【摘要】： 背景和目的 精神損傷程度的鑒定,一直是法醫(yī)精神病學(xué)鑒定工作中的難點(diǎn)之一,目前有關(guān)慢性應(yīng)激的鑒定結(jié)論伴有一定的主觀性,其檢查指標(biāo)的客觀性和一致性有待提升,常常難以準(zhǔn)確反映精神損傷的實(shí)際程度。本實(shí)驗(yàn)采用強(qiáng)迫游泳建立應(yīng)激動(dòng)物模型,觀察大鼠的行為、體重和內(nèi)分泌水平的變化,來評(píng)價(jià)應(yīng)激效果,應(yīng)用免疫組化和Hoechst熒光染色技術(shù)測(cè)量海馬神經(jīng)元細(xì)胞增殖及凋亡的情況,探討慢性應(yīng)激對(duì)海馬神經(jīng)元細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡的影響,同時(shí)觀察經(jīng)典的SSRI類抗抑郁藥氟西汀對(duì)慢性應(yīng)激大鼠的行為、內(nèi)分泌、海馬神經(jīng)元細(xì)胞增殖和凋亡的干預(yù)作用,為創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙的法醫(yī)鑒定、臨床治療及預(yù)防提供一定的理論依據(jù)。 材料和方法 選擇成年雄性SD大鼠,按照隨機(jī)的原則將大鼠分為以下4組:對(duì)照組、4周應(yīng)激組、4周應(yīng)激加水組、4周應(yīng)激加藥組,每組6只。采用強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)作為應(yīng)激源,曠場(chǎng)試驗(yàn)觀察自主行為,應(yīng)激開始和結(jié)束時(shí)稱體重,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清皮質(zhì)酮水平,增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)免疫組化的方法測(cè)量海馬齒狀回細(xì)胞增殖水平,Hoechst熒光反應(yīng)的方法測(cè)量海馬細(xì)胞凋亡水平,觀察慢性應(yīng)激和氟西汀對(duì)行為、皮質(zhì)酮水平以及海馬細(xì)胞增殖和凋亡的影響。并對(duì)慢性應(yīng)激后海馬的神經(jīng)元增殖和凋亡與行為和內(nèi)分泌的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果用EXCEL2003和SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理。結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±SD)表示,采用方差分析(ANOVA)、LSD和Dunnett T3進(jìn)行組間均數(shù)比較,相關(guān)分析應(yīng)用Pearson相關(guān), P0.05為差異顯著。 結(jié)果 (1)行為、體重和血清皮質(zhì)酮的變化:對(duì)照組和4周應(yīng)激加藥組大鼠的爬格數(shù)明顯多于4周應(yīng)激組和4周應(yīng)激加水組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);4周應(yīng)激組和4周應(yīng)激加水組的中央格停留時(shí)間高于對(duì)照組和4周應(yīng)激加藥組;在直立上,4周應(yīng)激組和4周應(yīng)激加水組明顯少于對(duì)照組和4周應(yīng)激加藥組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);在體重上,應(yīng)激后對(duì)照組每周體重增長(zhǎng)明顯高于其他各組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);對(duì)照組皮質(zhì)酮的水平較其他組明顯降低(P0.01)。 (2)慢性應(yīng)激對(duì)大鼠海馬齒狀回細(xì)胞增殖的影響:4周應(yīng)激組大鼠齒狀回的PCNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及PCNA指數(shù)明顯小于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 (3)慢性應(yīng)激對(duì)大鼠海馬區(qū)細(xì)胞凋亡的影響:4周應(yīng)激組大鼠海馬CA1、CA3、DG各區(qū)的凋亡細(xì)胞數(shù)明顯多于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 (4)氟西汀對(duì)慢性應(yīng)激大鼠海馬細(xì)胞增殖和凋亡的影響:4周應(yīng)激用藥組大鼠海馬的PCNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和PCNA指數(shù)明顯高于4周應(yīng)激組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),和對(duì)照組無顯著差距;4周應(yīng)激用藥組大鼠海馬CA1和CA3區(qū)細(xì)胞凋亡數(shù)明顯少于4周應(yīng)激組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),和對(duì)照組無顯著差距,在DG區(qū),4周應(yīng)激用藥組的細(xì)胞凋亡數(shù)亦少于4周應(yīng)激組,但高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 (5)海馬的神經(jīng)元增殖數(shù)與爬格數(shù)和直立數(shù)呈正相關(guān),其隨皮質(zhì)酮濃度和中央格停留時(shí)間的增加有減少趨勢(shì);海馬的細(xì)胞凋亡數(shù)與爬格數(shù)和直立數(shù)呈負(fù)相關(guān),與中央格停留時(shí)間呈正相關(guān),隨皮質(zhì)酮濃度的升高有增加趨勢(shì)。 結(jié)論 (1)慢性應(yīng)激后大鼠以被動(dòng)性運(yùn)動(dòng)為主,表現(xiàn)絕望和退縮,伴體重下降,并導(dǎo)致皮質(zhì)酮水平升高,與人類抑郁癥和創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙的行為特點(diǎn)相似。 (2)行為特征和皮質(zhì)酮水平的結(jié)果說明,強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)是一個(gè)良好的慢性應(yīng)激模型。 (3)慢性應(yīng)激后大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞增殖能力下降,細(xì)胞凋亡增多。 (4)氟西汀作為一種典型的SSRI類抗抑郁藥,可以預(yù)防或者逆轉(zhuǎn)慢性應(yīng)激所致的海馬神經(jīng)元的細(xì)胞增殖能力的下降以及細(xì)胞凋亡的增多。 (5)海馬神經(jīng)元增殖和細(xì)胞凋亡與行為和內(nèi)分泌水平存在相關(guān)性。隨著海馬神經(jīng)元增殖的增加大鼠表現(xiàn)為活動(dòng)增加,皮質(zhì)酮濃度下降;隨著神經(jīng)元凋亡的增加大鼠表現(xiàn)為活動(dòng)減少,皮質(zhì)酮濃度升高。
【圖文】：

