本文關(guān)鍵詞： 纖維素 凝血酶 止血紗布 蠶繭 創(chuàng)傷愈合　出處：《西南大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：創(chuàng)傷出血在日常生活中非常常見,輕微的創(chuàng)傷雖然不足以致命,但是對于大量的出血,若不能及時止血,失血量達到全身血液的30%甚至更多時,就會危及生命。在戰(zhàn)爭、交通事故、自然災(zāi)害及日常手術(shù)中,失血過多是造成死亡的主要原因之一。目前為止,國內(nèi)用于中、重度出血的止血產(chǎn)品極少,止血效果也十分不理想,雖然國外也有一些止血性能良好的止血材料,但是其主要知識產(chǎn)權(quán)掌握在少數(shù)幾家大公司手中,同時這些止血產(chǎn)品價格昂貴,因而亟待開發(fā)出一種止血效果好、價格低廉的止血材料。此外,當(dāng)止血完成后,如何讓傷口更快更好的愈合也是人們非常關(guān)心的問題。本研究基于血漿原位誘導(dǎo)制備止血紗布及蠶繭創(chuàng)傷敷料,分別對各自的影響條件進行系統(tǒng)探討,得到最佳制備條件,并分別對它們的理化性能、生物醫(yī)用性能等進行了表征,結(jié)論如下:(1)通過單因素實驗得到止血紗布最佳制備工藝為:誘導(dǎo)離子Ca2+、誘導(dǎo)離子濃度0.08mol/L、血漿不稀釋、誘導(dǎo)時間2.5h、誘導(dǎo)溫度35?C,接著通過L18(33)正交試驗對誘導(dǎo)離子濃度、誘導(dǎo)時間、誘導(dǎo)溫度3個因素對體外凝血時間的影響進行研究。以O(shè)D值和凝血時間為考察指標來評價不同條件下制備的止血紗布的凝血性能,結(jié)果表明各因素的影響大小為:誘導(dǎo)離子濃度誘導(dǎo)溫度誘導(dǎo)時間,最佳制備工藝條件為誘導(dǎo)離子濃度0.08mol/L、誘導(dǎo)時間2.5h、誘導(dǎo)溫度35?C。將最佳條件下制備的紗布/血漿(gauze/plasma)復(fù)合止血材料記為止血紗布GP。(2)通過對止血紗布GP進行紅外光譜、掃描電鏡、氨基酸分析、耐水洗性能、耐時間性能、熱穩(wěn)定性能等實驗對止血紗布GP的物理化學(xué)性能進行評價。通過紅外光譜發(fā)現(xiàn)止血紗布在1060cm-1處出現(xiàn)新的吸收峰,在凝血酶的紅外光譜圖中,1060cm-1對應(yīng)硫氧雙鍵伸縮震動峰,說明GP表面有凝血酶的存在。通過掃描電鏡發(fā)現(xiàn)表面吸附了一層膜狀物質(zhì),經(jīng)氨基酸分析發(fā)現(xiàn)此物質(zhì)的氨基酸組成與凝血酶類似,進一步確定了止血紗布GP表面具有明顯促凝活性的物質(zhì),其主要成分為凝血酶。通過熱力學(xué)性能實驗發(fā)現(xiàn)止血紗布GP和純棉紗布有著相似的熱學(xué)性能,熱穩(wěn)定性優(yōu)于氧化纖維素。通過凝血穩(wěn)定性實驗發(fā)現(xiàn)止血紗布GP有較好的耐洗性能,且易于保存,保存時間可達180天以上。通過吸水、吸血實驗發(fā)現(xiàn)止血紗布GP與純棉紗布相比,吸液能力沒有發(fā)生明顯的變化,全血的凝固時間為3.7±0.4min,短于純棉紗布和氧化纖維素凝血時間。(3)通過對GP的凝血機理,止血效果,生物相容性進行系統(tǒng)研究得到如下結(jié)果:1、GP主要是通過內(nèi)源性凝血途徑來促進血液凝固的,與空白對照相比,GP對血液的凝血酶原時間(PT)無明顯變化,而活化部分凝血酶時間(APTT)有顯著縮短,表明其主要止血機理是GP表面的凝血酶可以參與凝血級聯(lián)反應(yīng),啟動內(nèi)源性凝血途徑,促進可溶性的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為不溶性的纖維蛋白,從而促進凝血;2、在動物出血模型中GP的止血效果優(yōu)于純棉紗布和OC,其中在新西蘭大白兔耳動脈止血實驗中,GP的耳動脈平均止血時間為85.8±3.7s,短于純棉紗布的185.3±12.4s和氧化纖維素(OC)的90.3±4.8s;GP的耳動脈平均失血量為0.9±0.1g,低于純棉紗布的1.7±0.3g和OC的1.2±0.2g;在新西蘭大白兔肝臟止血實驗中,GP的肝臟平均止血時間為82.1±4.5s,比純棉紗布的162.6±10.7s和OC的102.3±6.8s止血時間更短;GP的肝臟平均失血量為0.8±0.2g,明顯低于純棉紗布的2.3±0.3g和OC的1.4±0.4g;3、GP有良好的生物相容性,細胞毒性實驗和熒光染色實驗結(jié)果表明,GP不會影響細胞的正常生長,無明顯細胞毒性;組織學(xué)切片結(jié)果顯示傷口恢復(fù)情況正常,無明顯的紅腫現(xiàn)象,表明止血材料GP在使用過程中無毒副作用,使用具有安全性、可靠性。(4)通過單因素實驗得到蠶繭多孔創(chuàng)傷敷料(CCSs+PRP和CCSs+PPP)的最佳工藝條件為氯化鈣濃度10%,血漿不稀釋,誘導(dǎo)時間1.5h,誘導(dǎo)溫度30?C;通過通過掃描電鏡發(fā)現(xiàn)多孔蠶繭支架(cocoon scaffolds,CCSs)、CCSs+PRP和CCSs+PPP這三種材料均具有均勻的孔隙分布,而CCs結(jié)構(gòu)致密,幾乎沒有孔隙;通過機械性能測試發(fā)現(xiàn)與蠶繭(cocoon composites,CCs)相比,其他三種材料的機械性能都出現(xiàn)顯著性的下降,在濕態(tài)下,CCSs、CCSs+PRP和CCSs+PPP的斷裂伸長顯著增加,表明材料變得柔軟,更適合用作傷口敷料;通過XRD發(fā)現(xiàn)CCSs、CCSs+PRP和CCSs+PPP的結(jié)晶度下降,這可能是其機械下降的主要原因之一;通過孔隙率發(fā)現(xiàn)CCSs、CCSs+PRP和CCSs+PPP均高達80%以上,而CCs的孔隙率不足1%,這與掃描電鏡觀察的結(jié)果相一致;通過親水性能測試,發(fā)現(xiàn)與CCs相比,CCSs、CCSs+PRP和CCSs+PPP的親水性能顯著提高,不僅吸水性更高,而且保留水分的時間更長。