干擾素（Interferon,IFN）是機體細胞受到病毒等生物誘導劑刺激而產(chǎn)生的一類分泌型糖蛋白類細胞因子,而白細胞介素18（Interleukin-18,IL-18）是一種具有促炎作用的細胞因子,由機體活化的單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞等產(chǎn)生,能誘導IFN-γ等細胞因子的分泌,具有促進T細胞增殖、增強Th1型細胞、NK細胞及CTL細胞的細胞毒效應,與臨床自身免疫性疾病及心血管系統(tǒng)疾病等多種疾病的發(fā)生發(fā)展呈現(xiàn)相關性,IFN和IL-18都具有抗病毒、抗寄生蟲和細菌感染、抗腫瘤、免疫調節(jié)等多種生物學功能。因此,本實驗開展藏獒犬IFN-γ、IFN-α和IL-18的相關研究,采用分子克隆和基因工程等技術獲得了3個基因,體外制備了藏獒犬3個基因的重組蛋白,驗證了其生物學活性,并開展了臨床相關實驗,豐富了犬細胞因子的知識,對犬疾病的檢測和防控以及保障人類健康有著重要的意義,在犬疾病的防控上有著廣闊的應用前景。第一,從藏獒犬血液中分離淋巴細胞,利用脂多糖（LPS）與植物血凝素（PHA）聯(lián)合刺激淋巴細胞后提取RNA,經(jīng)RT-PCR擴增IFN-γ、IFN-α和IL-18基因全長片段,將擴增到的基因分別... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學甘肅省

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
SUMMARY
縮略語表
第一章 犬干擾素研究進展
    1 IFN概述
        1.1 IFN分類
        1.2 犬IFN理化特性及基因組成
        1.3 IFN的空間結構及受體研究
        1.4 IFN生物學活性及作用機制
    2 犬IFN基因工程研究
        2.1 犬Ⅰ型IFN基因工程研究
        2.2 犬Ⅱ型IFN基因工程研究
        2.3 犬Ⅲ型IFN基因工程研究
        2.4 犬長效IFN研究
    3 犬IFN臨床應用
        3.1 治療犬病毒性傳染病
        3.2 治療犬皮膚性疾病
        3.3 治療眼科及其他疾病
    4 犬IFN應用展望
第二章 白細胞介素18研究進展
    1 IL-18概述
        1.1 IL-18的發(fā)現(xiàn)、結構、特性
        1.2 IL-18受體及信號傳導途徑
        1.3 IL-18結合蛋白
    2 IL-18生物學作用
        2.1 IL-18抗腫瘤作用
        2.2 IL-18抗感染作用
        2.3 IL-18免疫調節(jié)作用
    3 IL-18與臨床疾病的關系
        3.1 IL-18與自身免疫性疾病
        3.2 IL-18與心血管系統(tǒng)疾病的關系
        3.3 IL-18與神經(jīng)系統(tǒng)疾病的關系
        3.4 IL-18與腫瘤疾病的關系
        3.5 IL-18與糖尿病等其他疾病的關系
    4 IL-18應用展望
    5 本研究的目的及意義
第三章 藏獒犬IFN-γ和 IFN-α基因克隆與序列分析
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 試驗結果
        2.1 淋巴細胞的體外刺激活化
        2.2 RT-PCR擴增藏獒犬IFN-γcDNA
        2.3 重組質粒的酶切及PCR鑒定
        2.4 藏獒犬IFN-γ序列測定及分析
        2.5 藏獒犬IFN-α序列測定及分析
    3 討論
第四章 藏獒犬IFN-γ和 IFN-α基因的表達、純化及活性鑒定
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 試驗結果
        2.1 藏獒犬pET-30a-IFN-γ和 pET-30a-IFN-α重組表達質粒的鑒定
        2.2 藏獒犬pET-30a-IFN-γ和 pET-30a-IFN-α重組蛋白Western bloting分析
        2.3 藏獒犬pET-30a-IFN-γ和 pET-30a-IFN-α重組蛋白純化分析
        2.4 藏獒犬IFN-γ抗病毒活性檢測
        2.5 藏獒犬IFN-α抗病毒活性檢測
        2.6 藏獒犬IFN-α抗病毒臨床應用
    3 討論
第五章 藏獒犬IL-18基因克隆、表達及生物學活性鑒定
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
    2 試驗結果
        2.1 藏獒犬IL-18基因的克隆
        2.2 藏獒犬IL-18基因序列測定及分析
        2.3 藏獒犬IL-18基因比較分析及進化分析
        2.4 pET-30a-IL-18 重組質粒的鑒定
        2.5 pET-30a-IL-18 重組蛋白表達及Western bloting分析
        2.6 pET-30a-IL-18 重組蛋白純化結果
        2.7 藏獒犬IL-18基因生物學活性鑒定
    3 討論
全文結論
參考文獻
致謝
作者簡介
攻讀博士學位期間發(fā)表論文
導師簡介1
導師簡介2


