【摘要】：橘小實蠅(Bactrocera dorsalis)是一種危害數(shù)百種果蔬的重要農業(yè)害蟲,每年在中國乃至亞洲造成重大經濟損失。RNAi是一種在真核生物中由ds RNA誘發(fā)的m RNA特異性降解的機制,由于其高效簡便等特點,廣泛應用于基因組學,醫(yī)學以及農業(yè)等方面的研究。雖然RNAi在真核生物中高度保守并且在農業(yè)害蟲的研究中取得了長足發(fā)展,但將其應用于實踐生產還存在許多問題待解決,例如在雙翅目果蠅中喂食法不能誘導RNAi效應以及在橘小實蠅中存在對RNAi免疫耐受的現(xiàn)象。本研究探索了橘小實蠅對RNAi免疫耐受的分子調控機制,揭示了橘小實蠅中脂肪酸的生物合成與代謝通路在其對RNAi的免疫耐受反應中起重要作用。并且證明了脂肪酸延伸酶對橘小實蠅的體液免疫通路也具有重要的調控作用。1.已免疫橘小實蠅血淋巴能誘導未經處理的橘小實蠅對RNAi的免疫耐受反應。喂食橘小實蠅ds-rpl19,并確定成功誘導了RNAi免疫耐受反應后,提取血淋巴注射并注射進未處理的橘小實蠅中。在注射已免疫組血淋巴后喂食ds-rpl19的橘小實蠅中,目的基因未出現(xiàn)下調。而注射對照組血淋巴后再喂食ds RNA的橘小實蠅中則出現(xiàn)了顯著的RNAi效應,靶標基因的表達量減少了51%。同時,將血淋巴在25°C下分別處理1 d、2 d、3 d或將血淋巴液經-20°C低溫處理后注射,均不會影響其對RNAi免疫耐受的誘導能力。而經100°C高溫處理10 min后,血淋巴液喪失誘導RNAi免疫耐受反應。注射經高溫處理后的血淋巴液再喂食ds RNA,目的基因的表達量出現(xiàn)了48%的下調。這些結果表明已對RNAi免疫耐受的橘小實蠅血淋巴中存在可能的 誘導因子‖調控橘小實蠅的RNAi免疫耐受反應,并且該 誘導因子‖具有熱不穩(wěn)定性而在室溫下能較長時間保持誘導能力。2.通過比較免疫組和對照組橘小實蠅血淋巴中各種化學組分的含量,發(fā)現(xiàn)免疫組橘小實蠅血淋巴中亞油酸:花生四烯酸的比例上升。通過免疫組和[兆殫儺∈滌馨痛蛔檠Х治，

本文編號：2155913