元寶楓葉片酚類物質(zhì)評(píng)價(jià)及其黃酮合成通路表征
發(fā)布時(shí)間:2021-05-10 17:09
元寶楓(Acertruncatum Bunge),為槭樹科(Aceraceae)槭樹屬落葉喬木,是我國(guó)重要的鄉(xiāng)土樹種。在作為經(jīng)濟(jì)、綠化樹種的同時(shí),元寶楓葉片、種仁及內(nèi)種皮富含的特殊化學(xué)成分更賦予了其多種生物功能。元寶楓葉生物量大,并每年自然更新,具有巨大的開發(fā)前景。并且元寶楓葉含有豐富的酚酸類、黃酮類、單寧類等成分,從而具有多種生物活性。但目前針對(duì)元寶楓葉內(nèi)含有的具體酚類成分及具有的抗氧化活性尚不清楚,并且關(guān)于其相關(guān)采收時(shí)期、提取方法、與熱處理等基本加工處理研究尚不夠系統(tǒng)深入,亟待完善。此外,元寶楓葉內(nèi)黃酮類化合物是其酚類物質(zhì)的重要組成,也是抗氧化性的主要貢獻(xiàn)者。但關(guān)于元寶楓葉黃酮生物合成通路的相關(guān)研究尚未出現(xiàn),而關(guān)于其中轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控機(jī)制亦仍屬空缺。本研究將系統(tǒng)填補(bǔ)元寶楓葉研究中的上述空白,為元寶楓葉資源的深度研發(fā)提供基礎(chǔ)理論數(shù)據(jù)。主要成果如下:(1)對(duì)整個(gè)生長(zhǎng)時(shí)期元寶楓葉內(nèi)酚類物質(zhì)及抗氧化能力的季節(jié)性變化規(guī)律進(jìn)行探究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同采收時(shí)間的元寶楓葉均含有大量總酚、總單寧、總黃酮,并具有較強(qiáng)的DPPH、ABTS、ORAC抗氧化能力。其中,4月及11月葉片相較于其他中間月份(5-10月...
【文章來源】:北京林業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:129 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 引言
1.1 槭屬植物資源研究概況
1.1.1 槭屬植物資源的生物學(xué)特性及開發(fā)利用價(jià)值
1.1.2 槭屬植物資源的活性成分
1.1.3 槭屬植物資源的生物活性
1.2 元寶楓資源研究概況
1.2.1 元寶楓的分布
1.2.2 元寶楓的生長(zhǎng)特性與適應(yīng)性
1.2.3 元寶楓的生物學(xué)特性
1.2.4 元寶楓的化學(xué)成分及生物活性
1.3 黃酮合成通路的表征及轉(zhuǎn)錄因子的篩選
1.3.1 黃酮類物質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)以及生物活性
1.3.2 黃酮合成通路結(jié)構(gòu)基因的研究進(jìn)展
1.3.3 MYB轉(zhuǎn)錄因子對(duì)于黃酮合成通路的調(diào)控
1.3.4 組學(xué)研究手段在植物合成通路中的應(yīng)用
1.4 本研究的目的及內(nèi)容
1.4.1 研究目的及意義
1.4.2 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
2 元寶楓葉中酚類物質(zhì)的季節(jié)性變化對(duì)其抗氧化能力影響的研究
2.1 材料、試劑及實(shí)驗(yàn)設(shè)備
2.1.1 材料及試劑
2.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 元寶楓葉總酚、總單寧及總黃酮的測(cè)定
2.2.2 元寶楓葉抗氧化能力測(cè)定
2.2.3 高效液相色譜法(HPLC)分析
2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 元寶楓葉中總酚、總黃酮和總單寧的季節(jié)性變化
2.3.2 元寶楓葉抗氧化能力
2.3.3 HPLC分析季節(jié)性變化對(duì)元寶楓中活性的影響
2.3.4 相關(guān)性分析
2.4 本章小結(jié)
3 響應(yīng)面法優(yōu)化超聲輔助提取元寶楓葉酚類物質(zhì)及抗氧化活性研究
3.1 材料、試劑及實(shí)驗(yàn)設(shè)備
3.1.1 材料及試劑
3.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 超聲輔助提取法的優(yōu)化
3.2.2 總酚測(cè)定
3.2.3 DPPH·清除能力測(cè)定
3.2.4 酚類物質(zhì)的UPLC-QTOF-MS/MS分析
