發(fā)布時(shí)間：2018-01-01 04:30

  本文關(guān)鍵詞：紅螯光殼螯蝦VC的需求量及其對(duì)免疫性能的影響　出處：《華東師范大學(xué)》2016年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：本論文以紅螯光殼螯蝦為研究對(duì)象,通過在飼料中添加不同水平的維生素C(VC),分析了紅螫光殼螯蝦生長(zhǎng)指標(biāo)和肝胰腺、鰓、肌肉和血淋巴組織中LSZ、 PO、SOD活性的變化；探討了VC對(duì)紅螯光殼螯蝦血細(xì)胞數(shù)量、溶血活性、凝集活性、吞噬活性和抑菌率的影響；比較了VC對(duì)WSSV侵染后紅螯光殼螯蝦免疫性能的影響；結(jié)合血細(xì)胞的顯微、超微結(jié)構(gòu)變化,進(jìn)一步探究了VC的免疫保護(hù)作用。結(jié)果可為深入探討VC對(duì)甲殼動(dòng)物蝦蟹免疫的作用機(jī)制提供理論依據(jù),同時(shí)可為紅螯光殼螯蝦的健康養(yǎng)殖及WSSV的預(yù)防提供解決方案,具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。1.不同水平的VC對(duì)紅螯光殼螯蝦生長(zhǎng)指標(biāo)及組織中VC積累量的影響VC在蝦蟹類甲殼動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育過程中發(fā)揮重要作用,為研究VC對(duì)紅螯光殼螯蝦生長(zhǎng)的影響,進(jìn)行為期八周的養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)。飼料包含7個(gè)不同水平的VC組(0、100、200、400、800、1600、3200 mg/kg),結(jié)果顯示,當(dāng)VC添加量為0-400 mg/kg,紅螯光殼螯蝦的增重率和特定生長(zhǎng)率顯著上升(P0.05),當(dāng)VC添加量為800-3200 mg/kg時(shí),增重率和特定生長(zhǎng)率降低,且VC添加量越高螯蝦的增重率越低,但VC添加組的增重率和特定生長(zhǎng)率均高于未添加組。飼料中VC含量對(duì)紅螯光殼螯蝦成活率和肝體指數(shù)無顯著影響(P0.05)。紅螯光殼螯蝦肝胰腺中VC積累量最高,肌肉組織中次之,血淋巴中VC積累量最低。在一定范圍內(nèi),紅螫光殼螯蝦肝胰腺組織中VC積累量隨著VC添加量的增加而升高,當(dāng)飼料中VC添加量超過400 mg/kg時(shí),肝胰腺中的VC積累量不再增加。2.不同水平的VC對(duì)紅螯光殼螯蝦各組織中免疫酶活性的影響基礎(chǔ)飼料中添加不同水平的VC,紅螯光殼螯蝦體內(nèi)LSZ和PO活性顯著增強(qiáng)。當(dāng)飼料中VC添加量為800 mg/kg時(shí),螯蝦體內(nèi)的LSZ和PO活性最強(qiáng),且未添加VC組的酶活性明顯低于VC添加組(P0.05)。VC添加后,紅螯光殼螯蝦體內(nèi)各組織SOD活性均有不同程度的降低,而各VC添加組之間SOD活性無顯著差異(P0.05)。3.不同水平的VC對(duì)紅螯光殼螯蝦血淋巴活性的影響飼料中添加不同水平的VC后,紅螯光殼螫蝦血清中的溶血活性和抑菌活性均有不同程度的增加。VC添加組的溶血活性和抑菌活性均高于未添加組,差異顯著(P0.05),但各添加組之間的差異不顯著(P0.05)。當(dāng)飼料中VC含量為800 mg/kg時(shí),血細(xì)胞的凝集活性和吞噬活性增強(qiáng),當(dāng)VC含量繼續(xù)增加時(shí),血細(xì)胞的吞噬活性明顯降低,各VC添加組血細(xì)胞的凝集活性和吞噬活性均高于未添加組。紅螯光殼螯蝦血細(xì)胞中小顆粒細(xì)胞數(shù)目較多,其次為透明細(xì)胞,而大顆粒細(xì)胞的數(shù)目較少,VC添加后小顆粒細(xì)胞所占比例有所增加,且血細(xì)胞總數(shù)也有所增加。4.VC對(duì)WSSV侵染后紅螯光殼螯蝦免疫酶和免疫基因表達(dá)的影響紅螯光殼螯蝦C-型凝集素(C-type lectin)基因在血細(xì)胞中表達(dá)量最高,極顯著高于其它組織(P0.01),其次為肝胰腺組織,且在觸角腺和心臟組織中也有表達(dá),在肌肉、胃和腦中幾乎無表達(dá)。LSZ基因在肝胰腺組織中表達(dá)量最高,極顯著高于其它組織(P0.01)其次為觸角腺、腸和鰓組織,LSZ基因在肌肉組織中有微量表達(dá),在心臟、腦和胃中基本無表達(dá)。WSSV侵染后,紅螯光殼螯蝦的PO、LSZ活性以及C-type lectin、LSZ基因的表達(dá)量隨病毒侵染時(shí)間的延長(zhǎng)均呈現(xiàn)降低趨勢(shì)。在感染初期0-24 h內(nèi),免疫酶和基因表達(dá)量均有不同程度的上升,感染中期24-48 h內(nèi),隨著WSSV的不斷復(fù)制,免疫酶活和基因的表達(dá)量降低,到感染后期72-96 h,酶活性和基因的表達(dá)量極顯著降低(P0.01)。飼料中添加VC后,紅螫光殼螫蝦的免疫酶活性和基因表達(dá)量均高于未添加組,這表明VC在一定程度上能夠增強(qiáng)紅螯光殼螯蝦對(duì)WSSV的抵御能力,對(duì)紅螯光殼螯蝦起到免疫保護(hù)作用。5.VC對(duì)WSSV侵染紅螯光殼螯蝦后其血細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響采用瑞恩染色法和電子顯微技術(shù),研究WSSV侵染后紅螯光殼螯蝦血細(xì)胞顯微和超微結(jié)構(gòu)的變化,分析VC在染病后的紅螯光殼螯蝦體內(nèi)的免疫保護(hù)作用。WSSV侵染后,透明細(xì)胞和小顆粒細(xì)胞減少,大顆粒細(xì)胞所占的比例增加,三種類型的血細(xì)胞體積均有增大的趨勢(shì),大顆粒細(xì)胞和透明細(xì)胞核質(zhì)比顯著降低(P0.05)。隨著感染時(shí)間的延長(zhǎng),血細(xì)胞總數(shù)顯著減少(P0.05),其中800 mg/kg添加組血細(xì)胞數(shù)量保持在較高水平。至96h時(shí),顯微結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)顯示,0mg/kg組血細(xì)胞破損,無明顯的細(xì)胞核和核膜結(jié)構(gòu)；400 mg/kg組血細(xì)胞出現(xiàn)嚴(yán)重的異染色質(zhì)化現(xiàn)象；800 mg/kg血細(xì)胞出現(xiàn)異染色質(zhì)化,細(xì)胞膜邊緣模糊,但核膜較清晰。
[Abstract]:In this paper , the effects of VC on the growth index and the specific growth rate were studied by adding vitamin C ( VC ) at different levels in feed . In the early stage of infection , the expression of immune enzymes and genes was higher than that of other tissues ( P0.01 ) . At 800 mg / kg , heterochromatin was present in the blood cells , the border of the cell membrane was blurred , but the nuclear membrane was more clear .

【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S917.4

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本文編號(hào)：1362932