【摘要】： 目的:研究絲光綠蠅幼蟲形態(tài)特征變化規(guī)律,積累石家莊地區(qū)尸食性蠅類幼蟲發(fā)育的生物學(xué)資料,為準(zhǔn)確推斷死后間隔時間(Postmortem interval, PMI)提供科學(xué)依據(jù)。 方法:在河北醫(yī)科大學(xué)校園內(nèi)誘捕絲光綠蠅成蠅,帶回實(shí)驗(yàn)室連續(xù)飼養(yǎng)繁衍至第三代,將其移入生化培養(yǎng)箱作為母代,進(jìn)行各溫度條件下的生長發(fā)育研究。依次設(shè)定溫度為:16℃、20℃、24℃、28℃、32℃,各溫度保持相對恒定(±1℃)。在以上各溫度條件下,濕度為50% ~60 %,光周期為12:12小時,并且保持不變,食物數(shù)量維持在相對穩(wěn)定的范圍內(nèi)。 從幼蟲孵出開始,每12小時(觀察疊齡期時每1小時)留取一次標(biāo)本,直至化蛹。用鑷子夾起幼蟲投入70℃~80℃的熱水中燙死后取出放在濾紙上,吸干蟲體表面的水份放入70%的甘油酒精中保存。各溫度條件下做3個重復(fù)組。 從保存液中取出幼蟲標(biāo)本,置入表面皿,用大頭針在幼蟲腹部一側(cè)扎數(shù)個小孔,放入10%的KOH溶液中,消化24小時后,用鑷子擠壓排除幼蟲體內(nèi)已消化的組織,用蒸餾水洗去堿液和體內(nèi)殘余組織,在30%、50%、70%的酒精中逐級脫水,每級15分鐘;再依次放入80%、90%、95%、100%的酒精中逐級脫水,每級30分鐘;在50%的酒精和50%的二甲苯混合液中浸泡30分鐘后,放入二甲苯中透明。在載玻片上滴加加拿大樹膠,解剖鏡下整姿,用蓋玻片封片,置于陰涼處晾干。 用雙目光學(xué)顯微鏡觀察幼蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)如頭咽骨、前后氣門和體表棘刺,并用Nikon數(shù)碼顯微照像機(jī)拍照;用JD801圖像分析系統(tǒng)測量幼蟲頭咽骨的長度、口鉤長度、咽骨背、腹角長度、頭咽骨幾丁質(zhì)化程度及后氣門橫徑等,并將一系列指標(biāo)隨溫度的變化用Excel制成生長曲線進(jìn)行分析研究。 結(jié)果:觀察研究表明,在恒定溫度下,絲光綠蠅幼蟲頭咽骨由開始的近似“人”形逐漸變?yōu)椴灰?guī)則的“H”形,二齡初期出現(xiàn)點(diǎn)狀的齒骨和細(xì)長的側(cè)口骨,沒有附口骨。其顏色逐漸加深由淺黃變?yōu)樽睾稚�。頭咽骨的長度、口鉤長度、咽骨背、腹角的長度隨時間延長而增加,其長度的增加呈階段性,在每個齡期內(nèi)部變化不大,齡期更替時增長明顯,尤其是在二齡到三齡的轉(zhuǎn)變;頭咽骨的幾丁質(zhì)化程度隨時間的延長也明顯增加,但是在齡期更替時其幾丁質(zhì)化程度略下降后又上升。當(dāng)頭咽骨各部位達(dá)到最大值基本保持不變時,背角與腹角長度比為2:1,此時頭咽骨的幾丁質(zhì)化程度隨時間延長還在繼續(xù)加大。 前氣門從無到有,并具有6~8個指狀突,氣門管由細(xì)長逐漸變?yōu)榇侄�。后氣門由一孔兩裂到具有三個氣門裂,由無氣門鈕、氣門環(huán)到出現(xiàn)氣門鈕和具有完整的氣門環(huán),并隨著幾丁質(zhì)化范圍的增大,程度加深。體表棘刺的顏色也隨著幾丁質(zhì)化程度的增加而加深。 不同溫度對絲光綠蠅幼蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征影響不明顯,但在適宜其發(fā)育的溫度范圍內(nèi),隨溫度的升高,幼蟲的發(fā)育速率增快,頭咽骨、前后氣門等各部位達(dá)到最大長度的時間縮短。 