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《第十一屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會摘要匯編》2016年

A族鏈球菌誘導(dǎo)細(xì)胞自噬機(jī)制的研究

馬翠卿  關(guān)曉菲  李苗  王家超  韓笑  魏林  

【摘要】：目的:A族鏈球菌(GAS)是一類革蘭氏陽性球菌,人類約90%的鏈球菌感染是由GAS引起的。GAS較強(qiáng)的侵襲力主要取決于其能產(chǎn)生多種胞外酶及毒素,例如脂磷壁酸、M蛋白、致熱外毒素、溶血素等。本課題擬就GAS能否誘導(dǎo)細(xì)胞自噬以闡述其入侵機(jī)體的發(fā)病機(jī)制。方法:Hep2細(xì)胞分別接受GAS全菌、FbaA-M+GAS、FbaA+M-GAS缺陷菌刺激,通過Western blot檢測自噬相關(guān)蛋白LC3,P62在不同時間點(diǎn)的表達(dá)變化,并用免疫熒光技術(shù)檢測LC3的分布定位。親和層析法純化Fba蛋白,M蛋白;Hep2細(xì)胞分別接受兩種蛋白的刺激后,用western blot檢測自噬相關(guān)蛋白LC3,P62在不同濃度和不同時間點(diǎn)的表達(dá)變化。用分段Fba蛋白分別刺激Hep2細(xì)胞,用westem blotting檢測自噬相關(guān)蛋白LC3,P62的表達(dá)變化。結(jié)果:GAS全菌、FbaA+M-GAS缺陷菌分別能誘導(dǎo)Hep2細(xì)胞的P62,LC3-1的表達(dá)逐漸減少,而FbaAM+GAS卻沒有誘導(dǎo)以上兩種自噬蛋白的表達(dá)變化。用純化FbaA及M蛋白分別作用Hep2細(xì)胞后,只有FbaA引起了自噬蛋白P62,LC3-1的表達(dá)逐漸減少。進(jìn)一步分段表達(dá)FbaA蛋白然后刺激Hep2細(xì)胞后,結(jié)果顯示FbaA68-164區(qū)段蛋白刺激Hep2細(xì)胞后,呈現(xiàn)出自噬相關(guān)蛋白LC3-1、P62隨著時間逐漸降低的趨勢。結(jié)論:GAS全菌、FbaA+M-GAS缺陷菌株可誘導(dǎo)Hep2細(xì)胞發(fā)生自噬,而FbaA-M+GAS缺陷菌株并未誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的發(fā)生。GAS誘導(dǎo)Hep2細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞自噬和GAS的毒性蛋白Fba有關(guān)。FbaA誘導(dǎo)自噬的主要功能區(qū)定位于FbaA68-164蛋白區(qū)段內(nèi)。

【作者單位】：
【分類號】：R329.2
【正文快照】：

A族鏈球菌誘導(dǎo)細(xì)胞自噬機(jī)制的研究@馬翠卿$河北醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室!050000 @關(guān)曉菲$河北醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室!050000 @李苗$河北醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室!050000 @王家超$河北醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室!050000 @韓笑$河北醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室!050000 @魏林$河北醫(yī)科大

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