本文關(guān)鍵詞：苯醚甲環(huán)唑?qū)Π唏R魚(yú)毒性及作用機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)》 2015年

苯醚甲環(huán)唑?qū)Π唏R魚(yú)毒性及作用機(jī)制研究

穆希巖  

【摘要】：隨著人們對(duì)農(nóng)藥的環(huán)境負(fù)面作用認(rèn)識(shí)的提高,農(nóng)藥環(huán)境安全性評(píng)價(jià)工作已成為農(nóng)藥科學(xué)合理施用的基礎(chǔ)。魚(yú)類(lèi)作為生態(tài)系統(tǒng)中的重要生物,同時(shí)又是人類(lèi)的主要食物,農(nóng)藥對(duì)魚(yú)類(lèi)的毒性評(píng)價(jià)工作一直是農(nóng)藥環(huán)境評(píng)價(jià)的重點(diǎn)。 三唑類(lèi)農(nóng)藥是目前使用量很大的—類(lèi)殺菌劑,苯醚甲環(huán)唑作為一種有代表性的三唑類(lèi)殺菌劑,被廣泛應(yīng)用于各類(lèi)農(nóng)作物病害的防治。在中國(guó),苯醚甲環(huán)唑更是防治水稻病害的主要農(nóng)藥。因此評(píng)價(jià)其對(duì)水生生物的毒性非常重要。 本論文結(jié)合形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)手段,研究苯醚甲環(huán)唑?qū)Σ煌A段斑馬魚(yú)的毒性及作用機(jī)制：1.苯醚甲環(huán)唑?qū)Π唏R魚(yú)急性毒性 苯醚甲環(huán)唑?qū)Π唏R魚(yú)成魚(yú)、胚胎和仔魚(yú)的96h LC50值分別為1.45mg/L、2.34mg/L和1.17mg/L。該結(jié)果表明,斑馬魚(yú)不同生命階段對(duì)苯醚甲環(huán)唑的敏感性順序?yàn)椋鹤恤~(yú)成魚(yú)胚胎。2.苯醚甲環(huán)唑?qū)Π唏R魚(yú)胚胎發(fā)育影響將斑馬魚(yú)胚胎分別暴露于0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mg/L的苯醚甲環(huán)唑水溶液中。6天發(fā)育試驗(yàn)結(jié)果表明,苯醚甲環(huán)唑能夠在斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育過(guò)程中引起一系列的不良影響,包括孵化抑制、心率下降、自主運(yùn)動(dòng)異常、生長(zhǎng)抑制以及多種致畸作用。為進(jìn)一步探究苯醚甲環(huán)唑引起胚胎發(fā)育異常的機(jī)制,使用熒光定量PCR法檢測(cè)暴露于0.5和2.0mg/L苯醚甲環(huán)唑后,斑馬魚(yú)胚胎中與發(fā)育相關(guān)的11個(gè)基因的表達(dá)量變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)處理后,斑馬魚(yú)胚胎IGF-1、GH、BMP2和BMP4這四個(gè)基因表達(dá)水平顯著下降,而HEl和CYP26A1表達(dá)顯著上調(diào)。 3.苯醚甲環(huán)唑?qū)Π唏R魚(yú)抗氧化系統(tǒng)的影響 分別將斑馬魚(yú)成魚(yú)和胚胎暴露于0.01、0.50和1.00mg/L的苯醚甲環(huán)唑溶液中,暴露持續(xù)8天。分別在暴露后第4和8天時(shí),測(cè)定成魚(yú)肝臟和胚胎中三種抗氧化酶的活性以及編碼這三種酶的基因表達(dá)量。另外,使用硫代磷酸巴比妥酸法測(cè)定MDA含量,以檢測(cè)苯醚甲環(huán)唑造成的氧化損傷。酶活性與基因表達(dá)結(jié)果表明,1.0mg/L苯醚甲環(huán)唑處理后斑馬魚(yú)成魚(yú)肝臟和胚胎中SOD、CAT和GPx的活性顯著下降,同時(shí)伴隨著這些酶的編碼基因表達(dá)水平顯著下調(diào),而成魚(yú)肝臟中的抗氧化因子被抑制程度要高于胚胎。MDA含量測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn)斑馬魚(yú)成魚(yú)肝臟暴露后出現(xiàn)了明顯的脂質(zhì)過(guò)氧化,而在胚胎中并未發(fā)現(xiàn)MDA含量顯著變化。 4.苯醚甲環(huán)唑?qū)Π唏R魚(yú)脂類(lèi)含量的影響 將斑馬魚(yú)胚胎和成魚(yú)暴露于0.01、0.50和1.00mg/L的苯醚甲環(huán)唑水溶液中。分別在暴露后第4和8天時(shí)測(cè)定處理后成魚(yú)肝臟和胚胎中膽固醇、甘油三酯的含量以及與脂類(lèi)合成和代謝相關(guān)的6個(gè)基因的表達(dá)情況。生化試驗(yàn)結(jié)果表明試驗(yàn)濃度下苯醚甲環(huán)唑不能明顯影響斑馬魚(yú)胚胎和成魚(yú)肝臟中的膽固醇和甘油三酯含量。熒光定量PCR結(jié)果表明,苯醚甲環(huán)唑處理8天后成魚(yú)和胚胎中脂類(lèi)相關(guān)的基因表達(dá)水平均出現(xiàn)顯著變化。胚胎中CYP5I和HMGCRa表達(dá)上調(diào),FAS、ACC1、SREBF和PPARal表達(dá)下調(diào)；而成魚(yú)肝臟中這六種基因均表現(xiàn)出顯著下調(diào)。 5.苯醚甲環(huán)唑長(zhǎng)期暴露對(duì)斑馬魚(yú)成魚(yú)膽固醇含量影響 將不同性別的成年斑馬魚(yú)分開(kāi)長(zhǎng)期(30天)暴露于0.1、10和500μg/L幾的苯醚甲環(huán)唑水溶液中。分別在暴露后7、15和30天時(shí)檢測(cè)肝臟中膽固醇含量以及與膽固醇合成代謝相關(guān)的9個(gè)基因的表達(dá)水平。生化試驗(yàn)結(jié)果表明,雄性斑馬魚(yú)在500μg/L苯醚甲環(huán)唑暴露15天后肝臟中的膽固醇含量顯著下降,而該影響在30dpe時(shí)進(jìn)一步加強(qiáng)。而雌性斑馬魚(yú)肝膽固醇含量在整個(gè)暴露期間沒(méi)有顯著變化。此外,雌雄斑馬魚(yú)在苯醚甲環(huán)唑處理后體重均顯著下降,但是雄性個(gè)體的下降程度要明顯高于雌性個(gè)體。上述結(jié)果表明,雌性斑馬魚(yú)對(duì)苯醚甲環(huán)唑表現(xiàn)出更強(qiáng)的耐受能力�；虮磉_(dá)結(jié)果進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)斑馬魚(yú)雄魚(yú)在暴露后15天和30天時(shí),肝臟中膽固醇合成基因CYP51、HMGCRa、HMGCRb、DHCR7、DHCR24、SQLE、FDFP1、IDI1表達(dá)均顯著下降。而雌魚(yú)肝臟中這8種基因雖然在暴露后第7天時(shí)顯著下調(diào),但是隨著暴露時(shí)間延長(zhǎng),其下調(diào)作用逐漸減弱,在暴露30天時(shí)CYP51a、HMGCRa、sQLE和DHCR24較對(duì)照組表現(xiàn)出上調(diào)。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：S482.2;X174
【目錄】：