4 周后應(yīng)激加藥組體重增長(zhǎng)亦高于應(yīng)激組和應(yīng)激加水組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表 1-3 各組大鼠體重增加值的比較 g(x±SD)Tab. 1-3 Comparison of the increase value of rats in each group (x±SD)一周體重增加值 二周體重增加值 三周體重增加值 四周體重增加值對(duì)照組 52.50±9.09▲88.17±7.36 120.17±13.09 155.67±8.624 周應(yīng)激組 28.50±8.87▲54.33±13.94 89.00±14.79 130.67±18.154 周應(yīng)激加水組 29.17±3.92▲58.17±11.97 87.33±11.59 127.83±16.074 周應(yīng)激加藥組 38.67±7.66 57.33±13.71 80.83±22.89 143.17±16.09F 12.79 10.41 7.08 4.25P 0.00 0.00 0.002 0.018注：*表示和對(duì)照組有顯著差異，，▲表示和用藥組有顯著差異.

汕頭大學(xué)碩士研究生論文4 各組大鼠血清皮質(zhì)酮濃度的比較如圖 1-2 所示，對(duì)照組的血清皮質(zhì)酮濃度（216.32±99.01）ng/ml 明顯小于 4 周應(yīng)364.30±73.78）ng/ml、4 周應(yīng)激加水組（354.96±124.18）ng/ml 和 4 周應(yīng)激加藥362.23±128.82）ng/ml，差異有顯著性（P<0.01），而各應(yīng)激組比較，血清皮質(zhì)酮濃顯差異。
【學(xué)位授予單位】：汕頭大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2008
【分類號(hào)】：D919.3

【參考文獻(xiàn)】

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1 趙虎,徐小虎,楊德森;海馬類固醇激素受體系統(tǒng)對(duì)天敵應(yīng)激所致的內(nèi)分泌變化的調(diào)節(jié)效應(yīng)[J];中國(guó)行為醫(yī)學(xué)科學(xué);2003年04期

2 趙虎,徐小虎,楊德森;精神刺激所致精神損傷與海馬體積和生化水平變化[J];中國(guó)法醫(yī)學(xué)雜志;2004年02期

本文編號(hào)：2534515