(5)通過生長因子釋放試驗發(fā)現(xiàn)CCSs+PRP和CCSs+PPP的生長因子釋放過程分為暴釋、穩(wěn)釋、滯釋三個階段,釋放時長可持續(xù)72h左右;通過MTT實驗和熒光染色試驗發(fā)現(xiàn)CCSs+PRP和CCSs+PPP能顯著促進L929細胞的增值,其中CCSs+PRP組的增值效果最好;通過動物活體實驗發(fā)現(xiàn)與空白組、CCSs和美皮貼組相比,CCSs+PRP和CCSs+PPP在15天傷口就能完全恢復(fù),能顯著促進傷口的愈合,并且CCSs+PRP的促進效果更好。
[Abstract]:A hemostatic gauze with hemostatic effect and low cost has been developed . The results show that the optimal preparation conditions are as follows : ( 1 ) The optimal preparation conditions are as follows : ( 1 ) The best preparation conditions are as follows : ( 1 ) The optimal preparation conditions are as follows : ( 1 ) The optimal preparation conditions are as follows : ( 1 ) The optimal preparation conditions are as follows : ( 1 ) The optimal preparation conditions are as follows : ( 1 ) The optimal preparation conditions are as follows : ( 1 ) The optimal preparation conditions are as follows : ( 1 ) The optimal preparation conditions are : the induced ion concentration is 0.08mol / L , the induction time is 2.5 h , the induction temperature is 35 擄 C . The gauze / plasma composite hemostatic material prepared under the best condition is recorded as hemostatic gauze GP . ( 2 ) The physical and chemical properties of hemostatic gauze GP were evaluated by IR , SEM , amino acid analysis , water washing resistance , time resistance and thermal stability . The results showed that GP had no obvious changes in prothrombin time ( PT ) than that of pure cotton gauze . The average bleeding time of GP was 82.1 鹵 4.5s , which was significantly lower than that of pure cotton gauze . The results showed that GP did not influence the normal growth and no obvious cytotoxicity of GP . The results showed that CCSs , CCSs + PRP and CCSs + PPP had a significant decrease in the mechanical properties of CCSs , CCSs + PRP and CCSs + PPP . ( 5 ) The growth factor releasing process of CCSs + PRP and CCSs + PPP was found to be divided into three stages : controlled release , stable release and delayed release by the growth factor release test . The results showed that CCSs + PRP and CCSs + PPP could significantly promote the value of L929 cells .

【學(xué)位授予單位】：西南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R318.08

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本文編號：1522560