擬南芥WRKY12和WRKY13轉(zhuǎn)錄因子參與年齡途徑介導(dǎo)開花的機(jī)制研究
發(fā)布時間:2023-03-12 15:46
對植物而言,從營養(yǎng)生長到生殖生長的轉(zhuǎn)換是開花繁殖的關(guān)鍵階段,在合適的時間開花對植物的繁衍以及農(nóng)作物的產(chǎn)量有著至關(guān)重要的影響。植物開花是一個極為復(fù)雜的過程,受到內(nèi)部遺傳因子和外部環(huán)境條件的雙重調(diào)控。經(jīng)過多年來對植物開花調(diào)控途徑的研究,尤其是對模式植物擬南芥的研究,已取得非常顯著的成果,目前已探明5條主要的開花調(diào)控途徑,分別為春化途徑,光周期途徑,赤霉素途徑,年齡途徑,自主途徑。在短日照條件下,植物開花主要受到赤霉素途徑和年齡途徑的調(diào)控。我們前期的研究表明,WRKY12和WRKY13通過與DELLA蛋白形成復(fù)合物參與赤霉素途徑調(diào)控開花,同時,它們的表達(dá)模式與發(fā)育時間密切相關(guān),WRKY12的表達(dá)量穩(wěn)步上升,而WRKY13則逐漸降低。在年齡途徑中,miR156和SPL轉(zhuǎn)錄因子在轉(zhuǎn)錄水平上隨年齡的發(fā)展呈現(xiàn)出相反的表達(dá)模式,miR156逐漸下降,SPLs逐漸增加。根據(jù)這些證據(jù)我們推測,WRKY12和WRKY13可能也參與年齡途徑介導(dǎo)的植物開花誘導(dǎo)過程。為了驗(yàn)證這個假設(shè),我們首先通過熒光定量PCR檢測了短日照下WRKY12和WRKY13在WT,35S::MIR156和35S::MIM156植株中不同...
【文章頁數(shù)】:122 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮寫對照表
第一章 前言
1.1 植物開花研究進(jìn)展
1.2 光周期途徑調(diào)控植物開花
1.3 自主途徑調(diào)控植物開花
1.4 春化途徑調(diào)控開花
1.5 赤霉素途徑調(diào)控開花
1.6 年齡途徑調(diào)控開花
1.7 調(diào)控開花時間的其他途徑
1.8 SPL轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展
1.8.1 SPL轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控營養(yǎng)生長到生殖生長的時期轉(zhuǎn)換
1.8.2 SPL轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控間隔期
1.8.3 SPL轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控分蘗
1.8.4 SPL轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控葉夾角/穗分枝角/雄穗分枝角
1.8.5 SPL轉(zhuǎn)錄因子其他方面的調(diào)控功能
1.9 WRKY轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展
1.9.1 WRKY轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)特征和分類
1.9.2 WRKY轉(zhuǎn)錄因子響應(yīng)植物生物脅迫
1.9.3 WRKY轉(zhuǎn)錄因子響應(yīng)植物非生物脅迫
1.9.4 WRKY轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控植物發(fā)育
1.10 本研究課題的背景、目的和意義
第二章材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料、菌株和試劑
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌株及質(zhì)粒
2.1.3 主要試劑
2.2 研究方法
2.2.1 基因克隆及載體構(gòu)建
2.2.2 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌及Mini質(zhì)粒提取
2.2.3 材料種植與處理
2.2.4 農(nóng)桿菌感受態(tài)的制備及轉(zhuǎn)化
2.2.5 轉(zhuǎn)基因植株的鑒定與檢測試劑
2.2.6 酵母雜交轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)
2.2.7 細(xì)菌蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)及純化
2.2.8 GST Pull-down實(shí)驗(yàn)及Western Blot檢測
2.2.9 染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)實(shí)驗(yàn)
2.2.10 原生質(zhì)體瞬時表達(dá)檢測系統(tǒng)
2.2.11 凝膠遷移率實(shí)驗(yàn)(Electrophoretic Mobility Shift Assay)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 WRKY12和WRKY13的表達(dá)受到miR156的調(diào)控
3.2 SPL10直接結(jié)合WRKY12和WRKY13的啟動子
3.3 SPL10調(diào)控WRKY12和WRKY13的轉(zhuǎn)錄
3.4 SPL10調(diào)控開花部分依賴于WRKY12和WRKY13
