甲殼類水產(chǎn)食物過敏的發(fā)病率逐年攀升,擬穴青蟹（Scylla paramamosain）作為重要的甲殼類水產(chǎn)經(jīng)濟動物之一,其引起的食物過敏性疾病不容忽視。熱加工可有效降低單一過敏原的致敏性,但對于青蟹食物基質(zhì)致敏性影響的研究有待深入。因此探究熱加工影響擬穴青蟹肌肉過敏原致敏性及其分子機理,對于低致敏性產(chǎn)品的加工方法研究和保證擬穴青蟹的食用安全性具有重要意義。本研究首先評估3種熱加工方式（煮制、蒸制、高溫壓力處理）對擬穴青蟹肌肉粗蛋白結(jié)構(gòu)、消化酶水解穩(wěn)定性和免疫結(jié)合活性的影響;針對高溫壓力處理的擬穴青蟹肌肉組織進行模擬胃腸液的連續(xù)消化,利用人腸道上皮細胞Caco-2轉(zhuǎn)運模型對消化產(chǎn)物進行轉(zhuǎn)運吸收,采用嗜堿性粒細胞激活試驗檢測轉(zhuǎn)運產(chǎn)物的致敏性。結(jié)果顯示,與生鮮青蟹肌肉粗蛋白相比,熱加工后的青蟹肌肉粗蛋白的α螺旋含量顯著增加,β折疊和β轉(zhuǎn)角含量降低,蛋白穩(wěn)定性降低;熱加工后青蟹肌肉粗蛋白的酶解穩(wěn)定性下降,消化率升高,酶解產(chǎn)物的免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）E結(jié)合活性的抑制率降低,熱穩(wěn)定性過敏原的IgG結(jié)合能力下降。與煮制和蒸制2種熱加工方式相比,高溫壓力處理對青蟹肌肉粗蛋白免... 

【文章來源】：集美大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：148 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

過敏原組分診斷方法的原理示意[24]250

AIT在用于食物過敏治療時,普遍采用未經(jīng)修飾的變應(yīng)原,這也在一定程度上限制了用于治療的劑量,同時不良副作用及較長的治療時間等因素的影響,也制約了AIT的發(fā)展。因此,國內(nèi)外學(xué)者在保持變應(yīng)原免疫原性的同時減少變應(yīng)原敏感性[17]55-73,[36]的前提下,進一步對AIT的作用方式進行了研究。研究主要集中在四個方面(圖1-2)[17]55-73:(1)構(gòu)建低變應(yīng)原[37](hypoallergens),可通過添加或刪除抗原表位、采用理化修飾改變蛋白結(jié)構(gòu),以消除天然過敏原的IgE反應(yīng)活性或變應(yīng)原性。(2)采用表位肽(epitope peptides)代替完整過敏原[38,39],T細胞表位肽不能與IgE發(fā)生交聯(lián),但可以觸發(fā)CD4+T細胞并刺激具有T細胞調(diào)節(jié)功能的T細胞表位,以單個肽或肽混合物的形式遞呈,以增強Th1和Treg細胞活性。貓主要過敏原Fel d 1的T細胞表位肽進行臨床試驗的結(jié)果表明,T細胞表位肽在貓過敏方面可誘導(dǎo)T細胞的轉(zhuǎn)化,可能具有臨床療效,且治療效果可能持續(xù)較長時間[40]。在對屋塵螨主要過敏原表位肽的研究中表明,這些表位肽不僅在體外實驗中表現(xiàn)出較好的降低致敏性結(jié)果,并且在臨床給藥一年后仍然對機體產(chǎn)生持續(xù)的耐受效果[41]。同時,基于B細胞表位肽的疫苗在激活過敏原特異性T細胞和誘導(dǎo)過敏患者外周血單核細胞分泌促炎因子方面也具有較強的降低潛能[42]。(3)模擬表位肽(mimotopes)[43],模擬IgE結(jié)合表位的結(jié)構(gòu)或序列的模擬表位肽,可以誘導(dǎo)機體產(chǎn)生能夠識別過敏原的抗體,這些抗體可抑制機體食物過敏。文獻表明過敏原特異性IgG4表位肽抗體可拮抗和阻斷肥大細胞和嗜堿性細胞表面IgE引起的抗原反應(yīng),從而抑制效應(yīng)細胞的活化和脫顆粒[44],進而起到AIT的作用。(4)構(gòu)建共軛分子(conjugated molecules)[45],過敏原與具有免疫調(diào)節(jié)功能的分子偶聯(lián)成共軛分子,可促進促耐藥Treg細胞或Th1細胞的誘導(dǎo)。此外,在多種過敏動物模型中已證明,飲食及微生物可影響口服耐受性和過敏敏化進程[46],高脂飲食引起的微生物種類及數(shù)目的改變增加了機體對食物過敏的敏感性[47],而腸道中微生物分泌的組胺則影響了過敏性炎癥的嚴重程度[48],因此可通過調(diào)節(jié)飲食、改善體內(nèi)菌群組成等方式,達到預(yù)防或控制食物過敏的效果。細菌來源的高水平的短鏈脂肪酸的攝入可有效防止小鼠和人類過敏[49],采用食物過敏患兒的糞便菌群定植不能保護動物免受食物過敏,但健康兒童微生物菌群的定殖則可有效防止動物出現(xiàn)食物過敏情況[50];這表明腸道微生物可調(diào)節(jié)機體對食物抗原的過敏反應(yīng),意味著機體微生物的改變可能在一定程度上對食物過敏有顯著的預(yù)防及治療效果。

本研究的技術(shù)路線

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]擬穴青蟹（Scylla paramamosain）肌漿蛋白過敏原的致敏性研究[D]. 楊陽.集美大學(xué) 2018
[2]酪蛋白抗氧化肽結(jié)構(gòu)特征對其生物利用度的影響及其跨膜轉(zhuǎn)運機制的研究[D]. 王波.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016

碩士論文
[1]美拉德反應(yīng)影響擬穴青蟹主要過敏原致敏性的機理研究[D]. 楊煌.集美大學(xué) 2019
[2]壇紫菜硫酸多糖和龍須菜硫酸多糖的抗腹瀉活性研究[D]. 劉波.集美大學(xué) 2019
[3]擬穴青蟹肌質(zhì)鈣結(jié)合蛋白的過敏性研究[D]. 胡夢君.集美大學(xué) 2018
[4]牛羊乳酪蛋白抗原表位鑒定及熱處理對其抗原性的影響[D]. 韓波.陜西科技大學(xué) 2018
[5]中國對蝦（Penaeus chinensis）原肌球蛋白抗原表位和關(guān)鍵氨基酸的篩選及糖基化對其過敏原性的影響[D]. 王金寶.浙江工商大學(xué) 2018
[6]美拉德反應(yīng)對魚類小清蛋白免疫學(xué)性質(zhì)及結(jié)構(gòu)的影響[D]. 趙勇娟.集美大學(xué) 2016
[7]克氏原螯蝦新型過敏原的鑒定與性質(zhì)研究[D]. 張永霞.集美大學(xué) 2015
[8]克氏原螯蝦過敏原的性質(zhì)研究[D]. 陳亨莉.集美大學(xué) 2013
[9]蟹類過敏原的研究[D]. 梁銀龍.集美大學(xué) 2008



本文編號：3613623