本文選題：氯丙嗪 + 氣相色譜��； 參考：《山西醫(yī)科大學(xué)》2011年碩士論文

【摘要】：目的 1．建立生物檢材中氯丙嗪的氣相色譜和氣相色譜/質(zhì)譜檢測(cè)方法； 2．建立氯丙嗪的死后分布、死后再分布、死后彌散、分解動(dòng)力學(xué)動(dòng)物模型； 3．研究氯丙嗪在動(dòng)物體內(nèi)的死后分布、死后再分布、死后彌散和分解動(dòng)力學(xué)分布規(guī)律，為氯丙嗪中毒（死）案件的法醫(yī)學(xué)鑒定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 1.死后分布研究 1.1氯丙嗪在大鼠體內(nèi)的死后分布研究：雄性SD大鼠6只，體重200g±10g經(jīng)灌胃勻速注入6LD_(50)（1350 mg/kg）氯丙嗪。觀察給藥到死亡時(shí)的生命體征的變化以及中毒癥狀，待呼吸和心跳全部消失時(shí)，迅速解剖動(dòng)物，取大腦、心、肝、脾、肺、腎、心血等冷凍保存，堿性乙醚提取，氣相色譜質(zhì)譜法定性、氣相色譜法定量檢測(cè)氯丙嗪。 1.2氯丙嗪在家兔體內(nèi)的死后分布研究：家兔6只，實(shí)驗(yàn)前隔夜禁食。經(jīng)灌胃勻速注入8LD_(50)（5990.4 mg/kg）氯丙嗪。待呼吸和心跳全部消失時(shí)，迅速解剖動(dòng)物，取大腦、心、肝、脾、肺、腎、心血等冷凍保存，堿性乙醚提取，氣相色譜質(zhì)譜法定性、氣相色譜法定量檢測(cè)氯丙嗪。 2.死后再分布研究：雄性犬6只，固定于犬臺(tái)上，插胃管，2min內(nèi)注入1/2LD_(50)劑量（201.6mg/kg，按體表面積折算）氯丙嗪。2h后缺氧處死，仰臥位置于室溫下（20℃），分別在死后0h、2h、4h、8h、12h、24h、48h、72h、96h取撿材，-20℃冰箱保存待檢。解凍，液-液萃取血液和各組織臟器，氣相色譜質(zhì)譜法定性、氣相色譜法定量檢測(cè)氯丙嗪。 3.死后彌散研究：家兔15只，隨機(jī)分為5組。實(shí)驗(yàn)前隔夜禁食，將其仰臥位固定于兔臺(tái)，插胃管，然后處死；處死1h后，經(jīng)灌胃勻速注入LD_(50)（748.8mg/kg）氯丙嗪，分別于3h、1d、2d、4d和6d各解剖一組（3只）家兔，取大腦、心、肝、脾、肺、腎、左右后肢肌、心血、周圍血、膽汁、尿液、玻璃體液，-20℃冰箱保存待檢。解凍，液-液萃取血液和各組織臟器，氣相色譜質(zhì)譜法定性、氣相色譜法定量檢測(cè)氯丙嗪。 4.分解動(dòng)力學(xué)研究：雄性犬6只，固定于犬臺(tái)上，插胃管，2min內(nèi)注入LD_(50)劑量（403.2mg/kg）氯丙嗪，給藥體積為20mL。灌胃后2h，經(jīng)股動(dòng)脈插管采血，肝素抗凝；缺氧處死，取心血和肝臟。每只犬血分四等份分別置于20℃、4℃、-20℃、20℃（加NaF至1%），每只犬肝分四等份分別置于20℃、4℃、-20℃、20℃（4%甲醛），于第0d、7d、54d、90d、150d、280d、320d氣相色譜質(zhì)譜法定性、氣相色譜法定量檢測(cè)其中氯丙嗪。采用WinNonlin藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理平均藥物濃度，擬合分解動(dòng)力學(xué)方程，計(jì)算分解半衰期。 5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，，結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x|-)±S）表示，t檢驗(yàn)。 結(jié)果 1.氣相色譜和氣相色譜/質(zhì)譜檢測(cè)：GC/MS分析氯丙嗪的特征離子m/z為86、233、272、318。心血中氯丙嗪氣相色譜檢測(cè)的回歸方程、線性檢測(cè)范圍、相關(guān)系數(shù)、回收率、最低檢出濃度分別為Y=4.2403X＋0.2044 (μg/mL)、0.1～10μg/mL、0.9927、99.03±5.20％、0.1μg/mL。肝臟中氯丙嗪氣相色譜檢測(cè)的回歸方程、線性檢測(cè)范圍、相關(guān)系數(shù)、回收率、最低檢出濃度分別為Y=10.38X＋0.2784 (μg/mL)、0.1～10μg/mL、0.9815、98.26±2.50％、0.1μg/mL。 2.死后分布：6LD_(50)劑量灌胃大鼠10～11h死亡，體內(nèi)氯丙嗪含量由高到低分別為：胃（2249.18±164.23μg/g）肝（880.17±8.62μg/g）肺（571.09±0.82μg/g）腦（108.62±27.38μg/g）、脾（105.37±17.64μg/g）、腎（100.33±0.34μg/g）、心（95.11±4.63μg/g）心血（6.31±1.87μg/mL）。8LD_(50)劑量灌胃家兔5～6h死亡，體內(nèi)氯丙嗪含量由高到低分別為：胃(3823.24±662.66μg/g ) 肝(489.67±230.44μg/g)、肺(396.16±237.70μg/g)腦(251.24±98.01μg/g)、脾(267.62±87.46μg/g)、腎(289.01±153.35μg/g)、心(117.88±52.79μg/g)心血(5.86±1.90μg/ mL)。 