本文關(guān)鍵詞：青蒿琥酯與雙氫青蒿素試紙條的制備及油菜素內(nèi)酯基因工程抗體的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《中國農(nóng)業(yè)大學(xué)》 2015年

青蒿琥酯與雙氫青蒿素試紙條的制備及油菜素內(nèi)酯基因工程抗體的初步研究

何麗珊  

【摘要】：青蒿素類藥物綜合療法(Artemisinin-based combination therapy, ACT)是當(dāng)今瘧疾治療的最有效手段。然而假冒、偽劣青蒿素類藥物的泛濫卻嚴(yán)重地影響著瘧疾的治療效果。目前,大多數(shù)對青蒿素類藥物進(jìn)行檢測分析的方法均需要昂貴的檢測儀器和復(fù)雜的操作流程。還沒有一種基于免疫學(xué)技術(shù)、能夠用于青蒿素類抗瘧藥物質(zhì)量評價的現(xiàn)場快速診斷方法。油菜素內(nèi)酯是一種重要的植物激素,可促進(jìn)細(xì)胞伸長和分裂、增強(qiáng)植株的抗逆性和提高作物的產(chǎn)量。國外已有將基因工程抗體應(yīng)用于植物激素生理活性及其作用機(jī)理研究的報道,主要通過將激素的抗體基因轉(zhuǎn)入植物中,表達(dá)出該激素的抗體,實現(xiàn)激素的免疫調(diào)節(jié),從而達(dá)到對該激素進(jìn)行研究的目的。采用基因工程抗體技術(shù)研究植物激素的生理功能及其作用機(jī)理是一個重要的有效手段,但目前還沒有關(guān)于油菜素內(nèi)酯的基因工程抗體被報道。 本研究分別制備了青蒿琥酯和油菜素內(nèi)酯的單克隆抗體,并以單克隆抗體為材料對免疫學(xué)技術(shù)(膠體金免疫檢測試紙條和基因工程抗體技術(shù))進(jìn)行了研究。主要結(jié)果如下： (1)制備了青蒿琥酯單克隆抗體3D82G7,抗體效價為3.2x104,其對青蒿素、雙氫青蒿素及蒿甲醚的交叉反應(yīng)率分別為22%、70%和0.3%： (2)制備了油菜素內(nèi)酯單克隆抗體4D81C11,抗體效價為2～4×103,抗體為IgG1類,與IAA、GAS、ABA、ZR、iPA等其他激素均無交叉反應(yīng)。用其建立了油菜素內(nèi)酯的icELISA, IC50為0.9ng/mL,檢測范圍在0.26ng/mL～3.83ng/mL。對所制備的油菜素內(nèi)酯單抗進(jìn)行了十字花科材料(小白菜和油菜)的添加回收實驗,發(fā)現(xiàn)對提取樣本進(jìn)行5-10倍稀釋可基本排除基質(zhì)背景干擾,添加回收率均在90-120%范圍內(nèi)； (3)以篩選到的青蒿琥酯單克隆抗體為基礎(chǔ),制備了膠體金免疫檢測試紙條,該試紙條對青蒿琥酯、青蒿素和雙氫青蒿素的判別濃度分別為100-200ng/mL,2000-5000ng/mL和200-500ng/mLo用標(biāo)準(zhǔn)品奎寧、磷酸氯喹、磷酸伯氨喹、乙胺嘧啶、本芴醇、阿莫地喹、磷酸哌喹及磷酸咯萘啶分別制備的5000ng/mL檢測液均不能使試紙條上的檢測線抑制；不同溫度條件下貯存的試紙條的檢測靈敏度會隨貯存時間的延長而下降； (4)應(yīng)用試紙條對青蒿素類抗瘧疾藥物及其原料藥的有效成分進(jìn)行半定量檢測,所得結(jié)果與高效液相色譜法(HPLC)的一致性好； (5)對油菜素內(nèi)酯基因工程抗體進(jìn)行了初步研究。從分泌油菜素內(nèi)酯單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞中提取了總RNA,反轉(zhuǎn)錄得到了cDNA。以cDNA為模板克隆了抗體的VH和VL基因。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：Q946
【目錄】：

