本文選題：豬繁殖與呼吸綜合征病毒 + Ⅰ型干擾素　； 參考：《中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年博士論文

【摘要】：豬繁殖與呼吸綜合征是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起的一種高度傳染性疾病,給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了重大經(jīng)濟(jì)損失。2006年,我國(guó)爆發(fā)了高致病性豬繁殖與呼吸綜合征,以高熱、高發(fā)病率和高致死率為典型特征。PRRSV感染能夠引起宿主嚴(yán)重的免疫抑制,其中,細(xì)胞因子表達(dá)紊亂是造成這一現(xiàn)象的主要原因之一。I型干擾素(type I IFNs,IFN-I)是宿主產(chǎn)生的最重要的抗病毒細(xì)胞因子,IFN-I不僅可以誘導(dǎo)上百種抗病毒基因的表達(dá)直接阻斷病毒的復(fù)制周期,而且在調(diào)節(jié)宿主固有免疫和適應(yīng)性免疫反應(yīng)中起到非常重要的作用。然而,PRRSV感染卻不能很好地誘導(dǎo)IFN-I的表達(dá)。為了進(jìn)一步明確PRRSV致病機(jī)理,本論文對(duì)高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒(HP-PRRSV)逃逸IFN-I的分子機(jī)制進(jìn)行深入的研究。本課題首先用HP-PRRSV感染豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAMs)和單核細(xì)胞趨化的巨噬細(xì)胞(BMo),發(fā)現(xiàn)HP-PRRSV毒株JXwn06感染可以明顯抑制poly(I:C)誘導(dǎo)的IFNβ和IFNa的轉(zhuǎn)錄激活,同時(shí)也抑制了下游抗病毒基因的表達(dá)。應(yīng)用Western Blot等技術(shù)證明HP-PRRSV感染可以抑制NF-κB和IRF3信號(hào)通路。篩選HP-PRRSV所有非結(jié)構(gòu)蛋白和結(jié)構(gòu)蛋白后,發(fā)現(xiàn)nsp4對(duì)poly(I:C)誘導(dǎo)IFNβ的表達(dá)有顯著的抑制作用。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),nsp4可以抑制IκBα的磷酸化和p65的入核,并下調(diào)信號(hào)分子RIG-I、VISA、TRIF和IKKβ誘導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路的激活,暗示nsp4的作用位點(diǎn)可能在IKK激酶復(fù)合體上。通過(guò)對(duì)IKKα、IKKβ和NEMO (NF-κB信號(hào)通路重要調(diào)節(jié)蛋白)的切割作用發(fā)現(xiàn),nsp4可以特異地靶向NEMO的E349-$350氨基酸對(duì),并對(duì)其進(jìn)行切割,這一作用依賴于nsp4的3C樣絲氨酸蛋白酶活性。nsp4的酶活突變體對(duì)NEMO和IFNβ的表達(dá)均沒有影響。同時(shí),我們對(duì)HP-PRRSV抑制1RF3的機(jī)制也進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)nsp4可以切割VISA (RIG樣信號(hào)通路特異的接頭蛋白)使其脫離線粒體膜,從而阻斷下游NF-κB和IRF3信號(hào)通路,抑制RIG樣信號(hào)通路介導(dǎo)的抗病毒作用。有趣的是,與傳統(tǒng)PRRSV毒株CH-la相比,HP-PRRSV毒株JXwn06的nsp4對(duì)poly(I:C)誘導(dǎo)的IFNβ、NF-κB和1RF3的熒光素酶活性的抑制作用更強(qiáng)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),CH-la感染不能下調(diào)VISA的表達(dá),而且CH-la的nsp4對(duì)VISA也沒有切割作用。這一結(jié)果部分揭示了HP-PRRSV毒株與傳統(tǒng)毒株致病性存在差異的原因。以上研究結(jié)果表明,HP-PRRSV nsp4可以特異性地切割信號(hào)通路組分NEMO和VISA,阻斷NF-κB和IRF3信號(hào)通路,從而抑制IFNβ的轉(zhuǎn)錄激活。本論文研究發(fā)現(xiàn)了一種新的HP-PRRSV逃逸宿主免疫反應(yīng)的機(jī)制,為進(jìn)一步闡明HP-PRRSV的致病機(jī)理提供了理論基礎(chǔ),具有重要的意義。
[Abstract]:Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus (PRRS) is a highly contagious disease that has caused significant economic losses to the world pig industry. The outbreak of highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome in China is characterized by high fever, high morbidity and high mortality. PRRSv infection can cause severe immunosuppression of the host. The disturbance of cytokine expression is one of the main causes of this phenomenon. Type I interferon type I IFNs IFN-I) is the most important antiviral cytokine produced by the host. IFN-I can not only induce the expression of hundreds of antiviral genes, but also directly block the replication cycle of the virus. Moreover, it plays a very important role in regulating host innate immunity and adaptive immune response. However, PRRSv infection can not induce the expression of IFN-I well. In order to further clarify the pathogenesis of PRRSV, the molecular mechanism of escape IFN-I of highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus (HP-PRRSVV) was studied in this paper. In this study, HP-PRRSV was first used to infect porcine alveolar macrophages (Pam) and monocyte chemotactic macrophages (BMoN). It was found that JXwn06 infection of HP-PRRSV strain could significantly inhibit the transcriptional activation of IFN 尾 and IFNa induced by polymorphic I: C) and also inhibit the expression of downstream antiviral genes. Western Blot and other techniques were used to prove that HP-PRRSV infection could inhibit NF- 魏 B and IRF3 signaling pathway. After screening all the nonstructural proteins and structural proteins of HP-PRRSV, it was found that nsp4 could significantly inhibit the expression of IFN 尾 induced by poly (I: C). It was further found that nsp4 could inhibit the phosphorylation of I 魏 B 偽 and the entry of p65, and down-regulate the activation of NF- 魏 B signaling pathway induced by RIG-IVISATRIF and IKK 尾, suggesting that the site of nsp4 may be on the IKK kinase complex. The cleavage of IKK 偽 -IKK 尾 and NEMO NF- 魏 B signaling pathway showed that nsp4 could specifically target and cleavage the E349-C350 amino acid pairs of NEMO. This effect was dependent on the activity mutants of nsp4 3C like serine protease. Nsp4 had no effect on the expression of NEMO and IFN 尾. At the same time, we also studied the mechanism of inhibition of 1RF3 by HP-PRRSV. It was found that nsp4 could cut the specific junction protein of VISA rig-like signaling pathway and isolate it from mitochondrial membrane, thus blocking the downstream NF- 魏 B and IRF3 signaling pathways. Inhibition of antiviral effects mediated by RIG-like signaling pathway. Interestingly, compared with the traditional PRRSV strain CH-la, the nsp4 of HP-PRRSv strain JXwn06 has a stronger inhibitory effect on the luciferase activity of IFN 尾 -NF- 魏 B and 1RF3. Further studies showed that CH-la infection could not down-regulate the expression of VISA, and nsp4 of CH-la had no effect on VISA cleavage. This result partly revealed the pathogenicity of HP-PRRSV strains and traditional strains. These results suggest that HP-PRRSv nsp4 can specifically cut the signal pathway components NEMO and VISAand block the NF- 魏 B and IRF3 signaling pathways, thus inhibiting the transcriptional activation of IFN 尾. In this paper, we found a new mechanism of immune response to escape host of HP-PRRSV, which provides a theoretical basis for further elucidation of the pathogenesis of HP-PRRSV, which is of great significance.
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S852.65