3.死后再分布：1/2LD_(50)氯丙嗪在灌胃致死犬心血中的濃度呈先升高后降低趨勢(shì)，在肝臟中的濃度呈升高趨勢(shì)。心血中氯丙嗪含量在死后4h之內(nèi)穩(wěn)定，8h時(shí)顯著升高（LSD，P＜0.05），48h～96h內(nèi)又逐漸降低。死后與死亡當(dāng)時(shí)心血氯丙嗪濃度比（C_(死后血)/C_(死亡當(dāng)時(shí)血_）達(dá)0.47～2.28；肝臟中氯丙嗪含量在24h之內(nèi)穩(wěn)定，48h～96h內(nèi)顯著升高（LSD，P＜0.05），死后與死亡當(dāng)時(shí)肝臟氯丙嗪濃度比（C_(死后肝)/C_(死亡當(dāng)時(shí)肝)）達(dá)1.57～6.74；在染毒犬死后96h內(nèi)，肌肉中氯丙嗪濃度在死后無(wú)顯著性變化（LSD，P㧐0.05）。 4.死后彌散：LD_(50)氯丙嗪灌胃染毒家兔3h后，大腦、心、肝、脾、肺、腎、左、右后肢肌和心血中均檢出氯丙嗪成份，且脾中氯丙嗪含量最高。尿和膽汁中在6d后仍未檢出氯丙嗪成份。 5.分解動(dòng)力學(xué)：氯丙嗪在檢材中的分解動(dòng)力學(xué)符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程一室開(kāi)放模型，Ct=C_0e~(-kt)表示。20℃、4℃、-20℃、20℃（加NaF至1%）保存犬血中氯丙嗪濃度第7d時(shí)犬血中氯丙嗪濃度下降至最初濃度的57.6%、97.3%、53.6%、80.2%，20℃、4℃、-20℃、20℃（加NaF至1%）保存280d時(shí)犬血中氯丙嗪濃度分別顯者下降至最初濃度的29.80%、36.51%、19.62%、39.29%。20℃、4℃、-20℃、20℃（4%甲醛）保存犬肝中氯丙嗪濃度第7d時(shí)分別上升至最初濃度的237.01%、160.75%、165.52%、60.27%，保存320d時(shí)，分別顯者下降至最初濃度的67.91%、78.60%、67.84%、12.63%。 結(jié)論 1.本文建立了生物檢材中氯丙嗪的氣相色譜/質(zhì)譜和氣相色譜檢測(cè)方法，前者選擇性好，定性準(zhǔn)確，后者色譜簡(jiǎn)便，快速，敏捷，定量結(jié)果準(zhǔn)確，可用于氯丙嗪中毒的臨床快速檢驗(yàn)診斷和氯丙嗪中毒（死）案件的法醫(yī)學(xué)鑒定。 2.氯丙嗪死后分布不均勻，6LD_(50)灌胃染毒大鼠體內(nèi)氯丙嗪含量順序?yàn)椋何�、肝、肺、腦、脾、腎、心、心血。8LD_(50)灌胃染毒家兔體內(nèi)氯丙嗪含量順序?yàn)槲�、肝、肺、腦、脾、腎、心、心血。臟器組織中氯丙嗪濃度均高于血液。在氯丙嗪中毒（死）案件的法醫(yī)學(xué)鑒定中，除采集血液和胃外，還可選取脾肝、肺、腎腦等組織為檢材，其死后分布規(guī)律為氯丙嗪中毒（死）案件的法醫(yī)學(xué)鑒定中檢材采取和特殊案件血中藥物濃度推斷提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 3.氯丙嗪在染毒犬體內(nèi)可發(fā)生死后再分布，1/2LD_(50)氯丙嗪在灌胃致死犬死后與死亡當(dāng)時(shí)心血氯丙嗪濃度比（C_(死后)/C_(0h)）達(dá)0.47～2.28，死后與死亡當(dāng)時(shí)肝臟氯丙嗪濃度比（C_(死后)/C_(0h)）達(dá)1.57～6.74，肌肉中含量變化不大。提示氯丙嗪在染毒致死犬體內(nèi)存在死后時(shí)間依賴的血與臟器濃度變化，可發(fā)生死后再分布，肌肉組織受影響較小。因此，氯丙嗪意外死亡案件或多藥濫用死亡法醫(yī)學(xué)鑒定中，不僅要取心血，而且盡量采集肌肉、腦等受死后再分布影響較小的檢材，在相關(guān)的死因分析上考慮死后尸檢時(shí)間，取材部位、尸體存放環(huán)境等因素，進(jìn)行綜合分析。 4.氯丙嗪在家兔體內(nèi)可發(fā)生死后彌散，LD_(50)氯丙嗪灌胃染毒3h后，大腦、心、肝、脾、肺、腎、左、右后肢肌和心血中均檢出氯丙嗪成份，且脾中氯丙嗪含量最高。尿和膽汁中在6d后仍未檢出氯丙嗪成份。在鹽酸氯丙嗪中毒（死）法醫(yī)學(xué)鑒定中可根據(jù)尿液和膽汁中是否檢測(cè)出氯丙嗪來(lái)區(qū)分生前服毒和死后染毒。 5.氯丙嗪在染毒犬保存肝臟和心血中均可發(fā)生降解；保存溫度降低或添加1%氟化鈉能使其分解半衰期和檢出期限延長(zhǎng)，而4％的甲醛溶液（20℃）固定則能能使其分解半衰期和檢出期限縮短。氯丙嗪在樣品中的分解動(dòng)力學(xué)符合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程一室開(kāi)放模型，可用C_t=C_0e~(-kt)表示，利用該分解動(dòng)力學(xué)方程，可以推斷解剖或采集當(dāng)時(shí)檢材中藥物含量，為中毒（死）案件法醫(yī)學(xué)鑒定中毒物檢驗(yàn)結(jié)果的分析提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:Purpose

