本文選題：越南槐　切入點(diǎn)：內(nèi)生真菌　出處：《廣西大學(xué)》2017年博士論文

【摘要】：本研究以采自靖西市誠(chéng)良村(J)、天等縣龍粟村(T)、大新縣上湖村(D)等地的廣西特有珍稀藥用植物越南槐為研究對(duì)象,在對(duì)不同產(chǎn)地越南槐植株不同器官、不同組織的內(nèi)生真菌進(jìn)行分離鑒定的基礎(chǔ)上,進(jìn)行越南槐內(nèi)生真菌的多樣性、抑菌活性及其次生代謝產(chǎn)物研究。主要研究結(jié)果如下。(1)越南槐的根、莖及種子具有種類豐富的內(nèi)生真菌。從廣西三個(gè)產(chǎn)地采集越南槐的新鮮根、莖及種子共3種器官樣品,分別取根韌皮部、根木質(zhì)部、莖皮、莖木質(zhì)部、種皮、胚共6種組織進(jìn)行內(nèi)生真菌分離,共得到菌株1 504株;將這些菌株鑒定為分類單元95個(gè),其中確定了分類地位73個(gè),未確定分類地位22個(gè)。已確定分類地位的分類單元?dú)w屬到真菌界3個(gè)門7個(gè)綱22個(gè)目44個(gè)屬,19個(gè)鑒定到屬水平,54個(gè)鑒定到種水平,其中最豐富的是子囊菌門有68個(gè)分類單元,其次是擔(dān)子菌門有3個(gè)分類單元、接合菌門存2個(gè)分類單元;優(yōu)勢(shì)綱為Sordariomycetes、Eurotiomycetes、Dothideomycetes;優(yōu)勢(shì)目為 Hypocreales、Eurotiales、Capnodiales、Pleosporales;優(yōu)勢(shì)屬為 Fusarium、Penicillium、Cladosporium、Colletotrichum;優(yōu)勢(shì)種為 Fusariuim solani、Fusarium oxysporuim、Cladosporium perangustum、Colletotrichum gloeosporioides、Cercospora beticola。(2)地理位置、器官類型以及種子內(nèi)部組織顯著地影響越南槐內(nèi)生真菌的定殖。三個(gè)產(chǎn)地間越南槐內(nèi)生真菌定殖率具有顯著差異,產(chǎn)地T的最高(30.57%),產(chǎn)地J的次之(22.07%),產(chǎn)地D的最低(14.03%);不同器官間內(nèi)生真菌定殖率具有顯著差異,種子的最高(46.67%),莖的次之(22.40%),根的最低(14.03%);器官內(nèi)部組織內(nèi)生真菌定殖率比較,種子內(nèi)部組織胚與種皮之間具有顯著差異且胚的最低僅為0.67%,其他器官內(nèi)部組織之間均沒有顯著差異。(3)地理位置和器官組織類型顯著的影響越南槐內(nèi)生真菌群落的組成和分布。在目、屬、種水平上,越南槐內(nèi)生真菌群落的優(yōu)勢(shì)類群存在產(chǎn)地間、器官組織間明顯差異;產(chǎn)地間、器官組織間分類單元的相似性指數(shù)均極低,分別在0.106 7～0.220 0、0～0.357 9之間;產(chǎn)地、器官共有分類單元分析,鑒定的73個(gè)分類單元中,三個(gè)產(chǎn)地共有8個(gè),兩個(gè)產(chǎn)地共有12個(gè),三個(gè)器官共有4個(gè),兩個(gè)器官共有13個(gè),其他分類單元只在一個(gè)產(chǎn)地或器官出現(xiàn);產(chǎn)地、組織中相對(duì)多度最高分類單元分析,產(chǎn)地T中為Phoma sp.、Phialophora mustea、Metarhizium anisopliae,產(chǎn)地J 中為Neopestalotiopsis sp.、Phaeosphaeriasp.,產(chǎn)地D中為Myrotheciumverrucaaria,根木質(zhì)部中為Cladosporium perangustum,根韌皮部中為Myrothecium verrucaria、Purpureocillium lilacinum,莖木質(zhì)部中為 Cercospora beticola,莖皮中為Neopestalotiopsis sp.、Phaeosphaeria sp.,種皮中為 Colletotrichum gloeosporioides、Alter naria alternata,胚中為 Pseudocercospora elaeocarpi。(4)越南槐內(nèi)生真菌群落α-多樣性較高(S,95;H',3.993 8;1-D,0.974 0);產(chǎn)地D的越南槐內(nèi)生真菌群落的α-多樣性顯著低于產(chǎn)地T和產(chǎn)地J,后兩者間差異不明顯;除胚極少定殖真菌外,越南槐其他器官組織不影響內(nèi)生真菌群落的α-多樣性,均定殖同樣豐富的內(nèi)生真菌。(5)越南槐內(nèi)生真菌的抗菌資源豐富。多個(gè)菌株顯示了與宿主相似的強(qiáng)抑菌活性,對(duì)白色念珠菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌等人體病原菌以及水稻細(xì)菌性條斑病菌、柑橘潰瘍病菌、三七黑斑病菌、三七炭疽病菌和三七根腐病菌等植物病原菌具有明顯的抑制作用。在95個(gè)分類單元的代表菌株中,21株分別對(duì)白色念珠菌以及4種病原細(xì)菌有較強(qiáng)的抑制作用,10株對(duì)3種三七病原真菌具強(qiáng)的拮抗活性。