雙基因的上下游同源臂，經(jīng)凝膠電泳鑒定分別約 958b947bp（如圖 2-5A/B）。MD Mfusion fragmentbp4500300020001200800500200bp4500300020001200800500200upstream armdownstream armkanRABCMM

2-4 qsec 基因上臂(A)、下臂 (B)、Kan 片段(C)和左右同源臂融合(D)的 PCR 擴增ig.2-4 The PCR amplification of up arm(A) and down arm(B) of qseC gene , Kan(Ctension(D).：DL 5000 DNA markerupstream armbp50003000200015001000750500250100Mdownstream armbp50003000200015001000750500250100MBA

【參考文獻】：
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本文編號：3367183