本文關(guān)鍵詞：硅藻18S rRNA鑒別實(shí)驗(yàn)家兔水中尸體死因的研究

  更多相關(guān)文章： 硅藻18S rRNA PCR擴(kuò)增 DGGE DNA測(cè)序 水中死亡 死因鑒定

【摘要】：目的：利用硅藻18S rRNA基因檢測(cè)判定實(shí)驗(yàn)家兔水中尸體的死亡原因。方法：將實(shí)驗(yàn)家兔隨機(jī)分成溺死組、死后拋尸入水組及空白對(duì)照組；溺死組和死后拋尸入水組又分為兩個(gè)亞組：長(zhǎng)江水域組和護(hù)校河水域組。各組按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分別提取死后家兔的肺、肝、腎、腦組織和心血，勻漿后，，選用硅膠密度梯度離心法分離組織中的硅藻并采用Chelex-100法提取硅藻DNA，運(yùn)用PCR技術(shù)擴(kuò)增硅藻特異的18S rRNA基因片段，并使用瓊脂糖凝膠電泳法、變性梯度凝膠電泳法、以及DNA測(cè)序技術(shù)三種方法對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)并加以分析。同時(shí)使用傳統(tǒng)的強(qiáng)酸消化法檢測(cè)肺、肝和腎組織中的硅藻，并與PCR結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果：溺死組肺、肝、腎、腦組織及心血中硅藻檢測(cè)多數(shù)呈陽(yáng)性：肺（100%）、肝（75%）、腎（83%）、腦（75%）、心血（58.3%）；死后拋尸入水組僅在肺組織和腎組織中各檢出2例和1例陽(yáng)性；空白對(duì)照組各組織全部呈陰性。強(qiáng)酸消化法在溺死組肺、肝和腎組織中的硅藻檢出率分別為：肺（83%）、肝（25%）和腎（16.7%），而死后拋尸入水組僅在1例肺組織中檢出硅藻。 結(jié)論：將PCR技術(shù)擴(kuò)增硅藻18S rRNA基因片段運(yùn)用到家兔水中尸體的死亡原因判斷，其靈敏度和特異性均優(yōu)于傳統(tǒng)的硅藻強(qiáng)酸消化法。此檢測(cè)方法對(duì)水中尸體的死因鑒定具有一定的應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】：硅藻18S rRNA PCR擴(kuò)增 DGGE DNA測(cè)序 水中死亡 死因鑒定
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：D919.4
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表5-8
• 摘要8-9
• Abstract9-11
• 前言11-20
• 1. 硅藻的生物學(xué)特性及其分布12-13
• 2. 硅藻的法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)方法13-17
• 2.1 化學(xué)消化法13
• 2.2 酶消化法13-14
• 2.3 微波消解法14
• 2.4 高溫灰化法14
• 2.5 浸漬法14-15
• 2.6 硅膠梯度離心法15
• 2.7 水中浮游生物葉綠素檢測(cè)15
• 2.8 分子生物學(xué)檢驗(yàn)15-16
• 2.9 各方法的硅藻檢出率比較16-17
• 3. 硅藻 18S rRNA 基因序列的特異性17-18
• 4. 研究總體思路18-20
• 研究?jī)?nèi)容與方法20-27
• 1. 研究?jī)?nèi)容20
• 2. 材料與方法20-27
• 2.1 動(dòng)物模型制作材料20
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑20
• 2.3 實(shí)驗(yàn)儀器20-21
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法21
• 2.5 檢材制備與 DNA 擴(kuò)增21-23
• 2.6 DNA 測(cè)序分析23-24
• 2.7 電泳分析24-26
• 2.8 強(qiáng)酸消化法26-27
• 結(jié)果27-31
• 1. 硅藻 18S rRNA 檢測(cè)結(jié)果27-28
• 2. DGGE 檢測(cè)結(jié)果28
• 3. DNA 測(cè)序結(jié)果28
• 4. 強(qiáng)酸消化法硅藻檢測(cè)結(jié)果28-31
• 討論31-37
• 1. 硅藻 18S rRNA PCR 檢測(cè)在溺死鑒定中的應(yīng)用價(jià)值31-32
• 2. DGGE 技術(shù)對(duì)于硅藻檢測(cè)的應(yīng)用價(jià)值32-34
• 3. DNA 測(cè)序技術(shù)結(jié)果分析34-35
• 4. 組織中硅藻 DNA 的分離35-36
• 5. 強(qiáng)酸消化法在硅藻檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值36-37
• 結(jié)論37-38
• 致謝38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 附錄43-44
• 綜述44-52
• 參考文獻(xiàn)50-52
• 作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果52

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 周玉倩;硅藻18S rRNA鑒別實(shí)驗(yàn)家兔水中尸體死因的研究[D];皖南醫(yī)學(xué)院;2013年

本文編號(hào)：978886