本文選題：豬繁殖與呼吸綜合征病毒 + 類NADC30毒株�。� 參考：《中國農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的一種嚴(yán)重影響生豬產(chǎn)業(yè)的重要病毒性疫病。近年來,我國陸續(xù)報(bào)道PRRSV類NADC30毒株的流行,給豬場PRRS防控帶來新的挑戰(zhàn)。本研究對(duì)天津地區(qū)豬場PRRSV類NADC30毒株的感染情況進(jìn)行了監(jiān)測(cè),分析了分離毒株的基因組特征以及致病性,并評(píng)價(jià)了現(xiàn)有疫苗對(duì)分離毒株攻毒的免疫保護(hù)效力,以期了解天津地區(qū)PRRSV類NADC30毒株的流行狀況,為PRRSV類NADC30的防控提供依據(jù)�；赑RRSV類NADC30毒株Nsp2基因缺失的特性,建立了區(qū)分PRRSV經(jīng)典毒株、高致病性毒株(HP-PRRSV)和類NADC30毒株的RT-PCR鑒別檢測(cè)方法。對(duì)2014-2016年天津地區(qū)63個(gè)豬場396份臨床樣本進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果表明,PRRSV陽性檢出率為26.26%(104/396),其中HP-PRRSV陽性率為69.23%(72/104),PRRSV經(jīng)典毒株陽性率為4.81%(5/104),類NADC30陽性率為25.96%(27/104)。2014-2016年類NADC30毒株年度陽性率依次為6.25%、17.07%和58.06%,提示類NADC30毒株感染呈現(xiàn)增高趨勢(shì)。對(duì)擴(kuò)增的Nsp2基因的變異分析表明,NADC30陽性樣品中的13份樣本除具有131個(gè)特征性氨基酸缺失外,還存在2個(gè)氨基酸缺失。3份陽性樣品的ORF5存在1個(gè)氨基酸缺失,類NADC30毒株的Nsp2、ORF5變異呈現(xiàn)多樣化。結(jié)合豬場使用PRRSV疫苗免疫的調(diào)查,結(jié)果顯示,免疫經(jīng)典PRRSV疫苗(MLV-VR2332株、CH-1R株、R98株)和HP-PRRSV減毒活疫苗(TJm-F92株、JXA1-R株)的豬場均發(fā)生類NADC30毒株感染。采用MARC-145細(xì)胞系從PRRSV類NADC30陽性樣本中分離病毒,經(jīng)IFA和RT-PCR鑒定,共分離到 7 株 PRRSV,分別命名為 TJnh1401、TJnh1501、TJnh1502、TJdg1601、TJdg1602、TJbd1601和TJbd1602。結(jié)合Nsp2和ORF5序列分析結(jié)果,選取分離毒株TJnh1501進(jìn)行蝕斑純化和全基因組序列測(cè)定。結(jié)果顯示,分離毒株TJnh1501在MARC-145細(xì)胞上的病毒滴度可達(dá)107.0TCID50;其全基因組序列與NADC30毒株同源性僅為86.6%,而與HP-PRRSV毒株的同源性達(dá)96.3%,且Nsp2具有NADC30毒株131個(gè)氨基酸缺失的分子特征;應(yīng)用SimPlot生物學(xué)軟件的分析結(jié)果表明,TJnh1501為HP-PRRSV疫苗毒株與NADC30毒株的重組病毒,重組位置位于非結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)(Nsp2)的1737nt-3506nt。分析了 TJnh1501對(duì)健康仔豬的致病性。結(jié)果顯示,TJnh1501感染仔豬呈現(xiàn)體溫升高、精神沉郁、呼吸困難、流鼻涕和日增重下降的臨床癥狀;感染仔豬的肺臟水腫、實(shí)變,肺支氣管周邊炎性細(xì)胞浸潤、支氣管黏膜上皮脫落、血管內(nèi)瘀血,感染組仔豬肺臟評(píng)分顯著高于對(duì)照組(p0.05)。由此表明,重組病毒TJnh1501對(duì)仔豬具有一定的致病力。進(jìn)一步評(píng)價(jià)了現(xiàn)有商品化PRRSV疫苗對(duì)分離毒株TJnh1501的免疫保護(hù)效果。結(jié)果顯示,MLV Inglevac PRRS(?)和HP-PRRSV減毒活疫苗JXA1-R株免疫仔豬不能抵抗TJnh1501的攻擊,表明這兩種疫苗對(duì)分離毒株TJnh1501的感染不能提供有效的免疫保護(hù)。
[Abstract]:The results showed that the positive rate of PRRS was 26.26 % ( 104 / 396 ) . The results showed that the positive rate of PRRS was 26.26 % ( 104 / 396 ) . The results showed that the positive rate was 69.23 % ( 72 / 104 ) . The results of the analysis of the biological software of SimPlot showed that the recombinant virus of Jnh1501 was the recombinant virus of the virulent strain of HP - PRRS vaccine and the virulent strain , and the recombination position was 1737nt - 3506nt of the non - structural protein coding region ( Nsp ) . The results showed that the piglets had higher body temperature , mental depression , dyspnea , runny nose and daily gain decline . The results showed that the immune protective effect of the recombinant virus Jnh1501 on the isolated strain Jnh1501 was significantly higher than that of the control group ( P < 0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：S852.65

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1778849