本文關(guān)鍵詞：向日葵枯萎病菌的分離鑒定、致病力分化以及侵染過程的研究

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【摘要】：向日葵枯萎是由鐮刀菌屬(Fusarium spp.)真菌引起的一種維管束病害,嚴重時可導(dǎo)致植株整株枯死。在2013～2015年的向日葵田間病害調(diào)查中我們發(fā)現(xiàn)疑似向日葵枯萎病的發(fā)病株,因此,我們對采集于不同向日葵產(chǎn)區(qū)的疑似枯萎病的病樣利用科赫氏法則進行了病原菌的鑒定；同時還研究了病原菌的致病力分化及其對寄主的侵染過程,得到如下的結(jié)果：(1)從2013-2015年采集自7個省28個地區(qū)的疑似向日葵枯萎病樣中,共分離到病58株病原菌。形態(tài)學(xué)結(jié)合分子鑒定的結(jié)果表明所采集的樣本就是向日葵枯萎病的病樣,其病原菌分屬于鐮刀菌屬(Fusarium spp.)下的12個不同的種,其中尖孢鐮刀菌(F. oxysporum)12株、輪枝鐮刀菌(F. verticilloides)3株、磚紅鐮刀菌(F. lateritium)1株、銳頂鐮刀菌(F. acuminatum)5株、芬芳鐮刀菌(F. redolens) 3株、木賊鐮刀菌(F. equisei)3株、層出鐮刀菌(F. proliferum) 13株、茄病鐮刀菌(F. solani)3株、三線鐮刀菌(F. tricinctum)1株、禾谷鐮刀菌(F. cerealis)1株、變紅鐮刀菌(F. incarnatum)10株和黃瓜枯萎菌(Plectosphaerella cucumerina)3株。(2)從鐮刀菌屬(Fusarium spp.)每個種中隨機挑選一株代表菌株,對其生長速度、產(chǎn)孢量、溫度和pH對生長的影響、產(chǎn)毒能力及致病力進行測定。結(jié)果顯示不同種的鐮刀菌在生長速度、產(chǎn)孢量、產(chǎn)毒能力和致病力方面存在顯著的差異。(3)對分離到的鐮刀菌屬(Fusarium spp.)的優(yōu)勢種進行了致病力分化的研究結(jié)果表明尖孢鐮刀菌和層出鐮刀菌存在種內(nèi)致病力分化的現(xiàn)象,但是沒有寄主專化型的分化。(4)用致病力較強的優(yōu)勢種層出鐮刀菌對不同向日葵品種抗枯萎病的水平進行了鑒定,結(jié)果表明油葵的整體抗性要高于食葵品種。食葵品種中的抗枯萎病性水平最高的品種是JK103。(5)利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法,獲得帶有GFP標記的層出鐮刀菌轉(zhuǎn)化子。對其中隨機挑選的8株轉(zhuǎn)化子的菌落形態(tài)、生長速度、產(chǎn)孢量、孢子萌發(fā)率、粗毒素含量和致病力與野生型菌株進行比較。篩選到一株在表型和致病力上與野生菌株沒有差別的的轉(zhuǎn)化子FP-4作為后續(xù)研究侵染過程的接種菌株。(6)利用帶有GFP標記的層出鐮刀菌進行系統(tǒng)侵染的結(jié)果表明向日葵的初期侵染位點在根尖和側(cè)根的成熟區(qū)和分生區(qū),菌絲能在皮層細胞和導(dǎo)管中擴展。隨著時間的推移,在向日葵的莖桿、葉柄、葉片、花盤的苞葉內(nèi)膜、種子間的莢膜、種子仁膜和花粉粒上均能觀察到綠色的熒光信號,表明這些部位都有病原菌的定殖。(7)利用帶有GFP標記的層出鐮刀菌對向日葵抗感品種侵染的結(jié)果表明侵染初期病原菌在抗感品種根部的定殖能力沒有顯著差異。而在接種21 dpi后,在感病品種的根、莖、葉柄中都觀察到了病原菌的定殖,而抗病品種只在根和莖觀察到熒光信號。Q-PCR定量的結(jié)果也表明了病原菌在感病品種不同部位中定殖的量顯著高于抗病品種。
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S435.655

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本文編號：1270318