本文關(guān)鍵詞：內(nèi)嗎啡肽2抑制骶副交感節(jié)前神經(jīng)元活動(dòng)的形態(tài)學(xué)與機(jī)能學(xué)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:骶副交感核(sacral parasympathetic nucleus,SPN)是脊髓的自主神經(jīng)中樞之一,它控制盆腔臟器的多種功能,如排尿、排便、陰莖勃起等。位于SPN內(nèi)的副交感節(jié)前神經(jīng)元(parasympathetic preganglionic neurons,PPNs)在排尿反射過(guò)程發(fā)揮著重要作用。在脊髓完整的成年動(dòng)物,排尿活動(dòng)的主要由脊髓以上與排尿活動(dòng)相關(guān)核團(tuán)之間形成的多突觸反射環(huán)路控制。但在頸段和胸段水平脊髓橫斷損傷后的慢性脊髓化動(dòng)物,感覺傳入與PPNs的突起之間形成單突觸聯(lián)系形成排尿反射回路。內(nèi)嗎啡肽包括內(nèi)嗎啡肽1(endomorphin 1,EM-1)和內(nèi)嗎啡肽2(endomorphin 2,EM-2)兩種亞型,因其與μ-阿片受體(μ-opioid receptor,MOR)有高度的親和力與選擇性,故被認(rèn)為是MOR的內(nèi)源性配體。嗎啡是MOR的外源性配體,它在脊髓水平抑制膀胱活動(dòng),這是造成臨床上鞘內(nèi)應(yīng)用嗎啡最常見的并發(fā)癥——尿潴留(urinary retention)的原因。我們最近的研究表明EM-2免疫陽(yáng)性的終末與SPN內(nèi)表達(dá)MOR的PPNs構(gòu)成突觸聯(lián)系。故推測(cè)尿潴留與嗎啡抑制PPNs從而抑制排尿反射有關(guān)。但阿片類物質(zhì)對(duì)SPN的PPNs在細(xì)胞水平的作用尚不清楚。目的:揭示SPN內(nèi)PPNs的形態(tài)和化學(xué)神經(jīng)解剖學(xué)特點(diǎn)以及內(nèi)源性阿片肽EM-2影響PPNs的效應(yīng)和作用機(jī)制,為防治嗎啡導(dǎo)致尿潴留提供理論依據(jù)。材料與方法:先用熒光追蹤劑四甲基羅達(dá)明(TMR)經(jīng)盆神經(jīng)逆行標(biāo)記方法,特異性顯示谷氨酸脫羧酶67-綠色熒光蛋白(GAD67-GFP)轉(zhuǎn)基因小鼠SPN內(nèi)PPNs的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和化學(xué)神經(jīng)解剖學(xué)特點(diǎn);再用全細(xì)胞膜片鉗記錄方法研究EM-2對(duì)24-30天齡大鼠SPN內(nèi)PPNs興奮性的影響以及對(duì)PPNs的興奮性和抑制性神經(jīng)遞質(zhì)突觸傳遞的影響。結(jié)果:1.從形態(tài)學(xué)上用GAD67-GFP基因轉(zhuǎn)基因小鼠證實(shí)在SPN內(nèi)及其周圍有含抑制性遞質(zhì)——γ-氨基丁酸(GABA)的抑制性中間神經(jīng)元,SPN內(nèi)還有非副交感節(jié)前神經(jīng)元和不含GABA的其它類型的神經(jīng)元,后者可能為興奮性中間神經(jīng)元,或向上位脊髓結(jié)構(gòu)或脊髓以上的中樞部位投射的神經(jīng)元,也可能是甘氨酸能的抑制性中間神經(jīng)元。2.SPN內(nèi)的PPNs大都表達(dá)MOR,非副交感節(jié)前神經(jīng)元和非GABA能的神經(jīng)元也多數(shù)表達(dá)MOR,只有個(gè)別含GABA的抑制性中間元微弱表達(dá)MOR。3.EM-2(3μM)能夠降低61.1%節(jié)前神經(jīng)元的靜息膜電位,產(chǎn)生半數(shù)最大反應(yīng)(EC50)的有效濃度為0.282μM;EM-2增加引起動(dòng)作電位發(fā)放的最小刺激值,并抑制動(dòng)作電位的重復(fù)發(fā)放,這些結(jié)果說(shuō)明EM-2通過(guò)超極化PPNs而降低其興奮性。4.電流-電壓關(guān)系曲線揭示EM-2引起的電流其反轉(zhuǎn)電位為-95±2.5 m V;灌流K+通道阻斷劑4-氨基吡啶(4-aminopyridine,4-AP)或Ba Cl2可大部分阻斷EM-2在PPNs引起的電流;在電極內(nèi)液中加入二磷酸鳥苷(GDP)的類似物guanosine5′-[β-thio]diphosphate trilithium salt(GDP-β-S)可阻斷EM-2引起的電流;灌流選擇性MOR拮抗劑D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Orn-Thr-Pen-Thr-NH2(CTOP)可阻斷這些電流。