【摘要】： 在交通事故和各種暴力案件中，顱腦損傷所致的死亡已成為威脅 人們生命的主要原因，也引起了國(guó)內(nèi)外許多專家學(xué)者的關(guān)注。腦干是 機(jī)體生命中樞所在地，從理論上講，顱腦損傷致迅速死亡是由于腦干 受到損害，腦干功能的喪失所致。原發(fā)性腦干損傷（Primary brain stem injury,PBSI）通常指暴力作用于頭部引起腦干為主的損傷，并于傷后立 即發(fā)生持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)的意識(shí)喪失或死亡。神經(jīng)系統(tǒng)功能的發(fā)揮是在其 特殊的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，依賴神經(jīng)遞質(zhì)的信息傳遞作用而進(jìn)行的。腦干損 傷后所表現(xiàn)出來的一系列癥狀及迅速死亡都有其客觀的物質(zhì)基礎(chǔ)，如 果遞質(zhì)傳遞過程發(fā)生障礙或遞質(zhì)本身出現(xiàn)質(zhì)或量的異常，必將導(dǎo)致神 經(jīng)系統(tǒng)功能障礙。本研究就是基于以上觀點(diǎn)，以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)，以 期探索腦干損傷后神經(jīng)遞質(zhì)的合成、代謝等方面的改變，揭示顱腦損 傷后腦干功能喪失的機(jī)理，同時(shí)為法醫(yī)學(xué)鑒定腦干損傷致死提供客觀 依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模貉芯匡B腦外傷至迅速死亡的Wistar大鼠腦干內(nèi)神經(jīng)遞 質(zhì)5-HT、SP的改變情況以及合成GABA的酶GAD和GAD-mRNA 的表達(dá)改變情況，探索其與迅速死亡之間的關(guān)系，以揭示顱腦損傷后 腦干功能喪失的機(jī)理。 實(shí)驗(yàn)材料與方法：本實(shí)驗(yàn)采用Marmarous自由落體打擊裝置結(jié)合 心電監(jiān)護(hù)儀制造Wistar大鼠顱腦損傷模型，得到打擊后迅速死亡組大 鼠14只，打擊后由昏迷狀態(tài)逐漸轉(zhuǎn)清醒者（存活組）19只，并設(shè)正 常對(duì)照組和死后打擊組各6只共計(jì)45只。各組大鼠經(jīng)主動(dòng)脈插管用 4％多聚甲醛灌注固定后，取腦干進(jìn)行石蠟和冰凍切片。用石蠟切片進(jìn) 行HE染色，并運(yùn)用免疫組織化學(xué)SABC法檢測(cè)腦干網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中縫核 一 內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)5一羥色胺K－HT）的表達(dá)改變及P物質(zhì)“P）和谷氨酸脫 接酶（GAD）在中腦黑質(zhì)中的表達(dá)改變情況；在冰凍切片上進(jìn)行原位 雜交實(shí)驗(yàn)，，用經(jīng)地高辛標(biāo)記的寡核著酸探針來檢測(cè)中腦黑質(zhì)中的 G汕65－W和 GAD67－n：nh＊n的表達(dá)改變情況。結(jié)合使用圖像分 析方法和統(tǒng)計(jì)學(xué)原理對(duì)各組的不同染色結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 1．死亡組大鼠打擊后出現(xiàn)明顯的腦干損傷癥狀及生命體征改變， 大體病理解剖見大部分有腦干實(shí)質(zhì)出血，伴不同程度的其它類型顱腦 損傷如顱骨骨折、蛛網(wǎng)膜下腔出血等，而其它組未見腦干實(shí)質(zhì)出血、 挫傷等改變； 2．