1 . establishing a gas chromatograph and a gas chromatography / mass spectrometry detection method of the chlorprochlorin in the biological sample ;


2 , establishing the post - mortem distribution of the chlorpropine , distributing after death , dispersing after death , and decomposing the kinetic animal model ;


3 . The distribution of the post - mortem distribution , the redistribution after death , the post - mortem dispersion and the kinetic distribution of decomposition were studied , and the experimental basis was provided for the forensic identification of the case of the poisoning ( death ) .

method

1 . Post - mortem distribution study

1 . The post - mortem distribution in rats was studied : 6 male SD rats weighing 200 g 鹵 10g were injected into 6LD _ ( 50 ) ( 1350 mg / kg ) by gavage at a constant rate . The changes of vital signs and the symptoms of poisoning were observed . The animals were dissected rapidly , and the brain , heart , liver , spleen , lung , kidney , heart and blood were rapidly dissected .

1 . The post - mortem distribution in rabbits was studied in rabbits : 6 rabbits were fasted overnight before the experiment . The rats were injected 8LD _ ( 50 ) ( 5990.4 mg / kg ) by gavage at a constant rate . The animals were dissected rapidly and the brain , heart , liver , spleen , lung , kidney , heart and blood were rapidly dissected .

2 . Post - mortem redistribution study : 6 male dogs were fixed on the dog table , the stomach tube was inserted into the stomach tube for 2 minutes , 1 / 2LD _ ( 50 ) dose ( 201.6 mg / kg , calculated according to the surface area ) was injected into the stomach at room temperature ( 20 鈩

本文編號(hào)：1882107