L-亮氨酸對新生哺乳仔豬腸道發(fā)育及氨基酸轉(zhuǎn)運影響的研究
本文關(guān)鍵詞:L-亮氨酸對新生哺乳仔豬腸道發(fā)育及氨基酸轉(zhuǎn)運影響的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:本研究通過體外細胞培養(yǎng)試驗和體內(nèi)飼養(yǎng)試驗相結(jié)合探討了L-亮氨酸對正常出生體重(NBW)新生仔豬和宮內(nèi)生長受限(IUGR)新生仔豬性長、腸道發(fā)育以及氨基酸轉(zhuǎn)運的影響。(1)試驗一:L-亮氨酸對新生仔豬小腸上皮細胞增殖、氨基酸轉(zhuǎn)運載體以及緊密連接蛋白表達的影響。試驗以新生仔豬小腸上皮細胞系(IPEC-J2)為研究對象,共設(shè)6個處理,分別用含有0、0.5、1、2、5和10:mmol/L L-亮氨酸的特殊培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞24h。結(jié)果表明,L-亮氨酸能促進IPEC-J2氨基酸轉(zhuǎn)運載體ATB0,’以及緊密連接蛋白ZO-1、ZO-2和Claudin-3的表達。5mmol/L L-亮氨酸促細胞生長最明顯(P0.05)。(2)試驗二:灌服L-亮氨酸對新生仔豬生長的影響。試驗選取胎次和出生日期相同的60頭平均體重為2.84士0.02kg的7日齡NBW哺乳仔豬和60頭平均體重為1.88士0.02kg的7日齡IUGR哺乳仔豬(杜×大×長),分別按照體重隨機分為4個處理,每個處理5個重復(fù),每個重復(fù)3頭豬。試驗中L-亮氨酸的添加量分別為母豬乳中亮氨酸的0%、100%、200%和300%,即0、0.7、1.4和2.1g/kg BW L-亮氨酸,每日灌服兩次。同時,分別向各組添加適量L-丙氨酸以滿足各組等氮飼喂。試驗期2wks。結(jié)果表明,灌服L-亮氨酸可促進NBW仔豬小腸絨毛發(fā)育、提高血漿中亮氨酸含量以及NBW仔豬的生長性能(P0.05);灌服L-亮氨酸對IUGR仔豬的生長性能具有負影響(P0.05),降低了其血漿中血氨、尿素、葡萄糖、甘油三酯和總膽固醇的含量(P0.01),增加血漿中低密度脂蛋白含量。(3)試驗三:灌服L-亮氨酸對新生仔豬腸道以及腎臟轉(zhuǎn)運載體表達的影響。本試驗組織來源于試驗二。試驗結(jié)果:NBW新生仔豬補充L-亮氨酸后,提高了空腸ATB00,+, b0,+AT, B0AT1mRNA表達,但是降低了空腸中y+LAT1mRNA表達水平。L-亮氨酸的補充也顯著提高了NBW新生仔豬空腸中ATB0,+蛋白的表達(P0.05),但是極顯著降低了LAT2蛋白的表達(P0.01)。L-亮氨酸的補充提高了IUGR新生哺乳仔豬空腸中ATB0,+基因的表達,但是降低了y+LAT1、ASCT2以及b0,’AT的基因表達(P0.05)。L-亮氨酸的補充提高了IUGR新生哺乳仔豬腎臟中xCT蛋白的表達(P0.05),但對ATB0,+、LAT2、PAT1、rBAT以及SNAT2蛋白的表達量無顯著影響。(4)試驗四:灌服L-亮氨酸對新生仔豬組織(腸道、骨骼肌、肝臟和腎臟)氨基酸的影響。本試驗組織來源于試驗二。L-亮氨酸補充提高了NBW哺乳仔豬背最長肌中甘氨酸、谷氨酰胺和谷氨酸的含量(P0.05),對其它氨基酸無影響。(5)試驗五:灌服L-亮氨酸對新生仔豬骨骼肌中mTOR相關(guān)蛋白、蛋白降解以及肌肉生長相關(guān)基因表達的影響。本試驗組織來源于試驗二。L-亮氨酸的補充提高了哺乳仔豬骨骼肌mTOR信號通路相關(guān)蛋白的表達(P0.05)。L-亮氨酸的補充顯著降低了NBW哺乳仔豬腿肌MuRF1的1nRNA表達水平(P0.05),提高了Myf5的mRNA表達水平(P0.05),同時極顯著提高了MyoD和MyoG基因的表達水平(P0.01)。