本文關(guān)鍵詞：禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒與A亞群白血病病毒共感染的致病性分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：近年來,我國雞群中禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒(REV)和A亞群禽白血病病毒(ALV-A)的感染比較普遍,且存在共感染現(xiàn)象。禽源活疫苗中污染REV被認(rèn)為是禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥的主要傳染源。本論文從雞馬立克氏病(MD)火雞皰疹病毒活疫苗中分離到1株REV,完成了其全基因組序列測定與分析；建立了REV與ALV-A共感染試驗?zāi)Ｐ?分析了共感染對雞的致病性；成功構(gòu)建了REV的感染性克隆,初步分析了堿基突變對病毒拯救的影響；建立了檢測雞MD活疫苗中污染REV的間接免疫熒光(IFA)方法,完善了禽源活疫苗中外源病毒檢驗的國家標(biāo)準(zhǔn)。 從雞MD火雞皰疹病毒凍干活疫苗中分離到1株REV,命名為MD-2。對分離毒株的全基因組序列測定與分析表明,MD-2與美國野雞源毒株APC-566、中國臺灣鵝源毒株3410/06和中國東北雞源分離毒株HLJR0901的親緣關(guān)系最近,同源性高達(dá)99%以上,而與我國南方分離毒株HA9901同源性為96.7%,與美國鴨源毒株SNV同源性相對最低,為93.5%。 用REV、ALV-A進(jìn)行了1日齡SPF雞的單感染和共感染試驗,分析了REV和ALV-A共感染的致病性。結(jié)果表明,REV和ALV-A共感染對雞呈現(xiàn)出明顯的協(xié)同致病作用,表現(xiàn)為共感染組雞的病死率較高,體重下降,CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞比值、法氏囊比重和胸腺比重顯著降低。在常規(guī)免疫、活疫苗或滅活疫苗免疫狀態(tài)下,低日齡(1日齡)和高日齡(10日齡)感染均會引起免疫雞的體重下降和一定的死淘率,其中共感染造成的影響更加嚴(yán)重。常規(guī)免疫下,共感染組會引起低日齡感染雞胸腺比重和法氏囊比重顯著下降,各種感染組對外周血CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞比例影響均不顯著,但共感染組CD4+/CD8+比值一直低于其他各組,具有一定的規(guī)律性,表現(xiàn)出抑制體液免疫的趨勢。滅活疫苗免疫下,共感染和REV單感染引起新城疫(ND)血凝抑制(HI)抗體效價、H5亞型禽流感HI抗體效價和H9亞型禽流感HI抗體效價顯著下降,其中共感染組下降幅度更大,此外,共感染和REV單感染還均引起傳染性法氏囊病(IBD)抗體陽性率降低�；钜呙缑庖呦�,ND首免后共感染和REV單感染組的HI抗體效價均顯著高于ALV-A單感染組和對照組,加強(qiáng)免疫后又低于后兩組。總體而言,REV感染對滅活疫苗免疫造成的免疫抑制作用強(qiáng)于對活疫苗免疫造成的抑制,ALV-A單感染引起的免疫抑制作用較弱。 此外,試驗還表明,REV感染未發(fā)生垂直傳播,而ALV-A能夠引起嚴(yán)重的垂直傳播。ALV-A單感染與共感染組到達(dá)產(chǎn)蛋日齡時(131日齡),ALV-A抗體陽性率分別為31%和48%,子代9日齡雞胚ALV-A分離陽性率分別為57.9%(11/19)和20%(3/15),7日齡雛雞ALV-A分離陽性率分別為66.7%(6/9)和36.4%(4/11)。隨著日齡的增大,雞對ALV-A耐受感染迅速下降,10日齡雞單感染或共感染ALV-A后,ALV-A抗體陽性率達(dá)80%以上。各感染組對血清中9種細(xì)胞因子濃度和外周血淋巴細(xì)胞中7種Toll樣受體mRNA轉(zhuǎn)錄水平總體影響不明顯,無明顯規(guī)律性。 構(gòu)建了REV MD-2的感染性克隆,拯救病毒的生長特性與親本毒一致,且遺傳標(biāo)記能夠穩(wěn)定遺傳。并通過定點突變技術(shù)對env基因中5個堿基進(jìn)行了分別突變,發(fā)現(xiàn)第1433位堿基由T突變?yōu)镚,導(dǎo)致env前蛋白第478位氨基酸由異亮氨酸突變?yōu)榫彼?為致死性突變。 建立了雞MD活疫苗中污染REV的IFA檢測方法。該方法對Ⅰ型MD活疫苗、MD火雞皰疹病毒活疫苗和MD二價活疫苗的最低檢出量分別為每500羽份疫苗中污染5、10和15TCID50的REV。 綜上結(jié)果,本研究揭示了REV和ALV-A共感染對雞的協(xié)同致病作用,為養(yǎng)禽生產(chǎn)中重視其共感染的控制提供了科學(xué)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒 禽白血病病毒A亞群 共感染 致病性 感染性克隆 間接免疫熒光試驗
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S852.65
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-11
• 插圖與附表清單11-15
• 縮略詞表15-17
• 第一章 引言17-24
• 1.1 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀17-18
• 1.2 研究目的與意義18
• 1.3 研究內(nèi)容與技術(shù)路線18-23
• 1.4 研究目標(biāo)23-24
• 第二章 雞馬立克氏病HVT活疫苗中污染REV的分離鑒定及基因組序列分析24-41
• 摘要24
• 2.1 前言24-25
• 2.2 材料與方法25-31
• 2.3 結(jié)果與分析31-39
• 2.4 討論39-40
• 2.5 小結(jié)40-41
• 第三章 REV與ALV-A共感染對SPF雛雞的致病性分析41-73
• 摘要41-42
• 3.1 前言42
• 3.2 材料與方法42-45
• 3.3 結(jié)果與分析45-63
• 3.4 討論63-72
• 3.5 小結(jié)72-73
• 第四章 REV與ALV-A共感染對疫苗免疫雞的致病性分析73-112
• 摘要73-74
• 4.1 前言74-75
• 4.2 材料與方法75-79
• 4.3 結(jié)果與分析79-105
• 4.4 討論105-111
• 4.5 小結(jié)111-112
• 第五章 REV分離株MD-2感染性克隆的構(gòu)建及突變分析112-126
• 摘要112
• 5.1 前言112-113
• 5.2 材料與方法113-119
• 5.3 結(jié)果與分析119-124
• 5.4 討論124-125
• 5.5 小結(jié)125-126
• 第六章 雞MD活疫苗中污染REV檢測方法的建立126-134
• 摘要126
• 6.1 前言126-127
• 6.2 材料與方法127-129
• 6.3 結(jié)果與分析129-133
• 6.4 討論133
• 6.5 小結(jié)133-134
• 第七章 結(jié)論134-135
• 第八章 創(chuàng)新點135-136
• 第九章 文獻(xiàn)綜述136-149
• 9.1 病原學(xué)136-140
• 9.2 流行病學(xué)比較140-145
• 9.3 檢測與診斷145-147
• 9.4 生物制品中的病毒污染147
• 9.5 預(yù)防和控制147-149
• 參考文獻(xiàn)149-165
• 致謝165-167
• 作者簡介167

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒與A亞群白血病病毒共感染的致病性分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：257792