【摘要】： 目的:建立小鼠過(guò)敏性休克模型,探討小鼠過(guò)敏性休克后咽喉、肺、胃組織中類胰蛋白酶(MCT)和嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)的時(shí)間變化規(guī)律,旨為臨床及法醫(yī)學(xué)診斷過(guò)敏性休克提供科學(xué)、客觀的參考依據(jù)。 方法:(1)50只小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和致敏組。對(duì)照組10只,致敏組40只。致敏組于實(shí)驗(yàn)第1天腹腔注射致敏原OVA(卵蛋白),1周后加強(qiáng)注射一次。免疫后第3周,尾靜脈注射OVA,誘發(fā)過(guò)敏性休克。致敏組小鼠在尾靜脈注射致敏原前腹腔注射Hanks液,1h后頸椎脫臼處死,吸取腹腔液,制成肥大細(xì)胞懸液。取1滴于載玻片上,中性紅染色。顯微鏡下隨機(jī)計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,計(jì)算脫顆粒肥大細(xì)胞百分比。(2)另取小鼠50只,致敏組小鼠分別于致敏后30min、1h、6h、24h頸椎脫臼處死,取咽喉、肺、胃組織,經(jīng)4%多聚甲醛固定、15%蔗糖脫水后冰凍切片。采用組織原位雜交方法和Image-Pro Plus5.0圖像分析系統(tǒng)檢測(cè)MCT與ECP的含量,用SPSS10.0軟件進(jìn)行單因素方差分析。 結(jié)果:(1)致敏組小鼠均出現(xiàn)過(guò)敏性休克的典型臨床表現(xiàn)及體征,100%發(fā)生過(guò)敏性休克,死亡率為22.5%;肥大細(xì)胞脫顆粒百分比明顯高于對(duì)照組。(2)致敏后小鼠咽喉、肺、胃組織MCT與ECPmRNA平均光密度均高于正常對(duì)照組。咽喉、肺、胃MCTmRNA在致敏后30min達(dá)到高峰,隨后逐漸下降,24h后仍高于正常水平;咽喉ECPmRNA在致敏后30min升高,隨后保持高水平;肺組織ECPmRNA在致敏后6h其表達(dá)突然增高并達(dá)到高峰,隨后開(kāi)始下降,24h后仍維持較高水平;胃組織ECPmRNA則在24h后表達(dá)增高。結(jié)論:(1)本實(shí)驗(yàn)成功地建立了小鼠過(guò)敏性休克動(dòng)物模型,證明了卵蛋白對(duì)小鼠具有高致敏性。(2)過(guò)敏性休克小鼠咽喉、肺、胃組織MCT與ECP mRNA隨致敏時(shí)間呈現(xiàn)一定的時(shí)間變化規(guī)律。MCT與ECP分別在速發(fā)相和遲發(fā)相過(guò)敏反應(yīng)中發(fā)揮作用,為過(guò)敏性休克的法醫(yī)學(xué)鑒定和臨床診斷提供依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號(hào)】：D919

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本文編號(hào)：2541401