下載全文 更多同類文獻(xiàn)

CAJ全文下載

(如何獲取全文？ 歡迎：購買知網(wǎng)充值卡、在線充值、在線咨詢)

CAJViewer閱讀器支持CAJ、PDF文件格式

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王秀娟,王伯初,賈毅,段傳人;植物表達(dá)抗體的研究進(jìn)展[J];重慶大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年02期

2 孔繁德,黃印堯,賴清金;免疫膠體金技術(shù)及其發(fā)展前景[J];福建畜牧獸醫(yī);2002年S1期

3 陳其庚，吳少華;油菜素內(nèi)酯（第六大類激素）的功用[J];福建果樹;1996年02期

4 李凱榮,樊金拴;新型植物激素——油菜素內(nèi)酯類在農(nóng)林上的應(yīng)用研究進(jìn)展[J];干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究;1998年04期

5 劉永清,洪霓,王國平;葡萄斑點病毒的血清學(xué)檢測技術(shù)[J];果樹學(xué)報;2005年03期

6 陳曉琦;徐葛林;;麻疹植物疫苗研究進(jìn)展[J];國際生物制品學(xué)雜志;2006年03期

7 王鳳茹;王志勇;;油菜素內(nèi)酯信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的研究進(jìn)展[J];華北農(nóng)學(xué)報;2008年S2期

8 侯和勝,陳敏資;油菜素內(nèi)酯對兩種單細(xì)胞藻生長和某些生理活性的影響[J];海洋與湖沼;1997年04期

9 周愛清,駱炳山,任筱波;油菜素內(nèi)酯對水稻幼苗生長及耐冷性的影響[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;1987年01期

10 駱炳山,屈映蘭,劉道宏;油菜素內(nèi)酯在作物上的應(yīng)用及生理效應(yīng)與評價[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;1992年01期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張秀玲;;豬弓形蟲病的診斷與防治[J];安徽農(nóng)學(xué)通報;2008年19期

2 周秀梅,李保印,劉弘;油菜素內(nèi)酯在加工葡萄品種上的應(yīng)用效果[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2003年02期

3 王清,吳振廷,王學(xué)林,唐慶峰,金濤,林華峰;免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)及其在植物保護(hù)上的應(yīng)用前景[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2005年03期

4 高紅明;溫爽;張小麗;張慶;;表油菜素內(nèi)酯浸種對干旱脅迫下玉米種子萌發(fā)及幼苗生長的影響[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2006年20期

5 肖琳;龐瑞華;蔡榮先;于萍;黃新華;王磊;;水稻初花期噴施油菜素內(nèi)酯的生理效應(yīng)及增產(chǎn)作用[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2007年11期

6 魯滿新;;現(xiàn)代檢測技術(shù)在食品安全中的應(yīng)用[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2007年21期

7 王明月;呂岱竹;;高效液相色譜法測定檳榔花粉中的蕓苔素內(nèi)酯[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年04期

8 羅琎;孫長忠;王琦;辛學(xué)兵;孔慶云;;根系的發(fā)育及其激素調(diào)控研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年26期

9 李鐵軍;李德全;;農(nóng)藥抗體制備技術(shù)研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年27期

10 張玉萍;劉威生;孫紹春;張成;;油菜素內(nèi)酯在果樹上的應(yīng)用研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年12期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 莊金秋;梅建國;沈志強(qiáng);;膠體金免疫層析技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用進(jìn)展[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會第三次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

2 黃叢林;張大鵬;;植物激素的免疫組織化學(xué)定位的技術(shù)分析[A];中國科學(xué)技術(shù)協(xié)會第二屆青年學(xué)術(shù)年會園藝學(xué)論文集[C];1995年

3 張素勤;鄒志榮;耿廣東;;轉(zhuǎn)基因蔬菜疫苗研究進(jìn)展[A];中國園藝學(xué)會第六屆青年學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2004年