3.5 SPL10與WRKY12和WRKY13相互作用
3.6 SPL10和WRKY12/WRKY13直接調(diào)控miR172b的轉(zhuǎn)錄
3.7 過表達(dá)miR172b部分互補(bǔ)wrky12-2突變體和WRKY13過表達(dá)晚花的表型
3.8 WRKY12促進(jìn)SPL10的轉(zhuǎn)錄活性,WRKY13抑制SPL10的轉(zhuǎn)錄活性
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
作者簡介
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的其他研究成果
本文編號:3761497
【文章頁數(shù)】:122 頁
【學(xué)位級別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮寫對照表
第一章 前言
1.1 植物開花研究進(jìn)展
1.2 光周期途徑調(diào)控植物開花
1.3 自主途徑調(diào)控植物開花
1.4 春化途徑調(diào)控開花
1.5 赤霉素途徑調(diào)控開花
1.6 年齡途徑調(diào)控開花
1.7 調(diào)控開花時間的其他途徑
1.8 SPL轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展
1.8.1 SPL轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控營養(yǎng)生長到生殖生長的時期轉(zhuǎn)換
1.8.2 SPL轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控間隔期
1.8.3 SPL轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控分蘗
1.8.4 SPL轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控葉夾角/穗分枝角/雄穗分枝角
1.8.5 SPL轉(zhuǎn)錄因子其他方面的調(diào)控功能
1.9 WRKY轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展
1.9.1 WRKY轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)特征和分類
1.9.2 WRKY轉(zhuǎn)錄因子響應(yīng)植物生物脅迫
1.9.3 WRKY轉(zhuǎn)錄因子響應(yīng)植物非生物脅迫
1.9.4 WRKY轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控植物發(fā)育
1.10 本研究課題的背景、目的和意義
第二章材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料、菌株和試劑
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌株及質(zhì)粒
2.1.3 主要試劑
2.2 研究方法
2.2.1 基因克隆及載體構(gòu)建
2.2.2 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌及Mini質(zhì)粒提取
2.2.3 材料種植與處理
2.2.4 農(nóng)桿菌感受態(tài)的制備及轉(zhuǎn)化
2.2.5 轉(zhuǎn)基因植株的鑒定與檢測試劑
2.2.6 酵母雜交轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)
2.2.7 細(xì)菌蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)及純化
2.2.8 GST Pull-down實(shí)驗(yàn)及Western Blot檢測
2.2.9 染色質(zhì)免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)實(shí)驗(yàn)
2.2.10 原生質(zhì)體瞬時表達(dá)檢測系統(tǒng)
2.2.11 凝膠遷移率實(shí)驗(yàn)(Electrophoretic Mobility Shift Assay)
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 WRKY12和WRKY13的表達(dá)受到miR156的調(diào)控
3.2 SPL10直接結(jié)合WRKY12和WRKY13的啟動子
3.3 SPL10調(diào)控WRKY12和WRKY13的轉(zhuǎn)錄
3.4 SPL10調(diào)控開花部分依賴于WRKY12和WRKY13
3.5 SPL10與WRKY12和WRKY13相互作用
3.6 SPL10和WRKY12/WRKY13直接調(diào)控miR172b的轉(zhuǎn)錄
3.7 過表達(dá)miR172b部分互補(bǔ)wrky12-2突變體和WRKY13過表達(dá)晚花的表型
3.8 WRKY12促進(jìn)SPL10的轉(zhuǎn)錄活性,WRKY13抑制SPL10的轉(zhuǎn)錄活性
第四章 討論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
作者簡介
在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與取得的其他研究成果
本文編號:3761497
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