3.2.5 數(shù)據(jù)分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 溶劑和自變量對(duì)UAE的影響
3.3.2 統(tǒng)計(jì)分析和模型擬合
3.3.3 各變量間的相互作用對(duì)ATL中酚類提取率和抗氧化活性的影響
3.3.4 元寶楓葉中的酚類物質(zhì)
3.4 本章小結(jié)
4 熱處理對(duì)元寶楓葉和花中10種主要酚類物質(zhì)及其抗氧化貢獻(xiàn)的影響
4.1 材料及實(shí)驗(yàn)設(shè)備
4.1.1 植物材料及藥品試劑
4.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 元寶楓葉花的熱處理方法
4.2.2 UPLC-DAD-QTOF-MS/MS測(cè)定酚類組成
4.2.3 HPLC對(duì)于單體酚類化合物的定量
4.2.4 總酚含量測(cè)定
4.2.5 抗氧化能力測(cè)定
4.2.6 數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 以UPLC-DAD-OTOF-MS/MS和HPLC指紋圖譜對(duì)元寶楓葉和花中酚類物質(zhì)鑒定并分類
4.3.2 熱處理對(duì)于酚類成分的改變
4.3.3 10種主要酚類物質(zhì)所造成的抗氧化能力改變
4.3.4 10種主要酚類物質(zhì)對(duì)ATL及ATF總抗氧化能力的貢獻(xiàn)
4.4 本章小結(jié)
5 轉(zhuǎn)錄組學(xué)及代謝組學(xué)揭示元寶楓葉中黃酮合成通路的調(diào)控機(jī)制及MYB轉(zhuǎn)錄因子的篩選
5.1 材料、試劑及實(shí)驗(yàn)設(shè)備
5.1.1 植物材料及藥品試劑
5.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
5.2 實(shí)驗(yàn)方法
5.2.1 ATL中酚類物質(zhì)的提取
5.2.2 總酚、總黃酮、及總抗氧化能力的測(cè)定
5.2.3 HPLC對(duì)ATL中酚類物質(zhì)的定量檢測(cè)
5.2.4 代謝組學(xué)檢測(cè)
5.2.5 轉(zhuǎn)錄組學(xué)檢測(cè)
5.2.6 上機(jī)測(cè)序
5.2.7 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量控制
5.2.8 DE NOVO拼接
5.2.9 UNIGENE注釋
5.2.10 UNIGENE表達(dá)豐度計(jì)算和差異分析
5.2.11 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)驗(yàn)證
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 元寶楓葉特征時(shí)期的篩選
5.3.2 代謝組學(xué)分析
5.3.3 轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析
5.4 本章小結(jié)
6 結(jié)論與展望
6.1 主要結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
6.3 有待進(jìn)一步開展的工作
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
獲得成果目錄清單
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]元寶楓翅果3種活性成分及抗氧化能力研究[J]. 王瑤,牛立新,白章振,張曉驍,張延龍,王寧. 中國(guó)油脂. 2019(02)
[2]我國(guó)小品種油料發(fā)展現(xiàn)狀的研究[J]. 魯海龍,張飛,袁榕. 糧食與食品工業(yè). 2018(05)
[3]元寶楓MYB轉(zhuǎn)錄因子基因的克�。ㄓ⑽模J]. 王延玲,郝雪英,豐震. Agricultural Science & Technology. 2016(04)
[4]‘魯紅一號(hào)’元寶楓葉片總RNA提取方法的比較研究[J]. 郝雪英,豐震,呂傳青. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(03)
[5]8種槭樹屬植物的生態(tài)適應(yīng)性評(píng)價(jià)[J]. 陳建芳,梁冰,趙蓓蓓,李湛東. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(06)
[6]從元寶楓油中提取神經(jīng)酸并制備生物柴油的技術(shù)研究[J]. 史宣明,陳燕,張?bào)P,夏輝,魯海龍,孟佳,韓少威. 中國(guó)油脂. 2013(02)
