【摘要】：蛋白質(zhì)飼料品質(zhì)與動物機(jī)體健康和生長發(fā)育密切相關(guān),但蛋白質(zhì)飼料在運(yùn)輸、加工、儲存等過程中易在多種因素作用下發(fā)生氧化修飾。目前,關(guān)于蛋白質(zhì)氧化對飼料品質(zhì)及動物的影響及相關(guān)緩解措施研究甚少。為此,本研究以大豆分離蛋白(SPI)為材料,與大豆油混合并進(jìn)行加熱處理,初步探討飼料中蛋白質(zhì)氧化規(guī)律。以肉雞為研究對象,探討氧化蛋白對肉雞生產(chǎn)性能、消化功能及氧化還原狀態(tài)的影響,并以不同類型維生素E為調(diào)控措施,探索其對攝食氧化蛋白肉雞的緩解作用及相關(guān)機(jī)制。研究分為以下六個試驗(yàn):試驗(yàn)一旨在研究加熱及大豆油處理對大豆分離蛋白中的蛋白質(zhì)氧化的影響。將SPI、SPI與1%大豆油(SPIO1)、SPI與2%大豆油(SPI02)混合物分別置于烘箱中100℃熱處理1、2、4、8 h,測定相關(guān)氧化指標(biāo)。結(jié)果表明,隨加熱時間延長,各組蛋白質(zhì)羰基含量顯著升高、游離巰基及總疏基含量顯著降低(P0.05);各組氮溶解指數(shù)(NSI)、SPIO1和SPI02組的DM和CP的體外消化率顯著降低(P0.05 )。添加2%的大豆油顯著提高熱處理8 h SPI的蛋白羰基含量(P0.05 ),降低NSI( P0.05 )。電泳結(jié)果表明,隨著加熱時間的延長,大豆分離蛋白的β和B條帶明顯變淡,α, α,條帶在8 h時變淡,A條帶無明顯變化。試驗(yàn)二旨在探討氧化大豆分離蛋白對肉雞生產(chǎn)性能和消化功能的影響。選用216只1日齡愛拔益加(AA)肉仔雞,隨機(jī)分為3組,每組6重復(fù),每重復(fù)12只雞。1組為對照組(CON ),飼喂玉米-SPI型基礎(chǔ)日糧;2組飼喂將日糧中SPI熱處理8 h的日糧(HSPI); 3組飼喂將日糧中SPI和2%大豆油混合后加熱8 h的日糧(HSPIO )。試驗(yàn)期21 d。結(jié)果表明,HSPI和HSPIO組肉雞的ADG較對照組顯著降低(P0.05 ),14 d和21 d血清總蛋白水平及21 d空腸器官指數(shù)顯著降低(P0.05)。與對照組相比,HSPIO降低了肉雞14 d前腸食糜胰蛋白酶、21 d胰腺淀粉酶、21 d前腸食糜淀粉酶和胰蛋白酶活性(P0.05 ); HSPI和HSPIO組肉雞的21 d胰腺胰蛋白酶活性顯著降低(P0.05)。HSPIO組肉雞18-20 d的DM、OM和CP表觀利用率顯著降低(P0.05 )。試驗(yàn)三旨在探討氧化大豆分離蛋白對肉雞機(jī)體氧化還原狀態(tài)的影響。試驗(yàn)設(shè)計(jì)同試驗(yàn)二。結(jié)果表明,與對照組相比,HSPIO組血清GSH-Px活性顯著降低(P0.05 );HSPI和HSPIO組血清T-AOC、GSH含量和肝臟CAT活性顯著降低(P0.05 ); HSPIO組肝臟GSH含量、十二指腸和空腸黏膜的GSH-Px活性顯著降低(P0.05 )。HSPIO組肉雞肝臟羥自由基清除能力顯著低于對照組(P0.05 ),空腸黏膜超氧陰離子清除能力顯著低于對照組和HSPI組(P0.05 )。與對照組相比,HSPI和HSPIO顯著提高肉雞血清和空腸黏膜的羰基、肝臟AOPPs和血清MDA含量(P0.05 ),顯著降低肝臟總巰基含量(P0.05); HSPIO顯著提高了肝臟羰基、血清AOPPs、肝臟和空腸黏膜MDA含量(P0.05 )。HSPIO組肉雞空腸黏膜AOPPs顯著高于其他兩組(P0.05 )。