這些結(jié)果說(shuō)明EM-2與PPNs膜上的MOR結(jié)合后,隨之激活G蛋白偶聯(lián)的內(nèi)向整流鉀通道(GIRK),導(dǎo)致神經(jīng)元的超極化。5.EM-2降低PPNs的微小興奮性突觸后電流(m EPSCs)的頻率與幅度;EM-2還能降低自發(fā)性抑制性突觸后電流(s IPSCs)的頻率與幅度,但不改變微小抑制性突觸后電流(m IPSCs)的頻率與幅度。CTOP可阻斷EM-2對(duì)m EPSCs及s IPSCs頻率與幅度的影響。這些結(jié)果說(shuō)明EM-2與突觸前終末的MOR結(jié)合之后,可以抑制突觸前終末興奮性神經(jīng)遞質(zhì)的釋放,但對(duì)抑制性神經(jīng)遞質(zhì)的釋放沒有影響。結(jié)論:1.SPN的神經(jīng)元由PPNs、GABA能的抑制性中間神經(jīng)元和其它類型的神經(jīng)元組成。2.SPN內(nèi)的PPNs與其它類型的神經(jīng)元表達(dá)MOR,僅少許GABA能神經(jīng)元微弱表達(dá)MOR。3.EM-2與PPNs突觸后膜上的MOR結(jié)合,引起PPNs的超極化,降低PPNs的興奮性;EM-2與突觸前終末上的MOR結(jié)合,能夠使突觸前終末減少釋放興奮性神經(jīng)遞質(zhì),但不影響抑制性神經(jīng)遞質(zhì)的釋放。這些結(jié)果提示EM-2在骶髓的SPN內(nèi)對(duì)PPNs的活動(dòng)具有直接的抑制作用,且EM-2還可抑制突觸前終末釋放興奮性神經(jīng)遞質(zhì),導(dǎo)致初級(jí)傳入與PPNs形成回路的排尿反射信息傳遞被抑制,這些現(xiàn)象可以詮釋臨床上鞘內(nèi)使用嗎啡引起的膀胱功能異常的原因。
【關(guān)鍵詞】：內(nèi)嗎啡肽2 副交感節(jié)前神經(jīng)元 骶副交感核 神經(jīng)元興奮性 興奮性突觸后電流 尿潴留
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R338
【目錄】：

• 縮略語(yǔ)表5-7
• 中文摘要7-10
• Abstract10-14
• 第一部分 骶副交感節(jié)前神經(jīng)元的形態(tài)和化學(xué)神經(jīng)解剖學(xué)研究14-30
• 1 前言14-15
• 2 材料15-17
• 3 方法17-21
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-26
• 5 討論26-30
• 第二部分 內(nèi)嗎啡肽2對(duì)骶副交感核節(jié)前神經(jīng)元的興奮性和興奮性突觸傳遞的影響30-56
• 1 前言30-31
• 2 材料31-33
• 3 方法33-37
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-51
• 5 討論51-56
• 第三部分 內(nèi)嗎啡肽2對(duì)骶副交感核節(jié)前神經(jīng)元抑制性突觸傳遞的影響56-66
• 1 前言56-57
• 2 材料57-58
• 3 方法58-59
• 4 結(jié)果59-64
• 5 討論64-66
• 小結(jié)66-67
• 結(jié)論67-68
• 參考文獻(xiàn)68-75
• 綜述75-85
• 參考文獻(xiàn)82-85
• 致謝85-86
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷及在學(xué)期間發(fā)表的論文86

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 陳英標(biāo);內(nèi)嗎啡肽2抑制骶副交感節(jié)前神經(jīng)元活動(dòng)的形態(tài)學(xué)與機(jī)能學(xué)研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：內(nèi)嗎啡肽2抑制骶副交感節(jié)前神經(jīng)元活動(dòng)的形態(tài)學(xué)與機(jī)能學(xué)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：256076