[7]新型植物皮革鞣劑的研究進(jìn)展[J]. 王全杰,任方萍,高龍,宋建國(guó). 皮革科學(xué)與工程. 2011(04)
[8]微波萃取元寶楓多酚的工藝研究[J]. 蔡霞,李珺,鄒洪. 中藥材. 2008(11)
[9]元寶楓葉片總DNA提取方法的優(yōu)化[J]. 崔翠,藺銀鼎. 生物技術(shù)通報(bào). 2008(04)
[10]元寶楓化學(xué)成分的研究概況[J]. 吳衛(wèi)中,李珺,許疌. 中國(guó)藥事. 2008(07)
博士論文
[1]馬鈴薯塊莖不同花色素苷轉(zhuǎn)化機(jī)制研究[D]. 劉芳.山東師范大學(xué) 2018
碩士論文
[1]元寶楓葉片花色苷相關(guān)基因克隆與序列分析[D]. 馬立敏.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
本文編號(hào):3179737
【文章來源】:北京林業(yè)大學(xué)北京市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:129 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
1 引言
1.1 槭屬植物資源研究概況
1.1.1 槭屬植物資源的生物學(xué)特性及開發(fā)利用價(jià)值
1.1.2 槭屬植物資源的活性成分
1.1.3 槭屬植物資源的生物活性
1.2 元寶楓資源研究概況
1.2.1 元寶楓的分布
1.2.2 元寶楓的生長(zhǎng)特性與適應(yīng)性
1.2.3 元寶楓的生物學(xué)特性
1.2.4 元寶楓的化學(xué)成分及生物活性
1.3 黃酮合成通路的表征及轉(zhuǎn)錄因子的篩選
1.3.1 黃酮類物質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)以及生物活性
1.3.2 黃酮合成通路結(jié)構(gòu)基因的研究進(jìn)展
1.3.3 MYB轉(zhuǎn)錄因子對(duì)于黃酮合成通路的調(diào)控
1.3.4 組學(xué)研究手段在植物合成通路中的應(yīng)用
1.4 本研究的目的及內(nèi)容
1.4.1 研究目的及意義
1.4.2 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
2 元寶楓葉中酚類物質(zhì)的季節(jié)性變化對(duì)其抗氧化能力影響的研究
2.1 材料、試劑及實(shí)驗(yàn)設(shè)備
2.1.1 材料及試劑
2.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 元寶楓葉總酚、總單寧及總黃酮的測(cè)定
2.2.2 元寶楓葉抗氧化能力測(cè)定
2.2.3 高效液相色譜法(HPLC)分析
2.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 元寶楓葉中總酚、總黃酮和總單寧的季節(jié)性變化
2.3.2 元寶楓葉抗氧化能力
2.3.3 HPLC分析季節(jié)性變化對(duì)元寶楓中活性的影響
2.3.4 相關(guān)性分析
2.4 本章小結(jié)
3 響應(yīng)面法優(yōu)化超聲輔助提取元寶楓葉酚類物質(zhì)及抗氧化活性研究
3.1 材料、試劑及實(shí)驗(yàn)設(shè)備
3.1.1 材料及試劑
3.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 超聲輔助提取法的優(yōu)化
3.2.2 總酚測(cè)定
3.2.3 DPPH·清除能力測(cè)定
3.2.4 酚類物質(zhì)的UPLC-QTOF-MS/MS分析
3.2.5 數(shù)據(jù)分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 溶劑和自變量對(duì)UAE的影響
3.3.2 統(tǒng)計(jì)分析和模型擬合
3.3.3 各變量間的相互作用對(duì)ATL中酚類提取率和抗氧化活性的影響
3.3.4 元寶楓葉中的酚類物質(zhì)
3.4 本章小結(jié)
4 熱處理對(duì)元寶楓葉和花中10種主要酚類物質(zhì)及其抗氧化貢獻(xiàn)的影響
4.1 材料及實(shí)驗(yàn)設(shè)備
4.1.1 植物材料及藥品試劑
4.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
4.2 實(shí)驗(yàn)方法
4.2.1 元寶楓葉花的熱處理方法
4.2.2 UPLC-DAD-QTOF-MS/MS測(cè)定酚類組成
4.2.3 HPLC對(duì)于單體酚類化合物的定量
4.2.4 總酚含量測(cè)定