試驗(yàn)四旨在研究不同類型VE對攝食氧化大豆分離蛋白肉雞生產(chǎn)性能、抗氧化功能及Nrf2信號通路的影響。選用400只1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞,隨機(jī)分為5組,每組8重復(fù),每個重復(fù)10只。第1組為對照組(CON),飼喂玉米-SPI型基礎(chǔ)日糧;第2組飼喂將日糧中SPI和2%大豆油混合后加熱8 h的日糧(HSPIO);第3組飼喂HSPIO+ 200 mg/kg合成VE( dl-α-生育酚醋酸酯)日糧(SE);第4組飼喂HSPIO + 200 mg/kg天然VE (α-、β-、γ-、δ-混合生育酚)日糧(NE);第5組飼喂HSPIO + 100 mg/kg合成VE (dl-α-生育酚醋酸酯)+100mg/kg天然VE (α-、β-、γ-、δ-混合生育酚)日糧(SNE)。試驗(yàn)期42 d。結(jié)果表明,HSPIO降低了后期和全期ADG (P0.05),顯著提高42 d胰腺器官指數(shù)和21 d血清GPT含量(P0.05 )。與HSPIO組相比,SE和SNE組ADG顯著提高(P0.05 ),各VE組42 d胰腺器官指數(shù)和21 d血清GPT含量顯著降低(P0.05)。血清、肝臟和空腸黏膜α-生育酚及總生育酚含量以SE組最高(P0.05 ),血清β-+γ-生育酚以NE組最高(P0.05 ),肝臟和空腸黏膜β-+γ-生育酚以NE和SNE組相對較高。HSPIO降低了肉雞肝臟和空腸黏膜的抗氧化能力及相關(guān)基因表達(dá),日糧添加不同類型VE可一定程度提高抗氧化酶活性及相關(guān)基因表達(dá)和GSH含量,降低蛋白質(zhì)和脂質(zhì)氧化產(chǎn)物含量。HSPIO組肉雞肝臟Nrf2蛋白表達(dá)量較對照組顯著降低(P0.05 ), NE組肝臟Nrf2蛋白表達(dá)較HSPIO組顯著升高(P0.05 )。日糧處理對各組肉雞肝臟Keap1蛋白表達(dá)量無顯著影響(P0.05 )。試驗(yàn)五旨在研究不同類型VE對攝食氧化大豆分離蛋白肉雞肝臟及空腸黏膜細(xì)胞凋亡的影響。試驗(yàn)設(shè)計(jì)同試驗(yàn)四。結(jié)果表明,HSPIO組較對照組顯著提高了 42 d肝臟和空腸黏膜caspase-3的含量(P0.05 ),顯著降低了肝臟Bcl-2含量(P0.05 )。與HSPIO組相比,SE和SNE組42 d肝臟caspase-3含量、各VE組空腸黏膜caspase-3含量、SE和SNE組空腸黏膜Bax含量顯著降低(P0.05 )。與對照組相比,HSPIO組21 d肝臟caspase-3、Bax和p53基因表達(dá)量顯著升高(P0.05 ), 42 d肝臟Bcl-2表達(dá)量顯著降低(P0.05), 21 d空腸黏膜caspase-3表達(dá)量顯著升高(P0.05)。與HSPIO組相比,NE組21 d肝臟caspase-3、各VE組Bax、SE和NE組p53表達(dá)量下降(P0.05 ),SE 和 SNE 組 Bcl-2 表達(dá)量提高(P0.05 );各 VE 組 42 d 肝臟 caspase-3表達(dá)量顯著降低(P0.05 ),SNE組Bcl-2表達(dá)量顯著升高(P0.05 ); SE和NE組21 d空腸黏膜caspase-3表達(dá)量顯著降低(P0.05 ),SE和SNE組42 d空腸黏膜Bcl-2表達(dá)量顯著升高(P0.05 )。