L-半胱氨酸熒光化學(xué)傳感器的研制及應(yīng)用研究
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【摘要】:L-半胱氨酸是一種很重要的含巰基的α-氨基酸,在生物體內(nèi)發(fā)揮著許多重要的作用,如參與蛋白質(zhì)合成、解毒、新陳代謝等。在人體的許多蛋白質(zhì)中都可以發(fā)現(xiàn)L-半胱氨酸的存在,是生物相關(guān)蛋白質(zhì)最重要的組成成分之一。L-半胱氨酸還有助于維持細(xì)胞內(nèi)氧化還原活性、信號傳導(dǎo)和基因調(diào)節(jié)。若細(xì)胞中L-半胱氨酸的含量偏離正常水平會導(dǎo)致很多疾病,危害人體的健康。同時,L-半胱氨酸還廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)、生物醫(yī)藥、生化研究等領(lǐng)域。因此,建立一種簡便的、具有良好選擇性的L-半胱氨酸檢測方法是一項很有意義的工作。熒光化學(xué)傳感器具有操作簡單、靈敏度高、選擇性好、響應(yīng)時間短、還可以進(jìn)行實時檢測等優(yōu)點,已被廣泛應(yīng)用于環(huán)境、食品和生物體內(nèi)痕量樣品的檢測。本論文設(shè)計并合成了2,2'-([1,1'-聯(lián)苯]-2,2'-二基雙(氧基))雙(N-(喹啉-8-基)乙酰胺)(簡稱L)作為配體,將其與Cu~(2+)的絡(luò)合物L(fēng)-Cu~(2+)作為熒光探針檢測L-半胱氨酸的含量,并對該探針的熒光光譜性質(zhì)、識別性能、傳感機理以及在實際樣品中的測試效果進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。第一章中,對L-半胱氨酸進(jìn)行了概述,包括L-半胱氨酸的重要作用以及會產(chǎn)生的一些危害,詳細(xì)介紹了L-半胱氨酸的檢測方法及其熒光化學(xué)傳感器的研究進(jìn)展。第二章中,主要介紹了配體L及其中間產(chǎn)物的合成方法,并通過質(zhì)譜、核磁氫譜和碳譜對其進(jìn)行了表征。第三章中,對熒光化學(xué)傳感器L-Cu~(2+)對L-半胱氨酸的檢測性能進(jìn)行了系統(tǒng)的研究,優(yōu)化了實驗條件,考察了傳感器的選擇性及抗干擾能力,對其傳感機理進(jìn)行了討論,并將其應(yīng)用于實際樣品中L-半胱氨酸的定量測定。在常溫下,PBS緩沖溶液(PBS 0.02 mol/L;p H=8.0)與乙腈體積比為9:1的溶液中,L-Cu~(2+)對L-半胱氨酸識別的線性范圍為1.0×10-6到8.0×10-6 mol/L,檢出限可達(dá)到1.92×10-7mol/L。該傳感器顯示出對L-半胱氨酸良好的選擇性及對其它共存氨基酸良好的抗干擾能力。通過絡(luò)合工作曲線圖及質(zhì)譜分析提出了可能的傳感機制。此方法在實際樣品中檢測L-半胱氨酸的加標(biāo)回收率在99.2 102.1%之間,加標(biāo)回收標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.94%到1.52%之間,驗證了其實用性。
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:O657.3
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,本文編號:1294844
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