4.2.5 抗氧化能力測(cè)定
4.2.6 數(shù)據(jù)分析
4.3 結(jié)果與分析
4.3.1 以UPLC-DAD-OTOF-MS/MS和HPLC指紋圖譜對(duì)元寶楓葉和花中酚類物質(zhì)鑒定并分類
4.3.2 熱處理對(duì)于酚類成分的改變
4.3.3 10種主要酚類物質(zhì)所造成的抗氧化能力改變
4.3.4 10種主要酚類物質(zhì)對(duì)ATL及ATF總抗氧化能力的貢獻(xiàn)
4.4 本章小結(jié)
5 轉(zhuǎn)錄組學(xué)及代謝組學(xué)揭示元寶楓葉中黃酮合成通路的調(diào)控機(jī)制及MYB轉(zhuǎn)錄因子的篩選
5.1 材料、試劑及實(shí)驗(yàn)設(shè)備
5.1.1 植物材料及藥品試劑
5.1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
5.2 實(shí)驗(yàn)方法
5.2.1 ATL中酚類物質(zhì)的提取
5.2.2 總酚、總黃酮、及總抗氧化能力的測(cè)定
5.2.3 HPLC對(duì)ATL中酚類物質(zhì)的定量檢測(cè)
5.2.4 代謝組學(xué)檢測(cè)
5.2.5 轉(zhuǎn)錄組學(xué)檢測(cè)
5.2.6 上機(jī)測(cè)序
5.2.7 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量控制
5.2.8 DE NOVO拼接
5.2.9 UNIGENE注釋
5.2.10 UNIGENE表達(dá)豐度計(jì)算和差異分析
5.2.11 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)驗(yàn)證
5.3 結(jié)果與分析
5.3.1 元寶楓葉特征時(shí)期的篩選
5.3.2 代謝組學(xué)分析
5.3.3 轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析
5.4 本章小結(jié)
6 結(jié)論與展望
6.1 主要結(jié)論
6.2 創(chuàng)新點(diǎn)
6.3 有待進(jìn)一步開展的工作
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)介
導(dǎo)師簡(jiǎn)介
獲得成果目錄清單
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]元寶楓翅果3種活性成分及抗氧化能力研究[J]. 王瑤,牛立新,白章振,張曉驍,張延龍,王寧. 中國(guó)油脂. 2019(02)
[2]我國(guó)小品種油料發(fā)展現(xiàn)狀的研究[J]. 魯海龍,張飛,袁榕. 糧食與食品工業(yè). 2018(05)
[3]元寶楓MYB轉(zhuǎn)錄因子基因的克�。ㄓ⑽模J]. 王延玲,郝雪英,豐震. Agricultural Science & Technology. 2016(04)
[4]‘魯紅一號(hào)’元寶楓葉片總RNA提取方法的比較研究[J]. 郝雪英,豐震,呂傳青. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(03)
[5]8種槭樹屬植物的生態(tài)適應(yīng)性評(píng)價(jià)[J]. 陳建芳,梁冰,趙蓓蓓,李湛東. 廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2013(06)
[6]從元寶楓油中提取神經(jīng)酸并制備生物柴油的技術(shù)研究[J]. 史宣明,陳燕,張?bào)P,夏輝,魯海龍,孟佳,韓少威. 中國(guó)油脂. 2013(02)
[7]新型植物皮革鞣劑的研究進(jìn)展[J]. 王全杰,任方萍,高龍,宋建國(guó). 皮革科學(xué)與工程. 2011(04)
[8]微波萃取元寶楓多酚的工藝研究[J]. 蔡霞,李珺,鄒洪. 中藥材. 2008(11)
[9]元寶楓葉片總DNA提取方法的優(yōu)化[J]. 崔翠,藺銀鼎. 生物技術(shù)通報(bào). 2008(04)
[10]元寶楓化學(xué)成分的研究概況[J]. 吳衛(wèi)中,李珺,許疌. 中國(guó)藥事. 2008(07)
博士論文
[1]馬鈴薯塊莖不同花色素苷轉(zhuǎn)化機(jī)制研究[D]. 劉芳.山東師范大學(xué) 2018
碩士論文
[1]元寶楓葉片花色苷相關(guān)基因克隆與序列分析[D]. 馬立敏.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
本文編號(hào):3179737
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