自噬是細(xì)胞應(yīng)對(duì)胞內(nèi)和胞外刺激的分子細(xì)胞學(xué)過程。本論文主要討論細(xì)胞自噬在細(xì)胞受到內(nèi)部刺激（脂代謝相關(guān)基因突變）及外部刺激（α粒子輻照）后所起的作用。基因突變所表達(dá)的異常蛋白是一種常見的胞內(nèi)應(yīng)激因素。seipin為定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜蛋白,其糖基化位點(diǎn)突變使蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊,導(dǎo)致脂質(zhì)代謝異常。我們通過體外轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),研究自噬系統(tǒng)對(duì)seipin基因糖基化位點(diǎn)突變導(dǎo)致脂滴形態(tài)異常的影響。實(shí)驗(yàn)中,用糖基化位點(diǎn)突變的seipin質(zhì)粒與表達(dá)自噬體標(biāo)分子GFP-LC3質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細(xì)胞,Nile Red（尼羅紅）用來示蹤細(xì)胞內(nèi)脂滴,進(jìn)行免疫熒光、免疫印跡以及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)分析。研究發(fā)現(xiàn),在細(xì)胞中過表達(dá)突變seipin改變GFP-LC3的亞細(xì)胞分布,致胞漿出現(xiàn)大量空泡,(JFP-LC3與突變體seip in的亞細(xì)胞分布高度重合,細(xì)胞自噬系統(tǒng)被激活；并且,突變seipin使胞內(nèi)被Nile Red染色的彌散小脂滴融合成大脂滴；抑制細(xì)胞自噬系統(tǒng)更易于使轉(zhuǎn)染突變seipin的細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)巨大空泡；蛋白質(zhì)糖基化抑制劑能模擬突變seipin誘導(dǎo)的胞內(nèi)變化,使轉(zhuǎn)染正常型seipin質(zhì)粒的細(xì)胞出現(xiàn)與轉(zhuǎn)染突變體seipin質(zhì)粒的細(xì)胞類... 

【文章來源】：中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)安徽省 211工程院校 985工程院校

【文章頁數(shù)】：99 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

b顯示的是酵母里的自哩過程


本文編號(hào)：3002097