4 胡春華;馬先鋒;鄧子牛;;抗PthA核定位信號肽單克隆抗體單鏈抗體基因的克隆及原核表達(dá)[A];2008園藝學(xué)進(jìn)展（第八輯）——中國園藝學(xué)會第八屆青年學(xué)術(shù)討論會暨現(xiàn)代園藝論壇論文集[C];2008年

5 王浩;郭啟雷;殷曉燕;曹紅;劉艷琴;楊紅梅;閻龍寶;;液相色譜-串聯(lián)三重四極桿質(zhì)譜對牛奶中10種磺胺類藥物殘留的同時測定[A];2008年全國有機(jī)質(zhì)譜學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

6 王武軍;金顏輝;蔡開珍;;免疫膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用和研究進(jìn)展[A];福建省科協(xié)第五屆學(xué)術(shù)年會衛(wèi)星會議養(yǎng)豬與畜禽傳染防治學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

7 韋廣琴;李中安;周常勇;;免疫膠體金技術(shù)在植物病理學(xué)研究中的應(yīng)用綜述[A];公共植保與綠色防控[C];2010年

8 江明;謝文申;楊祖武;;香莢蘭冷害和抗冷性的研究動態(tài)[A];2002年中國香料香精學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2002年

9 王武軍;金顏輝;蔡開珍;;免疫膠體金快速診斷技術(shù)在獸醫(yī)臨床診斷中的應(yīng)用和研究進(jìn)展[A];福建省科協(xié)第五屆學(xué)術(shù)年會衛(wèi)星會議養(yǎng)豬與畜禽傳染病制治學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2005年

10 武春芳;陳春燕;李春艷;郭雙琴;陳培鳳;牛秀嶺;唐曉虎;張林沖;;淺談建立生產(chǎn)用BHK-21種細(xì)胞庫的措施[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2008年學(xué)術(shù)年會暨第六屆全國畜牧獸醫(yī)青年科技工作者學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2008年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張云;基于功能化納米顆粒和仿生材料的生化分析新方法[D];湖南大學(xué);2010年

2 高軒;小麥抗凍蛋白基因的分離與遺傳轉(zhuǎn)化研究[D];華中科技大學(xué);2010年

3 關(guān)正君;櫻桃番茄的HBsAg基因轉(zhuǎn)化及其突變體特性研究[D];西北大學(xué);2011年

4 董玉梅;馬鈴薯L-半乳糖酸-1，，4-內(nèi)酯脫氫酶基因的克隆和功能分析[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

5 時景偉;麻疹疫苗減毒機(jī)制及疫苗接種后我國麻疹流行病學(xué)特點的研究[D];吉林大學(xué);2011年

6 劉亞麗;脂松苗木水分脅迫和越冬傷害機(jī)制[D];東北林業(yè)大學(xué);2011年

7 王艷華;弓形蟲代謝分泌抗原和表面蛋白1抗原表位研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2011年

8 周建紅;納米金屬氧化物修飾電極的制備及其在環(huán)境分析中的應(yīng)用[D];中南大學(xué);2011年

9 趙麗;三種重金屬單抗的制備與抗體基因序列分析及其免疫檢測方法的建立[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

10 姜金慶;19-去甲睪酮免疫學(xué)檢測方法的建立及應(yīng)用[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 袁凌云;外源化學(xué)物質(zhì)及復(fù)合基質(zhì)對番茄幼苗抗冷效果的影響[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 張源源;剛地弓形蟲微線體蛋白3的高效表達(dá)及應(yīng)用[D];福建師范大學(xué);2010年

3 周群標(biāo);動物性食品中鹽酸克倫特羅免疫快速檢測技術(shù)的建立及應(yīng)用[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

4 韓建坊;RAFT沉淀聚合法制備四環(huán)素分子印跡微球與表征[D];西安電子科技大學(xué);2011年

5 馬敬;利用油體蛋白表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)人成骨蛋白的研究[D];山東師范大學(xué);2011年

6 于萍萍;抗犬瘟熱病毒P1蛋白單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 申強(qiáng);過量表達(dá)ZmDWF4基因改良玉米產(chǎn)量性狀的研究[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