HE染色：l）死亡組：大部分可見彌漫性蛛網(wǎng)膜下腔出血、腦 組織水腫，腦實(shí)質(zhì)出血；腦干實(shí)質(zhì)細(xì)胞水腫，細(xì)胞間隙增寬；腦干組 織中散在點(diǎn)狀出血，微血管充血、管周水腫。2）存活組：大部分也可 見蛛網(wǎng)膜下腔出血，微血管充血、周圍間隙增寬，腦實(shí)質(zhì)細(xì)胞腫脹等 鏡下改變；但腦干部位卻未見有異常改變。引死后打擊組及正常對(duì)照 組腦實(shí)質(zhì)未見異常鏡下改變。 3．免疫組織化學(xué)染色 1）5－HT：在存活組、死后打擊組和正常組大鼠的腦干中僅見到 中縫核群的5－HT能神經(jīng)元胞漿中有5－HT陽(yáng)性物質(zhì)沉積。而在實(shí)驗(yàn)組 防死亡組）大鼠的腦干中，5－HT陽(yáng)性物質(zhì)不僅存在于中縫核群的 5－HT能神經(jīng)元之中，在中縫核群以外的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中的膠質(zhì)細(xì)胞、間質(zhì) 細(xì)胞以及微血管壁均可見到5－HT的異常沉積，尤以腦橋下段和延髓 上段較為明顯。統(tǒng)計(jì)學(xué)顯示5－HT在死亡組大鼠腦干中的表達(dá)與另外 三組比較有顯著性差異o功m。 2）P物質(zhì)uubstance P，SP）：存活組、死后打擊組和正常組大 鼠的中腦黑質(zhì)神經(jīng)元胞體呈SP ji陽(yáng)性反應(yīng)，棕黃色顆粒狀的SP陽(yáng)性 產(chǎn)物位于神經(jīng)元胞漿內(nèi)，有的偏于一端，有的充滿整個(gè)胞漿，并沿軸 突、樹突向四周伸展。死亡組大鼠黑質(zhì)神經(jīng)元胞體的陽(yáng)性顯色程度較 ．2 —— 其它三組明顯要弱，陽(yáng)性物質(zhì)的顆粒性也不明顯，軸突、樹突模糊， 與其它三組有顯著性差異0部刀1人 3）谷氨酸脫接酶（Glotamic Acid DeCarbOXylase，GAD人 GAD 的免疫組化結(jié)果與P物質(zhì)的染色結(jié)果相類似，存活組、死后打擊組和 正常組大鼠的黑質(zhì)神經(jīng)元胞體GAD免疫組化染色呈陽(yáng)性反應(yīng)，而死 亡組大鼠的黑質(zhì)神經(jīng)元胞體GAD免疫組化染色較其它三組明顯減弱， 呈弱陽(yáng)性反應(yīng)，與其它三組比較有顯著性差異①刀刀1人 4．原位雜交染色 GAD65．mRNA和 GAD67－M在存活組、死后打擊組和正常 組大鼠黑質(zhì)神經(jīng)元胞體中均表達(dá)，胞漿、胞核均呈棕黃色陽(yáng)性反應(yīng)， 以胞核為主，GAD“－InRN的表達(dá)強(qiáng)于GAD 6｝InRNA；而死亡組大 鼠黑質(zhì)中兩種 mRNA的表達(dá)均減弱，呈弱陽(yáng)性。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，與其它 三組比較有顯著性差異0功＊人 結(jié)論 1．頭顱暴力致迅速死亡者腦干部位的病理形態(tài)學(xué)改變提示導(dǎo)致 迅速死亡的物質(zhì)基礎(chǔ)是腦干的原發(fā)性損傷引起的腦干功能喪失； 2．腦干損傷后，腦干內(nèi)中縫核及其周圍組織中5－HT大量堆積， 提示5．HT在腦干損傷至迅速死亡的病理過程中起重要作用；而且， 5．HT的這一特征性變化還可用于原發(fā)性腦干損傷的法醫(yī)學(xué)鑒定。 3．腦干損傷后中腦黑質(zhì)中SP表達(dá)減弱，可能與腦干損傷后局 部血流障礙有關(guān)，這一改變可運(yùn)用于作為法醫(yī)學(xué)鑒定腦干損傷的指標(biāo)；
【學(xué)位授予單位】：汕頭大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2001
【分類號(hào)】：D919.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2522299