【摘要】：公豬繁殖力不僅直接決定公豬站的經(jīng)濟效益,而且影響規(guī)模化豬場母豬的繁殖性能。生產(chǎn)中精子活力低、畸形率高是公豬繁殖力降低的重要原因。日糧是影響公豬精液品質(zhì)的重要因素。研究證實:日糧n-3多不飽和脂肪酸(poly unsaturated fatty acid,PUFAs)可改善公豬精液品質(zhì),而不同n-3PUFA來源、添加量及持續(xù)作用時間下日糧n-3PUFAs對公豬繁殖力的改善并不一致;且日糧n-3PUFAs會增加精子膜脂質(zhì)過氧化敏感性,不利于公豬繁殖力。日糧維生素E(vitamin E,VE)常用來緩解這種脂質(zhì)過氧化,但n-3PUFAs和VE的聯(lián)合添加使其作用效果并不明確且不穩(wěn)定。因此,本研究的目的是在研究不同日糧n-6:n-3比和VE對公豬精液品質(zhì)、精子脂肪酸組成及抗氧化狀態(tài)影響的基礎(chǔ)上,篩選有利于公豬精液品質(zhì)改善的日糧n-6:n-3比和VE,進一步驗證這些日糧n-6:n-3比和VE對公豬精液品質(zhì)及繁殖力的改善,并通過精子膜結(jié)構(gòu)和功能的修飾及機體、精液中抗氧化狀態(tài)的調(diào)節(jié)來探討其可能的作用機理,為富含n-3PUFAs的原料和VE在公豬營養(yǎng)中的應用提供理論指導和技術(shù)支持。主要的研究內(nèi)容和結(jié)果如下:第一部分研究日糧n-6:n-3比和VE對公豬精液品質(zhì)、精子脂肪酸組成及抗氧化狀態(tài)的影響。試驗選取48頭健康成熟的長白公豬,按照年齡(24.30±1.78月)和精液品質(zhì)接近的原則將48頭公豬隨機分為6組,每組8頭公豬,每頭公豬1個重復,單欄飼喂。試驗以玉米-豆粕為主要原料配制等能等氮基礎(chǔ)日糧。采用3×2雙因素設(shè)計,試驗公豬每日飼喂2.5kg基礎(chǔ)日糧外,再分別飼喂60g豆油、45g豆油+15g魚油和60g魚油,形成3個n-6:n-3比(14.4、6.6和2.2:高,中和低比率)日糧。每個比率的日糧分別添加200和400 mg/kg(低和高劑量)VE,形成6個試驗組。測定第0、6、8、10、12和14周精液品質(zhì)。采集0W和8W血液和精液,用于測定精子脂肪酸組成,以及機體、精子和精清中的抗氧化狀態(tài)。試驗結(jié)果顯示:1)日糧n-6:n-3比顯著改變了精子脂肪酸組成。與高比率組相比,中比率和低比率組在試驗第8周均顯著提高了精子二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)、總n-3PUFA含量(P0.05),降低了精子二十二碳五烯酸(Docosapentaenoic acid,DPA)、總n-6PUFA含量和n-6:n-3比(P0.05);總PUFA未受日糧處理的影響(P0.05)。2)日糧n-6:n-3比和VE顯著改變了公豬血清、精子和精清抗氧化能力。試驗第8周,中比率組較高比率和低比率組顯著提高了精清超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD:88.2 vs 66.2、72.6 U/m L)和總抗氧化能力(Total antioxidant capacity,TAC:5.8 vs 4.7、4.7 U/m L)(P0.05);與高比率組相比,中比率組對精子和血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量無顯著影響(3.1 vs 3.2 nmol/108sperm cells;2.7 vs 3.2 nmol/m L,P0.05);高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了血清、精子和精清中SOD,及血清和精清中TAC(P0.05),同時顯著降低了精子MDA(3.1 vs 3.7 nmol/108 sperm cells,P0.05)。3)日糧n-6:n-3比和VE顯著影響了公豬精子活力。在第8-14周時,中比率組顯著(第8、10和14周)(P0.05)或極顯著(第12周)(P0.01)提高了直線運動精子比例,改善了精子活力。在第8周,高劑量VE組較低劑量VE組極顯著改善了直線運動精子活力(P=0.01);在第10、12和14周時則有顯著改善(P0.05;P=0.05;P0.05)。第二部分在第一部分試驗的基礎(chǔ)上,研究日糧n-6:n-3比和VE對公豬精子產(chǎn)出、精子形態(tài)特征和運動能力、常溫保存后精子活力和性欲的影響。試驗選取40頭杜洛克公豬,按照年齡(591.5±9.2 d)、體重(272.9±47.6 kg)和精液品質(zhì)接近的原則隨機分為4組,每組10頭公豬,每頭公豬1個重復,單欄飼喂。試驗以玉米-豆粕為主要原料配制等能等氮基礎(chǔ)日糧。采用2×2雙因素設(shè)計,試驗公豬每日飼喂2.5kg基礎(chǔ)日糧外,再分別飼喂60g豆油和45g豆油+15g魚油,形成2個n-6:n-3比(14.4和6.6:高和低比率)日糧。