HSPIO組肝臟caspase-3及cleaved caspase-3蛋白表達(dá)較對照組顯著提高(P0.05 ),Bcl-2蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05 )。與HSPIO組相比,各VE組肝臟caspase-3、SE和NE組肝臟cleaved caspase-3蛋白表達(dá)量顯著降低(P0.05 ),NE組肝臟Bcl-2蛋白表達(dá)顯著升高(P0.05 )。日糧處理對各組肝臟細(xì)胞Bax蛋白表達(dá)均無顯著影響(P0.05 )。試驗(yàn)六旨在探討不同類型VE對攝食氧化大豆分離蛋白肉雞肌肉成分、肌肉品質(zhì)及抗氧化功能的影響。試驗(yàn)設(shè)計(jì)同試驗(yàn)四。結(jié)果表明,HSPIO組肉雞胸肌率和腿肌率均顯著低于對照組(P0.05 );與HSPIO組相比,日糧添加VE可以顯著提高胸肌率(P0.05 )。各處理組胸肌常規(guī)化學(xué)組成及氨基酸組成均無顯著差異(P0.05 )。HSPIO組胸肌pH45min顯著低于SE和NE組(P0.05 ),a*45 min顯著低于各VE組(P0.05 ),a*24h顯著低于SE組(P0.05 ),24 h滴水損失顯著高于其他各組(P0.05 )。VE組肉雞胸肌α-生育酚及總生育酚含量較HSPIO顯著提高(P0.05) ; NE組肉雞胸肌β-+γ-生育酚含量顯著高于其他各組(P0.05 )。與HSPIO組相比,SE和NE組胸肌GSH-Px、SE和SNE組GSH含量顯著升高(P0.05 ),SE和SNE組羰基和MDA含量顯著降低(P0.05)。綜上所述,得出以下結(jié)論:1.加熱處理提高了大豆分離蛋白的羰基含量,降低了巰基含量、蛋白質(zhì)溶解度和體外消化率。2%大豆油加速了熱處理過程中SPI的蛋白質(zhì)氧化反應(yīng)進(jìn)程。2.氧化蛋白降低了肉雞消化功能及抗氧化功能,導(dǎo)致生產(chǎn)性能下降,以攝食SPI與2%大豆油混合加熱組最為嚴(yán)重。3.肉雞攝食氧化蛋白對其生產(chǎn)性能、抗氧化功能及相關(guān)基因表達(dá)產(chǎn)生了負(fù)面影響;添加不同類型VE可提高機(jī)體內(nèi)生育酚含量,并可能通過Nrf2信號通路,提高機(jī)體抗氧化酶及相關(guān)基因表達(dá),改善機(jī)體氧化還原狀態(tài),以合成和天然VE聯(lián)合添加組效果為佳。4.肉雞攝食氧化蛋白提高了組織細(xì)胞內(nèi)caspase-3、Bax含量及基因或蛋白表達(dá),降低Bcl-2含量及基因或蛋白表達(dá),誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;添加不同類型VE可緩解上述負(fù)面效應(yīng),抑制細(xì)胞凋亡。其中,合成VE在調(diào)控細(xì)胞凋亡因子含量方面效果較佳,天然VE在調(diào)控凋亡因子蛋白表達(dá)方面較佳。5.肉雞攝食氧化蛋白降低了產(chǎn)肉性能、胸肌肉品質(zhì)及抗氧化功能,引起氧化產(chǎn)物的積累;添加不同類型VE可改善產(chǎn)肉性能,提高胸肌抗氧化功能,改善肉品質(zhì),以合成VE組效果為佳。
【圖文】：

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【學(xué)位授予單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S831.5
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本文編號：2522386