本文關(guān)鍵詞：BMP2對豬前體脂肪細(xì)胞分化的影響及其機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： BMP2 豬 前體脂肪細(xì)胞 細(xì)胞分化 RNAi

【摘要】：在畜牧生產(chǎn)實(shí)踐中,脂肪組織受到人們越來越多的關(guān)注,其分布與沉積量會影響肉品質(zhì)。人們希望肉質(zhì)鮮美、可口、多汁,這就需要肌肉中含有適度的脂肪。同時,脂肪組織還是內(nèi)分泌器官,其分泌的瘦素(leptin)、脂肪因子、白細(xì)胞介素和脂聯(lián)素(adiponectin)會參與能量代謝的調(diào)節(jié)。適量的脂肪對人體有益,過量的脂肪會引起代謝綜合征以及肥胖、糖尿病、高血壓等現(xiàn)代社會常見疾病。BMP2是分泌性蛋白的一種,為酸性疏水性蛋白,序列高度保守。近年在對間充質(zhì)干細(xì)胞、脂肪前體細(xì)胞以及胚胎干細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn),BMP2在脂肪生成過程中也有重要的調(diào)控作用。BMP2誘導(dǎo)脂肪前體細(xì)胞分化的研究目前主要集中于前體脂肪細(xì)胞系,而且這一促進(jìn)作用能被PPAR激動劑加強(qiáng)。本研究通過在體外培養(yǎng)分離到的豬原代前體脂肪細(xì)胞過程中添加適宜濃度的BMP2以促進(jìn)前體脂肪細(xì)胞向成熟細(xì)胞分化,通過深度測序技術(shù)探求BMP2促進(jìn)前體脂肪細(xì)胞分化為成熟細(xì)胞過程中的關(guān)鍵分子通路及作用機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)首先從仔豬皮下分離豬前體脂肪細(xì)胞、進(jìn)行體外培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化,并在誘導(dǎo)分化時添加適當(dāng)濃度的BMP2,分別通過油紅O染色、熒光定量PCR等方法鑒定前體脂肪細(xì)胞分化程度。結(jié)果表明:體外添加50ng/ml的BMP2可上調(diào)前體脂肪細(xì)胞PPARγ、C/EBPα、a P2基因m RNA的表達(dá)量,并促進(jìn)前體脂肪細(xì)胞分化和脂質(zhì)沉積。在篩選到最適添加濃度后,本研究利用高通量測序技術(shù)篩選BMP2處理組與未處理組的差異表達(dá)基因,并采用實(shí)時熒光定量PCR對測序結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果表明,豬前體脂肪細(xì)胞中添加BMP2處理組與未處理組共有692個基因的表達(dá)水平存在差異,這些基因中包含有447個上調(diào)基因,245個下調(diào)基因。Pathway分析結(jié)果顯示差異基因主要涉及細(xì)胞生長分化、參與PPARγ調(diào)控通路、免疫應(yīng)答等過程。隨后,本研究通過RNAi技術(shù)對差異表達(dá)基因RGS2和FAD3的具體功能進(jìn)行了深入研究。通過在豬前體脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化過程中轉(zhuǎn)染特異性si RNA敲減RGS2基因的表達(dá),結(jié)果表明降低RGS2基因m RNA的表達(dá)量會抑制豬前體脂肪細(xì)胞的分化和脂質(zhì)沉積。同樣,在豬前體脂肪細(xì)胞敲減FAD3基因m RNA的表達(dá)水平會促進(jìn)豬前體脂肪細(xì)胞的分化。因此,本研究明確了BMP2在豬前體脂肪細(xì)胞分化及脂質(zhì)沉積中的促進(jìn)作用;發(fā)現(xiàn)了大量由BMP2介導(dǎo)的、影響豬前體脂肪細(xì)胞分化的分子通路;并探討了RGS2基因?qū)ωi前體脂肪細(xì)胞分化的促進(jìn)作用及FAD3對豬前體脂肪細(xì)胞的分化的抑制作用。研究結(jié)果為深入了解BMP2基因的功能、解析前體脂肪細(xì)胞分化及脂質(zhì)沉積的機(jī)制提供了一定的理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S828

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 曾芳;丘德峰;童雄;徐建;王，

本文編號：1284859