8 唐賢豐;煙草中過表達(dá)番茄特異糖基轉(zhuǎn)移酶基因提高耐冷性[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

9 田風(fēng)龍;玉米自交系幼胚轉(zhuǎn)化體系建立及DWF4基因的農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

10 楊威;相思子毒素-a銀染增強(qiáng)技術(shù)膠體金免疫層析試紙條的研制[D];吉林大學(xué);2011年

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 朱前勇,李志,陶生策,王棟,焦文倉,史常旭,梁志清;膠體金標(biāo)記/銀染信號放大法在寡核苷酸芯片檢測人HCM突變中的應(yīng)用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2004年19期

2 何方洋;ELISA試劑盒與我國動物獸藥殘留檢測[J];動物保健;2005年05期

3 陳其庚，吳少華;油菜素內(nèi)酯（第六大類激素）的功用[J];福建果樹;1996年02期

4 孫雙姣,蔣治良;金納米微粒的制備和表征及其在生化分析中的應(yīng)用[J];貴金屬;2005年03期

5 劉永清,洪霓,王國平;葡萄斑點病毒的血清學(xué)檢測技術(shù)[J];果樹學(xué)報;2005年03期

6 婁曉鳴,章鎮(zhèn),姚泉洪,熊愛生,王化坤,彭日荷,李賢;乙肝表面抗原大蛋白(S1S2S)基因在轉(zhuǎn)基因蘋果中表達(dá)[J];果樹學(xué)報;2005年06期

7 張大權(quán),田志敬,孔令萍,汪德生,汪新;貴州兩個種畜場布氏桿菌病的血清學(xué)調(diào)查[J];貴州畜牧獸醫(yī);2003年05期

8 李俊蘭,崔淑芳,金衛(wèi)平,黎鴻慧,王廣恩;轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉株卡那霉素抗性與抗蟲性的關(guān)系研究[J];河北農(nóng)業(yè)科學(xué);2004年03期

9 周培,陸貽通;農(nóng)藥殘留的酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J];環(huán)境污染與防治;2002年04期

10 王春仁,許臘梅,王洪新,仇建華,徐梅倩,何國聲,姜英,于萬才,王清福;應(yīng)用斑點免疫金滲濾法檢測羊東畢吸蟲病的研究[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2000年05期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 陳森;呂德堅;陸惠玲;;抗P30膠體金免疫試紙條靈敏度和特異性探討[J];中山大學(xué)研究生學(xué)刊(自然科學(xué)、醫(yī)學(xué)版);2005年02期

2 葉寧;快速病理檢定儀研制報告[J];甘肅科技;2001年06期

3 龔云飛;陳宗倫;奚茜;李沐潔;王唯芬;王旻子;應(yīng)永飛;張明洲;;三聚氰胺膠體金免疫層析試紙條的研制[J];生物工程學(xué)報;2012年07期

4 汪琳;羅英;周琦;賴平安;張向東;柏亞鐸;;核酸試紙條在檢測轉(zhuǎn)EPSPS基因作物中的應(yīng)用[J];生物技術(shù)通訊;2011年02期

5 劉麗;胡宜亮;王玉金;楊書豪;李珊珊;;食品中四環(huán)素殘留快速檢測方法的初步建立[J];河南科學(xué);2012年10期

6 陳瓊;孔繁德;張長弓;彭海濱;徐淑菲;;沙門氏菌快速檢測試紙條的研制與應(yīng)用[J];福建畜牧獸醫(yī);2006年05期

7 ;邁向市場[J];科技創(chuàng)業(yè);2009年09期

8 ;[J];;年期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉利洪;李敬;姜天華;黃小英;曾傳蓉;;HCG試紙條在定量檢測血HCG中的過篩作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議資料匯編[C];2008年

2 蒲曉允;幕之勇;;快速檢測蔬菜變質(zhì)試紙條的研究[A];第一次全國中西醫(yī)結(jié)合檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議暨中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會成立大會論文匯編[C];2014年