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Ⅲ型干擾素的研究進展[J]. 郭富城,常秋燕,李林杰,馬鵬,李凌浩,王悅縈,馬曉霞,馬忠仁,陳士恩.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2018(17)
[2]藏獒犬白介素18基因的克隆及原核表達[J]. 宋世斌,胡永浩,何強,敬淑燕,仝保全.  畜牧獸醫(yī)雜志. 2018(04)
[3]犬干擾素α1和胸腺肽α1融合蛋白在畢赤酵母GS115中的表達[J]. 田春玲,馬玉忠,秦建華,汪恩強.  河北農(nóng)業(yè)大學學報. 2018(01)
[4]白細胞介素-18在部分自身免疫性疾病中的作用[J]. 李慕聰,邢東明.  微生物學免疫學進展. 2017(06)
[5]犬α-干擾素蛋白在不同表達載體中的生物學活性比較[J]. 劉歡,金紅巖,侯強,史秋梅,董瑞凱,張通明,侯紹華,沈萍.  中國畜牧獸醫(yī). 2016(10)
[6]豬干擾素的研究進展[J]. 卓秀萍,朱玲,徐志文.  豬業(yè)科學. 2015(11)
[7]干擾素在寵物病毒性疾病治療上的使用效果分析[J]. 汪恭富,馮杰,馬妍.  畜牧與獸醫(yī). 2015(09)
[8]結核性腦膜炎腦脊液中TNF-α、IL-6和IL-18表達關系的研究[J]. 杜一琴,劉忠達.  中國現(xiàn)代醫(yī)生. 2014(14)
[9]犬干擾素的基因工程研究與應用[J]. 郭佳宏,廖學文,姚惠娟,樊生超,繆德年.  畜牧與獸醫(yī). 2013(10)
[10]血漿IL-18濃度與腦出血預后的相關性探討[J]. 楊志輝,陳宜德,吳曉玉.  放射免疫學雜志. 2013(01)

博士論文
[1]白介素18調控瓣膜間質細胞鈣化的實驗研究[D]. 朱錦富.南京醫(yī)科大學 2018
[2]HMGB1誘導角質形成細胞增殖和釋放IL-18在銀屑病發(fā)病中的作用和機制研究[D]. 張偉剛.中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學 2018
[3]瑞舒伐他汀對冠脈介入術后急性腎損傷的保護與腎小管上皮細胞IL-18受體表達及其在細胞內(nèi)的信號傳導[D]. 林楠.青島大學 2017
[4]白介素18對胰腺癌免疫治療作用及其機制的研究[D]. 郭興軍.華中科技大學 2015
[5]白細胞介素-18及相關標志物在深靜脈血栓形成中的表達變化與作用機理研究[D]. 李光第.昆明醫(yī)科大學 2015
[6]犬Ⅲ型干擾素的功能特點及B型流感病毒NEP蛋白出核功能研究[D]. 范文輝.廣西大學 2015
[7]畢赤酵母表達犬長效干擾素融合蛋白的研究[D]. 王照.吉林農(nóng)業(yè)大學 2013

碩士論文
[1]血漿NLRP3及其下游因子IL-1β、IL-18與2型糖尿病合并急性冠脈綜合征的相關性[D]. 劉旦旦.延安大學 2019
[2]遞送柔嫩艾美耳球蟲EtMIC2蛋白與IL-18共表達核酸疫苗侵入型乳酸菌免疫保護效果研究[D]. 張贊.吉林農(nóng)業(yè)大學 2019
[3]IL-18-607C/A位點的基因多態(tài)性與兒童腸道病毒71型腦炎的相關性研究[D]. 宋杰.青島大學 2019
[4]Caspase-1，IL-1β和IL-18調控在云芝糖肽（PSP）誘導的Molt-4細胞死亡機制中的作用研究[D]. 黃譽嫻.上海師范大學 2019
[5]犬β干擾素的表達及其抗細小病毒復制的研究[D]. 黃夢秋.貴州大學 2019
[6]白細胞介素-18影響咪喹莫特誘導的銀屑病小鼠模型皮膚炎癥的研究[D]. 牛雪麗.中國醫(yī)科大學 2019
[7]IL-2、IL-18、TNF-α與神經(jīng)型布氏桿菌病的相關性研究[D]. 王虹富.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學 2019
[8]IL-18在主動脈夾層患者組織和血漿中的表達及臨床意義[D]. 胡�，�.河北工程大學 2019
[9]血漿IL-18在血管性認知障礙患者中的表達及意義[D]. 王景峰.南京醫(yī)科大學 2018
[10]白介素-18參與小鼠腦卒中后抑郁樣行為的機制研究[D]. 趙辰宇.蘇州大學 2018



本文編號：3169079