對絲光綠蠅幼蟲形態(tài)結(jié)構(gòu)進(jìn)行動態(tài)觀察過程中發(fā)現(xiàn),幼蟲具有疊齡期這一特殊結(jié)構(gòu)時期,疊齡期是指此時的幼蟲同時具備兩個齡期的幼蟲頭咽骨和后氣門等結(jié)構(gòu),且分別呈現(xiàn)各自的特征:一、二齡更替時,同時出現(xiàn)一、二齡兩組幼蟲頭咽骨和后氣門,成熟的一齡幼蟲頭咽骨顏色較深,新生成的二齡幼蟲頭咽骨顏色較淺,咽骨背角略長于腹角。二、三齡更替時,同時出現(xiàn)二、三齡兩組幼蟲頭咽骨和前、后氣門,成熟二齡幼蟲頭咽骨顏色較深,新生成的三齡幼蟲頭咽骨顏色較淺,口鉤鉤部彎曲較平緩,基部寬大,咽骨背角長于腹角。成熟二齡幼蟲前氣門較小,顏色深,后氣門小,為兩裂;新生成的三齡幼蟲前氣門較大,顏色淺,后氣門大,為三裂。 在適宜其發(fā)育的溫度范圍內(nèi),溫度越高,發(fā)育至對應(yīng)疊齡期的時間越短。幼蟲在16℃、20℃、24℃、28℃、32℃條件下,一、二齡疊齡期出現(xiàn)的時間依次為:52±0.77小時、38±0.63小時、28±1.00小時、14±0.77小時、8±1.67小時;平均分別持續(xù)6±0.63小時、6±0.77小時、4±0.77小時、2±0.44小時、2±0.89小時;二、三齡疊齡期出現(xiàn)的時間依次為:110±1.67小時、98±0.89小時、74±1.67小時、38±0.89小時、26±1.41小時,平均分別持續(xù)7±0.63小時、6±0.77小時、4±0.44小時、2±0.44小時、2±0.63小時。 結(jié)論:本研究結(jié)果表明,在適宜絲光綠蠅幼蟲發(fā)育的溫度范圍內(nèi),幼蟲發(fā)育呈現(xiàn)以下規(guī)律: 1頭咽骨各部位長度隨時間的延長而增加,且增加呈階段性,即在每個齡期內(nèi)部增長不明顯,齡期更替前后,增長顯著,達(dá)到最大值后,基本維持不變;頭咽骨顏色隨幾丁質(zhì)化程度增強(qiáng)而逐漸變深,口鉤鉤部彎曲逐漸平緩,基部漸寬,咽骨背角長于腹角;側(cè)口骨和齒骨出現(xiàn)在二齡初期,沒有附口骨出現(xiàn)。 2隨著幼蟲的發(fā)育,前后氣門、體表棘刺幾丁質(zhì)化程度逐漸增強(qiáng),顏色逐漸變深,范圍逐漸加大。 3溫度越高,幼蟲發(fā)育速率越快,各結(jié)構(gòu)發(fā)育至最大值所需時間越短。 4對應(yīng)疊齡期的出現(xiàn)隨溫度的升高而提前,疊齡期幼蟲具備兩個齡期的特征結(jié)構(gòu),并且分別呈現(xiàn)各自特點(diǎn),其存在時間隨溫度升高而縮短。 在死亡調(diào)查時,根據(jù)案發(fā)現(xiàn)場的環(huán)境、溫度、觀察采集到的絲光綠蠅幼蟲標(biāo)本的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征,參照這種蠅類幼蟲頭咽骨各部位長度變化及幾丁質(zhì)化程度的規(guī)律,準(zhǔn)確推斷出幼蟲的發(fā)育歷期,尤其是觀察到疊齡期幼蟲的形態(tài)特點(diǎn)時,可迅速判斷其發(fā)育歷期,從而推斷死后間隔時間(PMI),為案件的偵破提供時間依據(jù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：D919.1

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本文編號：2292594