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7 何秋霞;劉可春;楚杰;王思鋒;韓利文;王希敏;;斑馬魚(yú)作為模式生物在心血管疾病研究中的應(yīng)用[J];生命的化學(xué);2009年05期

8 孫淑娜;桂永浩;蔣璆;宋后燕;鐘濤;;葉酸缺乏對(duì)斑馬魚(yú)胚胎造血系統(tǒng)影響的初步研究[J];營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào);2010年01期

9 田文靜;白偉;趙春祿;張智勇;崔俊安;何瀟;馬宇輝;趙宇亮;;納米ZnO對(duì)斑馬魚(yú)胚胎抗氧化酶系統(tǒng)的影響[J];中國(guó)環(huán)境科學(xué);2010年05期

10 孫桂金;潘杰;劉可春;王雪;王思鋒;;斑馬魚(yú)不同發(fā)育時(shí)期血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2基因表達(dá)的實(shí)時(shí)定量PCR分析[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年16期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬雯雯;杭曉明;王巍;劉聰;孫野青;;模擬微重力影響斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育的蛋白質(zhì)組特征[A];“基因、進(jìn)化與生理功能多樣性”海內(nèi)外學(xué)術(shù)研討會(huì)暨中國(guó)生理學(xué)會(huì)第七屆比較生理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2009年

2 張利軍;史慧勤;彭雙清;;基于斑馬魚(yú)模式動(dòng)物的阿霉素心臟毒性作用研究[A];2010年全國(guó)藥物毒理學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2010年

3 王晗;;斑馬魚(yú)生物鐘調(diào)節(jié)的分子遺傳和基因組機(jī)制[A];2011年全國(guó)時(shí)間生物醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

4 林秀坤;;斑馬魚(yú)作為抗腫瘤藥物模型的分子基礎(chǔ)[A];第四屆中國(guó)腫瘤大會(huì)中國(guó)藥理學(xué)會(huì)腫瘤藥理專(zhuān)業(yè)委員會(huì)分會(huì)場(chǎng)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2006年

5 侯佳;桂永浩;張立鳳;王躍祥;宋后燕;鐘濤;;視黃酸缺乏對(duì)斑馬魚(yú)胚胎心臟發(fā)育的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五次全國(guó)兒科中青年學(xué)術(shù)交流大會(huì)論文匯編（上冊(cè)）[C];2008年

