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基于納米二聚體的細(xì)胞內(nèi)手性機制及其對端粒酶和葉酸高靈敏生物傳感檢測

發(fā)布時間:2018-05-14 18:57

  本文選題:自組裝 + 圓二色性; 參考:《江南大學(xué)》2017年博士論文


【摘要】:本論文采用自組裝技術(shù),以非手性納米材料為基元構(gòu)建了手性納米粒子二聚體結(jié)構(gòu),研究了二聚體結(jié)構(gòu)與細(xì)胞的相互作用,并建立了細(xì)胞內(nèi)高靈敏度高特異性的端粒酶傳感檢測新方法,以及對食品中營養(yǎng)物質(zhì)葉酸的表面增強拉曼高靈敏傳感檢測。此外,通過構(gòu)建等離子納米棒二聚體衛(wèi)星狀多級次組裝結(jié)構(gòu)實現(xiàn)對活體腫瘤的多模態(tài)成像傳感與治療。首先,以DNA分子為骨架將相同粒徑的等離子納米金和納米銀顆粒分別與半導(dǎo)體量子點構(gòu)建成異質(zhì)二聚體結(jié)構(gòu),以及量子點與量子點組裝成的二聚體結(jié)構(gòu)。通過圓二色光譜表征發(fā)現(xiàn),等離子貴金屬與半導(dǎo)體量子點組裝成的二聚體結(jié)構(gòu),能在貴金屬的等離子吸收區(qū)域和半導(dǎo)體量子點吸收區(qū)域產(chǎn)生了強烈的圓二色吸收峰。而單純的半導(dǎo)體量子點只在其自身區(qū)域有吸收。其手性來源是二聚體的粒子與粒子之間是形成了一定的二面角,從而產(chǎn)生了圓二色信號。同時,由于貴金屬的等離子效應(yīng),會使得產(chǎn)生的圓二色信號比單純的半導(dǎo)體材料信號更強烈。其次,構(gòu)建了等離子金納米粒子二聚體,首次采用等離子手性信號來觀察組裝體與生物細(xì)胞之間的相互作用。通過圓二色信號變化發(fā)現(xiàn),組裝體在進入細(xì)胞前后,其手性信號發(fā)生了翻轉(zhuǎn)。冷凍三維重構(gòu)證明,二聚體材料進入前后的二面角發(fā)生了扭轉(zhuǎn)。進一步研究表明,細(xì)胞內(nèi)的p H、離子強度以及蛋白濃度不同導(dǎo)致了二聚體進入細(xì)胞前后的構(gòu)象發(fā)生變化,從而導(dǎo)致不同的手性信號。另一方面,采用左右旋圓偏振光對偶聯(lián)有光敏分子的納米金二聚體進行照射,可以發(fā)現(xiàn)當(dāng)二聚體進入細(xì)胞內(nèi)部后,其對左旋偏振光的吸收明顯增強,產(chǎn)生單線態(tài)氧的能力也比右旋偏振光照射下強。而在細(xì)胞外,二聚體在右旋偏振光照射下產(chǎn)生單線態(tài)氧的能力比左旋的強。從而間接證明二聚體材料在細(xì)胞內(nèi)的構(gòu)象發(fā)生了變化。第三,采用適配體DNA構(gòu)建了納米金異質(zhì)二聚體手性傳感器,實現(xiàn)了對細(xì)胞內(nèi)的端粒酶的高靈敏高特異性檢測。異質(zhì)二聚體在進入細(xì)胞后具有較高的生物相容性和穩(wěn)定性,并且能與癌細(xì)胞中端粒酶特異性結(jié)合使結(jié)構(gòu)發(fā)生解離,進而產(chǎn)生手性信號變化。本方法對端粒酶的檢測靈敏度達到1.7×10-15 IU。首次建立了細(xì)胞內(nèi)生物分子手性傳感檢測方法。第四,基于抗原抗體的特異性識別反應(yīng)構(gòu)建了金銀納米粒子異質(zhì)二聚體表面增強拉曼傳感器,實現(xiàn)了對食品中葉酸的高靈敏檢測。對葉酸的檢測靈敏度達到0.86 pg/mg,是目前報道最高的。第五,基于金納米棒二聚體,采用多級次DNA自組裝技術(shù)將其與上轉(zhuǎn)換納米材料構(gòu)建成衛(wèi)星狀結(jié)構(gòu)。利用這種組裝結(jié)構(gòu)能夠?qū)崿F(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的多模態(tài)成像技術(shù)介導(dǎo)的光熱治療和光動力治療。成像技術(shù)包括核磁共振成像,上轉(zhuǎn)換發(fā)光成像,x光斷層掃描,光聲成像。同時,由于二聚體結(jié)構(gòu)強烈的等離子耦合作用,使得金納米棒二聚體的光熱轉(zhuǎn)換效率是單純納米棒的兩倍之多。并最終首次利用組裝體結(jié)構(gòu),實現(xiàn)對活體腫瘤的多模態(tài)成像和光治療。
[Abstract]:This paper uses self - assembly technique to construct chiral nano - particle dimer structure by using non - chiral nano - material as primitive , and studies the interaction between the dimer structure and cell .

【學(xué)位授予單位】:江南大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:TB383.1;TP212.3

【參考文獻】

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本文編號:1889080

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