但是對Atrogin-1、MSTN基因的表達無明顯影響(P0.05);IUGR哺乳仔豬研究表明,L-亮氨酸的補充顯著降低了腿肌中MuRF1的mRNA表達(P0.05),同時極顯著提高了Atrogin-1和Myf5基因的表達(P0.01)。但是對MyoD和MyoG基因的表達無顯著影響(P0.05)?傊,試驗結(jié)果表明,補充L-亮氨酸提高NBW新生仔豬的生長、腸道發(fā)育而對IUGR新生哺乳仔豬具有負面影響。L-亮氨酸添加對NBW及IUGR新生哺乳仔豬組織中氨基酸、氨基酸轉(zhuǎn)運載體、蛋白合成降解相關(guān)基因的表達有影響,其作用機理及其與生長發(fā)育的關(guān)系,需進一步探討。
【關(guān)鍵詞】:L-亮氨酸 哺乳仔豬 小腸 氨基酸轉(zhuǎn)運 骨骼肌
【學(xué)位授予單位】:中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:S828.5
【目錄】:
- 摘要6-8
- Abstract8-15
- 第一章 緒論15-32
- 1.1 研究目的和意義15
- 1.2 國內(nèi)外相關(guān)研究現(xiàn)狀15-30
- 1.2.1 新生期哺乳動物的宮內(nèi)生長受限15-16
- 1.2.2 亮氨酸簡介及分子結(jié)構(gòu)16-21
- 1.2.3 氨基酸轉(zhuǎn)運載體21-29
- 1.2.4 蛋白降解途徑29-30
- 1.3 研究內(nèi)容和方法30-32
- 第二章 試驗研究32-86
- 試驗一 L-亮氨酸對新生仔豬小腸上皮細胞增殖、氨基酸轉(zhuǎn)運載體以及緊密連接蛋白表達的影響32-41
- 摘要32
- 2.1.1 前言32-33
- 2.1.2 材料與方法33-37
- 2.1.3 結(jié)果37-40
- 2.1.4 討論40
- 2.1.5 小結(jié)40-41
- 試驗二 L-亮氨酸對新生仔豬生長的影響41-54
- 摘要41
- 2.2.1 前言41-42
- 2.2.2 材料與方法42-44
- 2.2.3 結(jié)果44-51
- 2.2.4 討論51-52
- 2.2.5 小結(jié)52-54
- 試驗三 L-亮氨酸對新生仔豬組織器官氨基酸含量的影響54-65
- 摘要54
- 2.3.1 前言54-55
- 2.3.2 材料與方法55-56
- 2.3.3 結(jié)果56-62
- 2.3.4 討論62-64
- 2.3.5 小結(jié)64-65
- 試驗四 L-亮氨酸對新生仔豬腸道以及腎臟轉(zhuǎn)運載體表達的影響65-77
- 摘要65
- 2.4.1 前言65
- 2.4.2 材料與方法65-69
- 2.4.3 結(jié)果69-75
- 2.4.4 討論75-76
- 2.4.5 小結(jié)76-77
- 試驗五 L-亮氨酸對新生仔豬肌肉蛋白合成及降解的mTOR信號通路影響77-86
- 摘要77
- 2.5.1 前言77
- 2.5.2 材料與方法77-79
- 2.5.3 結(jié)果79-83
- 2.5.4 討論83-85
- 2.5.5 小結(jié)85-86
- 第三章 結(jié)論和建議86-87
- 3.1 本研究的主要結(jié)論86
- 3.2 本研究的創(chuàng)新點86
- 3.3 有待進一步研究的問題86-87
- 參考文獻87-100
- 致謝100-101
- 附錄101-104
- 個人簡歷104-105
【參考文獻】
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本文關(guān)鍵詞:L-亮氨酸對新生哺乳仔豬腸道發(fā)育及氨基酸轉(zhuǎn)運影響的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:326779
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