6 陳錫強(qiáng);韓利文;王希敏;王思鋒;侯海榮;劉可春;;促滲劑氮酮對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的透皮作用及其毒性影響(英文)[A];2012年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十二屆中國(guó)藥師周論文集[C];2012年

7 于永利;楊景峰;王思珍;董武;;高殘留農(nóng)藥福美雙對(duì)斑馬魚(yú)胚胎體節(jié)以及脊索的影響[A];持久性有機(jī)污染物論壇2010暨第五屆持久性有機(jī)污染物全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

8 巴雅斯胡;楊景峰;于永利;王思珍;董武;;高殘留農(nóng)藥代森鋅誘導(dǎo)斑馬魚(yú)胚胎脊索變形[A];持久性有機(jī)污染物論壇2011暨第六屆持久性有機(jī)污染物全國(guó)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

9 張利軍;郭家彬;苑曉燕;史慧勤;趙君;束玉磊;彭雙清;;應(yīng)用斑馬魚(yú)胚胎和幼魚(yú)評(píng)價(jià)布洛芬的心臟毒性[A];2013年（第三屆）中國(guó)藥物毒理學(xué)年會(huì)暨藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究論壇論文摘要[C];2013年

10 朱小山;朱琳;李燕;端正花;;富勒烯(C_(60))對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育毒性的初步研究[A];第三屆全國(guó)環(huán)境化學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2005年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 劉妍;[N];中國(guó)漁業(yè)報(bào);2008年

2 本報(bào)記者 滕繼濮;[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

3 楓葉　編譯;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2012年

4 記者 熊琳暉 通訊員 孫慧;[N];長(zhǎng)江日?qǐng)?bào);2013年

5 羅剛 李兵;[N];健康報(bào);2004年

6 記者 李學(xué)梅;[N];新華每日電訊;2010年

7 本報(bào)記者 許琦敏;[N];文匯報(bào);2012年

8 本報(bào)記者 許琦敏;[N];文匯報(bào);2011年

9 記者 劉霞;[N];科技日?qǐng)?bào);2008年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 徐繪;17α-炔雌醇對(duì)斑馬魚(yú)生殖系統(tǒng)的影響及其機(jī)理的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

2 陳浩;直觀(guān)檢測(cè)環(huán)境雌激素的轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)系的建立及其應(yīng)用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

3 杜長(zhǎng)青;斑馬魚(yú)胸腺苷酸合成酶基因的克隆與表達(dá)調(diào)控[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2005年

4 周勝利;沙蠶毒素類(lèi)殺蟲(chóng)劑對(duì)斑馬魚(yú)的發(fā)育和生殖毒性[D];浙江大學(xué);2010年

5 宋春霞;斑馬魚(yú)胸苷酸合成酶基因的表達(dá)及調(diào)控機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2008年

6 竺林;激活誘導(dǎo)胞嘧啶脫氨酶基因在斑馬魚(yú)中的功能研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

7 殷健;重金屬對(duì)斑馬魚(yú)的毒性效應(yīng)及作用機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

8 普佳睿;神經(jīng)調(diào)節(jié)素1在斑馬魚(yú)腸神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中的作用[D];華中科技大學(xué);2013年

9 王燕舞;以噬菌體展示技術(shù)鑒定斑馬魚(yú)早期胚胎發(fā)育相關(guān)基因的研究[D];武漢大學(xué);2013年

10 王倩;斑馬魚(yú)抗寒模型的構(gòu)建及魚(yú)類(lèi)相關(guān)基因功能探討[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 曹娜;雙酚A對(duì)斑馬魚(yú)的毒性以及內(nèi)分泌干擾作用[D];上海海洋大學(xué);2011年

2 向霄;環(huán)境雌激素與抗雌激素對(duì)斑馬魚(yú)胚胎的復(fù)合效應(yīng)研究[D];上海交通大學(xué);2012年

3 勉麗娜;水中苯酚含量的測(cè)定及其對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育的生態(tài)毒性診斷研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2008年

4 王稼農(nóng);用于藥物安全性評(píng)價(jià)的斑馬魚(yú)生物技術(shù)平臺(tái)建設(shè)研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2010年

5 劉嗣華;乙草胺和莠去津?qū)Π唏R魚(yú)的毒性影響研究[D];河北大學(xué);2007年

6 孫璐;斑馬魚(yú)中第二個(gè)纖連蛋白基因的識(shí)別與表達(dá)分析[D];南京師范大學(xué);2005年

7 周瑞芳;凝血因子Ⅲb在斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育中的作用[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

8 李淼;地塞米松磷酸鈉導(dǎo)致斑馬魚(yú)顱面部發(fā)育異常的研究[D];華中科技大學(xué);2009年

9 徐永學(xué);高效氯氰菊酯對(duì)斑馬魚(yú)胚胎發(fā)育的毒性影響[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

10 吳迪;林丹、β-硫丹對(duì)斑馬魚(yú)內(nèi)分泌干擾效應(yīng)研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：苯醚甲環(huán)唑?qū)Π唏R魚(yú)毒性及作用機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：238409