每個比率的日糧分別添加200和400 mg/kg(低和高劑量)VE,形成4個試驗組。采精時記錄0、8、12和16周公豬性欲;采精后分析0、8、12、16和20周公豬精子產(chǎn)出、精子形態(tài)特征和精子運動能力及17oC常溫保存12h、36h、72h和120h后精子活力。試驗結(jié)果表明:1)0-8周時,日糧n-6:n-3比和VE對精液量、精子密度和精子數(shù)、精子形態(tài)特征和運動能力、常溫保存后精子活力和性欲無顯著影響(P0.05)。2)12-20周時,與高比率組相比,低比率組顯著提高了第12、16和20周直線精子活力(P0.05),精子直線運動速度(straight-line velocity,VSL)、平均路徑速度(average path velocity,VAP)和曲線速度(curvilinear velocity,VCL)(P0.05);高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了第12和20周直線精子活力、VSL和VCL(P0.05)。3)低比率組較高比率組顯著提高了第12、16和20周精子正常形態(tài),降低了精子中部畸形(P0.05);高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了第16和20周精子正常形態(tài)(P0.05),顯著降低了第12、16和20周近端原生質(zhì)滴(P0.05)。4)日糧n-6:n-3比對第12、16和20周的常溫保存后精子活力無顯著影響。高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了12周(12h和36h)和20周(12h、36h、72h和120h)常溫保存后直線運動活力(P0.05)。第三部分研究日糧n-6:n-3比和VE對公豬精子膜結(jié)構(gòu)、膜功能和抗氧化狀態(tài)的影響及其改善公豬繁殖力的機理。試驗動物、日糧及試驗設(shè)計同第二部分試驗。采集試驗0、8、12、16和20周血液和精液,測定精子膜結(jié)構(gòu)和功能完整性、膜流動性、線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential,MMP)、活性氧水平、精子脂肪酸組成、VE含量、SOD酶活、谷胱甘肽過氧化物酶活(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、MDA含量和8-羥基脫氧鳥苷(8-hydroxy-2-deoxyguanosine,8-OH d G)含量、精清TAC及血清和精清中SOD酶活、GSH-Px酶活和MDA含量。試驗結(jié)果顯示:1)日糧n-6:n-3比顯著影響了公豬精子脂肪酸組成。與高比率組相比,低比率組顯著提高了12周和16周精子DHA、總n-3PUFA含量(P0.05),降低了精子DPA、總n-6PUFA含量、DPA:DHA比和n-6:n-3比(P0.05)。2)日糧n-6:n-3比和VE顯著改變了公豬精子膜結(jié)構(gòu)和功能。低比率組較高比率組顯著提高了12和16周精子膜結(jié)構(gòu)完整性、膜流動性(P0.05)、12周MMP、16周膜功能完整性(P0.05);高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了12和16周MMP(P0.05)及16周精子膜結(jié)構(gòu)完整性和流動性(P0.05)。3)日糧n-6:n-3比和VE顯著影響了公豬血清、精子和精清中抗氧化狀態(tài)。在第12、16和20周,低比率組和高劑量VE組分別顯著提高了血清SOD酶活和GSH-Px酶活及精子SOD酶活(P0.05),顯著降低了血清MDA含量和精子8-OHd G含量(P0.05)。高劑量VE組顯著提高了精子、精清GSH-Px酶活和精清SOD酶活和TAC,降低了精子活性氧水平和精子、精清MDA含量(P0.05)。日糧n-6:n-3比對精子VE含量無顯著影響,而高劑量VE組較低劑量VE組顯著提高了精子維生素E含量(P0.05)。綜上所述,本研究的結(jié)論是:1)日糧n-6:n-3比會影響公豬精液品質(zhì)。當日糧n-6:n-3比為6.6時,精子活力和精子形態(tài)得到顯著改善;同時在這種試驗條件下,日糧維生素E水平達到400 mg/kg時有利于公豬精子活力和精子形態(tài)的改善。2)日糧n-6:n-3比為6.6時,精子脂肪酸組成改變,進而改善了精子膜結(jié)構(gòu)和膜功能,改善公豬繁殖力;相應地,在這種試驗條件下,日糧維生素E水平達到400 mg/kg后可提高公豬機體和精液中抗氧化能力,降低精子氧化損傷程度,從而改善公豬繁殖力。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S828.5

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本文編號：2365009