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基于微液滴陣列的生物大分子檢測(cè)技術(shù)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-28 15:52
  微流控技術(shù)是一種在微米尺度上控制流體的技術(shù),能夠把樣本檢測(cè)的多個(gè)步驟集中在一個(gè)小小的芯片上,并通過(guò)多流道使樣品分流到多個(gè)獨(dú)立的反應(yīng)單元,實(shí)現(xiàn)高效率,高通量的樣品檢測(cè),具有小型化、自動(dòng)化、用量少和污染小的特點(diǎn)。液滴微流控技術(shù)是微流控技術(shù)研究的重要部分,它兼具液滴技術(shù)和傳統(tǒng)微流控技術(shù)特點(diǎn),避免了連續(xù)流體融合的困難性和芯片結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性。同時(shí),它具有操縱靈活、分析速度快和單分散性好的特點(diǎn),為生物和醫(yī)學(xué)研究搭建了一個(gè)全新平臺(tái),尤其適合于DNA和蛋白質(zhì)等生物大分子的分析檢測(cè)。本文研制了一個(gè)基于微流控打印技術(shù)的液滴生物反應(yīng)平臺(tái),可以高通量產(chǎn)生可尋址、大小可控的微液滴陣列,并通過(guò)將生物大分子分散在所生成的液滴陣列中,研究了微小體積中不同生物大分子的檢測(cè)技術(shù)。具體研究?jī)?nèi)容如下:(1)研制了一個(gè)基于微流控沖擊打印技術(shù)的生物反應(yīng)平臺(tái),包括生物液滴的生成裝置,生物液滴反應(yīng)的溫度控制裝置,生物液滴的檢測(cè)裝置。提出了液滴生成方法和多體積打印方法,展示了打印效果并且驗(yàn)證了液滴產(chǎn)生的均一性;從液滴反應(yīng)防蒸發(fā)、不同材料液滴接觸角和不同基底材料等應(yīng)用參數(shù)進(jìn)行了液滴反應(yīng)條件的探索;提出熒光法和比色法實(shí)現(xiàn)陣列式液滴中生物大分... 

【文章來(lái)源】:中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:112 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

基于微液滴陣列的生物大分子檢測(cè)技術(shù)研究


圖1.2用于檢測(cè)心臟生物標(biāo)志物的微流控生物芯片的制作原理圖

原理圖,報(bào)告基因,藍(lán)色,基因


功實(shí)現(xiàn)四種熒光基??團(tuán)同時(shí)檢測(cè)四種報(bào)告基因。??Casl3?detection?reporter?cteavage?lateral?ftow?readout??tMTpte?strtwwrtr.?uratxKtf??t?o?p*〇n??^?ca?3tu?H?f??pad??r??te?i?i?— ̄i??廣?.一?k;?I?— ̄1TT??、?_?丨丨?1:??@?FAM???biotin?coniroJ?sampte??band?band??圖1.3基于Cas?_系統(tǒng)的基因檢測(cè)方法原理圖,藍(lán)色條帶表明報(bào)告基因被相應(yīng)的Cas酶裂??解后檢測(cè)到。網(wǎng)??1.1.3基于微液滴的微流控生物檢測(cè)技術(shù)??基于微液滴的生物檢測(cè)技術(shù)通常通過(guò)油包水液滴分離不同的功能區(qū)或反應(yīng)??腔。如圖1.4,?Qiu等人開發(fā)了一種細(xì)胞膜錨定的熒光適配體傳感器并結(jié)合液滴??微流控平臺(tái)來(lái)在單細(xì)胞層面檢測(cè)細(xì)胞因子分泌的異質(zhì)性。136]這種基于液滴的生??物檢測(cè)方式保證了每個(gè)細(xì)胞的分泌物被隔離在每個(gè)液滴中,不受細(xì)胞間的干擾,??同時(shí)減少了試劑的用量,更重要的是,避免了樣品中化合物在固體表面的非特異??性吸附。免疫細(xì)胞分泌細(xì)胞因子是一個(gè)短暫的生物學(xué)過(guò)程,存在快速的波動(dòng)。細(xì)??胞膜錨定適配體可以直接測(cè)量細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,在準(zhǔn)確實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞功能方??面具有很高的潛力。??廣?廣令?Stimuli?Oil??^?IFNt?^?M'?EncaPsulation???|?(*?國(guó)1??—?—?一?TAO?ROX?4、??CLAP?Cholesterol?CDNA1?Aptamer?Quencher?Flu〇r〇ph

示意圖,細(xì)胞因子,配體,細(xì)胞


功實(shí)現(xiàn)四種熒光基??團(tuán)同時(shí)檢測(cè)四種報(bào)告基因。??Casl3?detection?reporter?cteavage?lateral?ftow?readout??tMTpte?strtwwrtr.?uratxKtf??t?o?p*〇n??^?ca?3tu?H?f??pad??r??te?i?i?— ̄i??廣?.一?k;?I?— ̄1TT??、?_?丨丨?1:??@?FAM???biotin?coniroJ?sampte??band?band??圖1.3基于Cas?_系統(tǒng)的基因檢測(cè)方法原理圖,藍(lán)色條帶表明報(bào)告基因被相應(yīng)的Cas酶裂??解后檢測(cè)到。網(wǎng)??1.1.3基于微液滴的微流控生物檢測(cè)技術(shù)??基于微液滴的生物檢測(cè)技術(shù)通常通過(guò)油包水液滴分離不同的功能區(qū)或反應(yīng)??腔。如圖1.4,?Qiu等人開發(fā)了一種細(xì)胞膜錨定的熒光適配體傳感器并結(jié)合液滴??微流控平臺(tái)來(lái)在單細(xì)胞層面檢測(cè)細(xì)胞因子分泌的異質(zhì)性。136]這種基于液滴的生??物檢測(cè)方式保證了每個(gè)細(xì)胞的分泌物被隔離在每個(gè)液滴中,不受細(xì)胞間的干擾,??同時(shí)減少了試劑的用量,更重要的是,避免了樣品中化合物在固體表面的非特異??性吸附。免疫細(xì)胞分泌細(xì)胞因子是一個(gè)短暫的生物學(xué)過(guò)程,存在快速的波動(dòng)。細(xì)??胞膜錨定適配體可以直接測(cè)量細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子,在準(zhǔn)確實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)細(xì)胞功能方??面具有很高的潛力。??廣?廣令?Stimuli?Oil??^?IFNt?^?M'?EncaPsulation???|?(*?國(guó)1??—?—?一?TAO?ROX?4、??CLAP?Cholesterol?CDNA1?Aptamer?Quencher?Flu〇r〇ph

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]p53 mutations in colorectal cancer-molecular pathogenesis and pharmacological reactivation[J]. Xiao-Lan Li,Jianbiao Zhou,Zhi-Rong Chen,Wee-Joo Chng.  World Journal of Gastroenterology. 2015(01)



本文編號(hào):3005265

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