特別是,對(duì)病原細(xì)菌及白色念珠菌的最小抑菌濃度,GRPH-0(對(duì)白色念珠菌)、TRPH-21(對(duì)大腸桿菌)、TRPH-35(對(duì)金黃色葡萄球菌)、JXRPH-24(對(duì)金黃色葡萄球菌)、JSMXY-17(對(duì)水稻細(xì)菌性條斑病菌)、TRXY-5(對(duì)水稻細(xì)菌性條斑病菌)、JSMXY-17(對(duì)柑橘潰瘍病菌)共7個(gè)菌株的代謝產(chǎn)物分別僅為陽性對(duì)照的16倍、16倍、32倍、32倍、16倍、16倍、64倍,且均遠(yuǎn)小于宿主代謝產(chǎn)物的最小抑菌濃度;丁TRPH-73、TRPH-87、TRXY-46、TRXY-18-1、TRPH-89、TRPH-13、TRXY-34-1共7個(gè)菌株的代謝產(chǎn)物對(duì)3種三七病原真菌菌絲的抑菌活性等于或大于陽性對(duì)照,且均比宿主代謝產(chǎn)物強(qiáng);TRPH-73、TRPH-87、TRXY-46、TRPH-89、TRPH-13、TRXY-34-1 共 6個(gè)菌株的代謝產(chǎn)物對(duì)2種三七病原真菌孢子的最小抑菌濃度范圍為1～2 mg.mL-1,僅為陽性對(duì)照的4～8倍,小于宿主代謝產(chǎn)物的最小抑菌濃度。(6)菌株TRXY-46含有較豐富的甾體類化合物。發(fā)酵培養(yǎng)該菌株150 L,通過浸泡提取方法得到粗提物220 g并通過系統(tǒng)梯度洗脫將其分為F1、F2、F3、F4、F5、F6等6個(gè)餾分,通過各種色譜手段從各餾分中分離化學(xué)成分,利用波譜方法從F1餾分中鑒定了 5個(gè)甾體類化合物,分別是 6β-hydroxystigmast-4-en-3-one(化合物 1)、(22E,24R)-5α,8-epidioxyergosta-6,9(11),22-trien-3βol(化合物 2)、5,8-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol(化合物 3)、(22E,24R)-5α,8α-epidioxy-23-methylergosta-6,22-dien-3βol(化合物 4)、(22E,24R)-3β,5α-dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one(化合物5)。
[Abstract]:In this study , the diversity , antibacterial activity and secondary metabolites of the endogenous fungi of Sophora japonica were studied . The main results of this study were as follows . ( 1 ) The roots , stems and seeds of Sophora japonica were rich in endogenic fungi . Three kinds of organs were collected from three different regions of Guangxi , including root , xylem , stem , xylem , seed coat and embryo . ( 2 ) The geographical location , the type of organs , and the internal tissues of the seeds significantly influenced the colonization of the endogenous fungi in the pseudoacacia . There were significant differences in the colonization rates of the endogenous fungi in the three areas : the highest ( 30.57 % ) , the secondary ( 22.07 % ) of the origin , the lowest ( 14.03 % ) of the origin , the lowest ( 14.03 % ) of the two organs . The diversity of 偽 - diversity was higher ( S , 95 ; H ' , 3.993 8 ; 1 - D , 0.974 0 ) . ( 5 ) The antibacterial activity of 7 strains of pseudoacacia was 16 , 16 , 32 , 32 , 16 , 16 and 64 times , respectively , and the minimum inhibitory concentration of TRPH - 73 , TRPH - 87 , TRXY - 46 , TRPH - 89 , TRPH - 13 and TRXY - 34 - 1 was 1 - 2 mg 路 mL - 1 , which was only 4 - 8 times of the positive control . ( 6 ) The strain TRXY - 46 contains a rich steroid compound . The strain 150 L is obtained by fermentation . Six fractions of crude extract 220 g are obtained by soaking and extracting . Five steroid compounds are separated from each fraction by various chromatographic methods .

【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：Q93

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本文編號(hào)：1692001