【摘要】： 背景和目的 精神損傷程度的鑒定,一直是法醫(yī)精神病學鑒定工作中的難點之一,目前有關慢性應激的鑒定結論伴有一定的主觀性,其檢查指標的客觀性和一致性有待提升,常常難以準確反映精神損傷的實際程度。本實驗采用強迫游泳建立應激動物模型,觀察大鼠的行為、體重和內分泌水平的變化,來評價應激效果,應用免疫組化和Hoechst熒光染色技術測量海馬神經元細胞增殖及凋亡的情況,探討慢性應激對海馬神經元細胞增殖和細胞凋亡的影響,同時觀察經典的SSRI類抗抑郁藥氟西汀對慢性應激大鼠的行為、內分泌、海馬神經元細胞增殖和凋亡的干預作用,為創(chuàng)傷后應激障礙的法醫(yī)鑒定、臨床治療及預防提供一定的理論依據(jù)。 材料和方法 選擇成年雄性SD大鼠,按照隨機的原則將大鼠分為以下4組:對照組、4周應激組、4周應激加水組、4周應激加藥組,每組6只。采用強迫游泳試驗作為應激源,曠場試驗觀察自主行為,應激開始和結束時稱體重,酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清皮質酮水平,增殖細胞核抗原(PCNA)免疫組化的方法測量海馬齒狀回細胞增殖水平,Hoechst熒光反應的方法測量海馬細胞凋亡水平,觀察慢性應激和氟西汀對行為、皮質酮水平以及海馬細胞增殖和凋亡的影響。并對慢性應激后海馬的神經元增殖和凋亡與行為和內分泌的結果進行相關分析。實驗結果用EXCEL2003和SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析處理。結果以均數(shù)±標準差(x±SD)表示,采用方差分析(ANOVA)、LSD和Dunnett T3進行組間均數(shù)比較,相關分析應用Pearson相關, P0.05為差異顯著。 結果 (1)行為、體重和血清皮質酮的變化:對照組和4周應激加藥組大鼠的爬格數(shù)明顯多于4周應激組和4周應激加水組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);4周應激組和4周應激加水組的中央格停留時間高于對照組和4周應激加藥組;在直立上,4周應激組和4周應激加水組明顯少于對照組和4周應激加藥組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01);在體重上,應激后對照組每周體重增長明顯高于其他各組,有統(tǒng)計學意義(P0.01);對照組皮質酮的水平較其他組明顯降低(P0.01)。 (2)慢性應激對大鼠海馬齒狀回細胞增殖的影響:4周應激組大鼠齒狀回的PCNA陽性細胞數(shù)及PCNA指數(shù)明顯小于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。 (3)慢性應激對大鼠海馬區(qū)細胞凋亡的影響:4周應激組大鼠海馬CA1、CA3、DG各區(qū)的凋亡細胞數(shù)明顯多于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。 (4)氟西汀對慢性應激大鼠海馬細胞增殖和凋亡的影響:4周應激用藥組大鼠海馬的PCNA陽性細胞數(shù)和PCNA指數(shù)明顯高于4周應激組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01),和對照組無顯著差距;4周應激用藥組大鼠海馬CA1和CA3區(qū)細胞凋亡數(shù)明顯少于4周應激組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01),和對照組無顯著差距,在DG區(qū),4周應激用藥組的細胞凋亡數(shù)亦少于4周應激組,但高于對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。 (5)海馬的神經元增殖數(shù)與爬格數(shù)和直立數(shù)呈正相關,其隨皮質酮濃度和中央格停留時間的增加有減少趨勢;海馬的細胞凋亡數(shù)與爬格數(shù)和直立數(shù)呈負相關,與中央格停留時間呈正相關,隨皮質酮濃度的升高有增加趨勢。 結論 (1)慢性應激后大鼠以被動性運動為主,表現(xiàn)絕望和退縮,伴體重下降,并導致皮質酮水平升高,與人類抑郁癥和創(chuàng)傷后應激障礙的行為特點相似。 (2)行為特征和皮質酮水平的結果說明,強迫游泳實驗是一個良好的慢性應激模型。 (3)慢性應激后大鼠海馬神經元細胞增殖能力下降,細胞凋亡增多。 (4)氟西汀作為一種典型的SSRI類抗抑郁藥,可以預防或者逆轉慢性應激所致的海馬神經元的細胞增殖能力的下降以及細胞凋亡的增多。 (5)海馬神經元增殖和細胞凋亡與行為和內分泌水平存在相關性。隨著海馬神經元增殖的增加大鼠表現(xiàn)為活動增加,皮質酮濃度下降;隨著神經元凋亡的增加大鼠表現(xiàn)為活動減少,皮質酮濃度升高。
【圖文】：

4 周后應激加藥組體重增長亦高于應激組和應激加水組，但無統(tǒng)計學意義。表 1-3 各組大鼠體重增加值的比較 g(x±SD)Tab. 1-3 Comparison of the increase value of rats in each group (x±SD)一周體重增加值 二周體重增加值 三周體重增加值 四周體重增加值對照組 52.50±9.09▲88.17±7.36 120.17±13.09 155.67±8.624 周應激組 28.50±8.87▲54.33±13.94 89.00±14.79 130.67±18.154 周應激加水組 29.17±3.92▲58.17±11.97 87.33±11.59 127.83±16.074 周應激加藥組 38.67±7.66 57.33±13.71 80.83±22.89 143.17±16.09F 12.79 10.41 7.08 4.25P 0.00 0.00 0.002 0.018注：*表示和對照組有顯著差異，，▲表示和用藥組有顯著差異.

汕頭大學碩士研究生論文4 各組大鼠血清皮質酮濃度的比較如圖 1-2 所示，對照組的血清皮質酮濃度（216.32±99.01）ng/ml 明顯小于 4 周應364.30±73.78）ng/ml、4 周應激加水組（354.96±124.18）ng/ml 和 4 周應激加藥362.23±128.82）ng/ml，差異有顯著性（P<0.01），而各應激組比較，血清皮質酮濃顯差異。
【學位授予單位】：汕頭大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：D919.3

【參考文獻】

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1 趙虎,徐小虎,楊德森;海馬類固醇激素受體系統(tǒng)對天敵應激所致的內分泌變化的調節(jié)效應[J];中國行為醫(yī)學科學;2003年04期

2 趙虎,徐小虎,楊德森;精神刺激所致精神損傷與海馬體積和生化水平變化[J];中國法醫(yī)學雜志;2004年02期

本文編號：2534515