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王春梅,姜濤,周春燕;誘導(dǎo)心臟發(fā)生的早期信號(hào)通路[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2004年05期

2 吳小萍;陳曉萍;斯f亮;;絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路相關(guān)研究[J];生物學(xué)通報(bào);2006年06期

3 劉紅標(biāo);劉娟;;蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)中信號(hào)通路的識(shí)別算法[J];武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版);2008年03期

4 黎增輝;廖愛軍;;JNK信號(hào)通路[J];國(guó)際病理科學(xué)與臨床雜志;2010年03期

5 李春艷;高寧;侯穎春;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路與人類腫瘤[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2014年05期

6 郭陳智;范華驊;;Wnt信號(hào)通路參與外周免疫調(diào)節(jié)的研究進(jìn)展[J];生命科學(xué);2010年04期

7 孫小妹;毛萌;;腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子誘導(dǎo)的絲裂原活化蛋白激酶信號(hào)通路[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2006年04期

8 尹力,柳惠圖,王端順;微絲重組對(duì)DG-PKC信號(hào)通路的作用[J];科學(xué)通報(bào);1994年16期

9 過(guò)倩萍;邢欣榮;伍會(huì)健;;蛋白質(zhì)修飾對(duì)Wnt信號(hào)通路的調(diào)控[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2009年02期

10 羅肖;李惠俠;楊公社;;Wnt信號(hào)通路與前體脂肪細(xì)胞[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2007年10期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 程華;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];2011全國(guó)老年癡呆與衰老相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議第三屆山東省神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師（學(xué)術(shù)）論壇論文匯編[C];2011年

2 蔣瑩;程華;張麗;艾厚喜;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];第一屆全國(guó)麻醉藥理專業(yè)委員會(huì)第二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

3 蔣瑩;程華;張麗;艾厚喜;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];中國(guó)成人醫(yī)藥教育論壇（4）[C];2011年

4 蔣瑩;程華;張麗;艾厚喜;王文;;經(jīng)典Wnt信號(hào)通路抑制劑[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)補(bǔ)益藥藥理專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)暨人參及補(bǔ)益藥學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)議論文集[C];2011年

