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大鼠死后腦、心肌和腎組織β-actin mRNA的降解與早期死亡時間的關(guān)系

發(fā)布時間:2019-12-02 06:16
【摘要】:目的研究SD大鼠腦、心肌和腎組織細(xì)胞內(nèi)β-actin mRNA的降解與早期死亡時間的關(guān)系,為早期死亡時間的推斷尋找新的指標(biāo)。方法大鼠處死后置于20℃的環(huán)境中,分別于死后不同時間點提取腦、心肌、腎的總RNA,采用實時熒光定量RT-PCR方法檢測總RNA中β-actin mRNA的水平(Ct值),分析死后經(jīng)過時間與Ct值的線性關(guān)系,并建立推斷早期死亡時間的線性回歸方程。結(jié)果隨死亡時間的延長,3種組織內(nèi)β-actin mRNA的水平均發(fā)生了顯著的下降,心肌和腎組織中β-actin mRNA死后24h內(nèi)的降解速率更顯著,而腦組織中β-actin mRNA的降解速率變化不明顯。各組織的Ct值變化與死亡時間之間存在一定的線性關(guān)系。結(jié)論大鼠死亡早期腦、心肌和腎組織內(nèi)β-actin mRNA降解明顯,可以通過其降解規(guī)律來推斷早期死亡時間。
【圖文】:

電泳,定量檢測,腎組織,時間點


均在 1.8~2.0,質(zhì)量濃度介于500~3 000 ng/μL。 瓊脂糖凝膠電泳顯示各時間點所提取的樣品電泳圖均出現(xiàn)了 3 條清晰的條帶(圖 1),說明所有樣品的完整性良好。0 h 4 h 8 h 12 h 16 h 20 h 24 h 36 h 48 h 72 h 96 h28S5S18S圖 1 RNA 電泳結(jié)果圖2.2 β-actin mRNA 定量檢測結(jié)果對各組織所提取的 RNA 樣本進行反轉(zhuǎn)錄和實時熒光定量 PCR 定量檢測,檢測結(jié)果用循環(huán)閾值(Ct值)表示(表 1)。表 1 腦、心肌、腎組織中 β-actin mRNA各個時間點的 Ct 值(n=6,x±s)PMI/h 腦組織 心肌組織 腎組織0 17.101±0.450 19.071±0.906 16.841±0.6194 17.671±0.277 19.939±0.216 17.762±0.8218 17.762±0.193 19.711±0.686 18.537±1.06212 17.756±0.567 20.475±1.372 17.912±0.63916 17.883±0.724 21.232±1.099 18.813±1.25420 18.051±0.769 22.041±0.944 20.299±1.00424 18.281±0.120 22.543±2.099 21.444±1.42136 19.188±0.438 23.575±0.843 23.051±0.83548 20.681±0.519 24.672±0.398 23.043±0.93672 22.183±0.386 26.171±1.294 24.385±1.00296 22.361±0.221 26.025±1.035 26.493±0.6492.3 死亡早期不同組織中 β-actin mRNA 的降解與PMI 的相關(guān)性將死后 24h 內(nèi)各組織 mRNA 的含量與 PMI 進行線性回歸分析,結(jié)果表明:腦、心肌、腎組織中 mRNA的 Ct 值(y)均與 PMI(x)存在相關(guān)性,且不同組織 β-actin mRNA 的降解速率不同。 各組織的線性回歸方程如下:· 6·

【參考文獻】

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【二級參考文獻】

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