3 李莉;逄大欣;任林柱;張莉影;李占軍;歐陽紅生;;抗人血白蛋白單克隆抗體的制備及其免疫金標(biāo)試紙條的研制[A];全國動物生理生化第九次學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2006年

4 梁有志;尹麗萍;杭柏林;錢琨;金文杰;秦愛建;;禽白血病抗原快速檢測試紙條的研制及其初步應(yīng)用[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會第三次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

5 李雪;武玉東;張健;宮曉群;董春紅;常津;;基于量子點標(biāo)記的熒光免疫層析試紙條的快速檢測方法[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第三十四屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2014年

6 李姮;;基于熒光微球標(biāo)記的腐馬菌素B1快速定量檢測免疫層析試紙條研究[A];中國毒理學(xué)會獸醫(yī)毒理學(xué)與飼料毒理學(xué)學(xué)術(shù)討論會暨獸醫(yī)毒理專業(yè)委員會第4次全國代表大會會議論文集[C];2012年

7 張巧玲;;84消毒液對尿液試紙條分析的影響[A];第五次全國中青年檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

8 何素平;趙靜;羿國香;劉威;鄧艾興;南鐵貴;李召虎;何鐘佩;王保民;;Bt毒蛋白免疫金標(biāo)試紙條的制備與應(yīng)用[A];中國棉花學(xué)會2006年年會暨第七次代表大會論文匯編[C];2006年

9 張成福;張子玉;;PAN試紙條的制取及精斑檢測[A];首屆中國法醫(yī)物證學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];1993年

10 王艷華;張德林;李學(xué)瑞;李克生;才學(xué)鵬;;檢測弓形蟲抗體免疫膠體金快速試紙條的研制[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第九次學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 記者魏公銘;[N];中國食品報;2011年

2 記者 葉桂華　通訊員 劉月青;[N];泰州日報;2009年

3 本報記者 張紅梅 通訊員 鄭建;[N];威海日報;2006年

4 國家外來動物疫病診斷中心 李林 劉雨田 李金明 陳義平 王志亮;[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2006年

5 ;[N];醫(yī)藥導(dǎo)報;2006年

6 魏云霞;[N];中國食品安全報;2011年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 黃志兵;1、紅曲菌兩種新的熒光代謝產(chǎn)物的研究 2、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇膠體金免疫層析試紙條的研制[D];南昌大學(xué);2009年

2 何麗珊;青蒿琥酯與雙氫青蒿素試紙條的制備及油菜素內(nèi)酯基因工程抗體的初步研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 葛晨晨;痕量銅離子檢測方法以及檢測組蛋白甲基化試紙條的構(gòu)建[D];中國科學(xué)技術(shù)大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 倪同浩;鏈霉素膠體金免疫層析快速檢測試紙條的研制[D];揚州大學(xué);2009年

2 段靜;現(xiàn)場檢測重金屬離子的超高靈敏試紙條研究[D];寧波大學(xué);2012年

3 張佳宜;磺胺類獸藥免疫膠體金快速檢測試紙條的研制[D];天津科技大學(xué);2009年

4 楊賢;內(nèi)控核酸試紙條方法的建立及其在乙型肝炎病毒檢測中的應(yīng)用研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2011年

5 張明;磺胺甲噁唑膠體金免疫層析快速檢測試紙條的研制[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

6 王帥;喹諾酮類獸藥免疫膠體金快速檢測試紙條的研制[D];天津科技大學(xué);2011年

7 陳飛;免疫試紙條技術(shù)改進(jìn)及高分辨熔解曲線應(yīng)用菌群分類的初步摸索[D];南昌大學(xué);2014年

8 朱繼帥;鏈霉素膠體金免疫層析法檢測試紙條的研制[D];揚州大學(xué);2007年

9 房立;敵草隆免疫膠體金快速檢測試紙條的開發(fā)[D];天津科技大學(xué);2010年

10 郭勤;基于量子點標(biāo)記的層析試紙條與配套分析儀的研制[D];上海交通大學(xué);2010年

  本文關(guān)鍵詞：青蒿琥酯與雙氫青蒿素試紙條的制備及油菜素內(nèi)酯基因工程抗體的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：216304