5 李艷菲;艾厚喜;孫芳玲;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路研究新進(jìn)展[A];2013年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十三屆中國(guó)藥師周論文集[C];2013年

6 李艷菲;艾厚喜;孫芳玲;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路研究新進(jìn)展[A];2013年全國(guó)老年性癡呆與相關(guān)疾病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2013年

7 李艷菲;艾厚喜;孫芳玲;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路研究新進(jìn)展[A];第三屆中國(guó)藥理學(xué)會(huì)補(bǔ)益藥藥理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

8 季宇彬;胡哲清;鄒翔;;MAPK信號(hào)通路及其研究進(jìn)展[A];轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研討會(huì)論文集[C];2010年

9 程華;孫芳玲;艾厚喜;張麗;蔣瑩;王文;;Wnt信號(hào)通路與血管發(fā)生[A];全國(guó)第三次麻醉藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

10 李林;;利用小分子探針研究經(jīng)典Wnt信號(hào)通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專題報(bào)告七[C];2014年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前6條

1 劉海英;美發(fā)現(xiàn)兩種細(xì)胞信號(hào)通路互動(dòng)機(jī)制[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

2 記者 劉海英;英發(fā)現(xiàn)細(xì)胞信號(hào)通路新“剎車”蛋白[N];科技日?qǐng)?bào);2012年

3 衣曉峰　陳英云 記者 李麗云;結(jié)腸癌發(fā)生中新的信號(hào)通路找到[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

4 記者 許琦敏;減肥信號(hào)受控于腦中“通訊員”[N];文匯報(bào);2008年

5 記者 劉海英;一種蛋白決定人的抗壓能力[N];科技日?qǐng)?bào);2011年

6 通訊員 喬蕤琳 記者 衣曉峰 聶松義;癌癥中小分子和微小核苷酸有關(guān)聯(lián)[N];健康報(bào);2012年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王森;乙型肝炎病毒表面抗原抑制TLR2和TLR4信號(hào)通路的機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 尚果果;NRF2抗氧化應(yīng)激信號(hào)通路的活化在糖尿病腎病中的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 孫鼎琪;Akt信號(hào)通路在膀胱腫瘤的進(jìn)展及化療敏感性的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2015年

4 白秀峰;新基因Gsdma3對(duì)小鼠毛囊周期及Wnt/β-catenin信號(hào)通路作用的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 張俊波;PI3K/Akt信號(hào)通路調(diào)控胞內(nèi)布魯氏菌16M存活的分子機(jī)制研究[D];石河子大學(xué);2014年

6 成旭東;黃芪活性物質(zhì)篩選及基于PKC-ERK信號(hào)通路抑制肺癌的作用機(jī)理研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

7 路康;STAT3信號(hào)通路介導(dǎo)CLL和MCL發(fā)生組蛋白去乙�；敢种苿┠退幍臋C(jī)制研究[D];山東大學(xué);2015年

8 趙睿;Wnt信號(hào)通路在臂叢神經(jīng)根性撕脫傷誘發(fā)的神經(jīng)病理性痛中的作用機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

9 劉海燕;Sonic hedgehog信號(hào)通路對(duì)正常角質(zhì)形成細(xì)胞增殖及凋亡的影響及其分子機(jī)制[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

10 祁義軍;胃腸道間質(zhì)瘤中Shh信號(hào)通路作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 韓紹芳;小鼠主要嗅覺表皮組織內(nèi)AC3缺失對(duì)相關(guān)因子及信號(hào)通路的影響[D];河北大學(xué);2015年

2 李玉娟;Hedgehog信號(hào)通路在大鼠急性胰腺炎中的作用及其對(duì)TNF-α、IL-10的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 趙玲玲;FLCN與PAT1相互作用調(diào)控mTORC1信號(hào)通路的機(jī)理研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2015年

4 努爾古麗·蘇里坦;mir-260和mir-240調(diào)控錢蟲壽命的研究[D];華中師范大學(xué);2015年

5 王瑜;晚期糖基化終末產(chǎn)物和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞VEGF信號(hào)通路的影響及其機(jī)制探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 楊瑩瑩;microRNA-203通過(guò)APC介導(dǎo)活化Wnt/β-catenin信號(hào)通路在佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞中的調(diào)控作用及機(jī)制研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

7 徐貞貞;PM2.5對(duì)人支氣管上皮細(xì)胞JAK/STAT信號(hào)通路的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

8 徐國(guó)棟;芪蛭皺肺顆粒調(diào)控肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路的研究[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué)(原名：甘肅中醫(yī)學(xué)院);2015年

9 陸兆雙;多聚左旋精氨酸促進(jìn)LPS誘導(dǎo)的NCI-H292細(xì)胞釋放炎癥因子IL-6、IL-8的信號(hào)通路研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

10 修麗梅;P38MAPK信號(hào)通路在肢體缺血預(yù)處理腦保護(hù)中的作用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1798185