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大鼠腦震蕩后繼發(fā)性損傷和CCK抗損傷的研究

發(fā)布時間:2018-04-08 18:34

  本文選題:腦震蕩 切入點:膽囊收縮素 出處:《河北醫(yī)科大學》2003年碩士論文


【摘要】: 目的:腦震蕩(brain concussion)是指外力致頭部損傷后,即刻引起腦功能障礙 ,輕者表現(xiàn)短暫昏迷,重者伴有記憶力障礙,多可自行恢復的狀況。臨床上將頭部外傷史、短暫意識喪失和近事遺忘作為診斷腦震蕩的三大指征。傳統(tǒng)觀點認為,其組織形態(tài)學上無明顯變化,神經(jīng)系統(tǒng)檢查也無器質(zhì)性損傷體征,近年來人們對腦震蕩的機理及其腦組織結(jié)構(gòu)的改變進行了許多研究,并有了新的認識,目前大多數(shù)學者認為腦震蕩系輕度軸索損傷所致,存在一定的病理變化。關(guān)于腦震蕩的生物力學、發(fā)病機理等方面有許多問題尚待解決。本實驗通過采用單擺式機械打擊裝置建立大鼠腦震蕩模型,觀察大鼠腦震蕩后病理改變及腦組織氧化損傷和炎癥因子的變化,以及血清中相應(yīng)生化指標的改變,探討腦震蕩后繼發(fā)性損傷形成機制, 為法醫(yī)臨床對腦震蕩及腦震蕩后遺癥的鑒定提供參考;同時對以硫酸酯化八肽活性片段為存在形式的外源性膽囊收縮素(cholecystokinin-8 , CCK-8)在腦震蕩后對上述變化的影響加以評價,為尋求減輕腦損傷的藥物提供理論依據(jù)。 實驗方法:腦震蕩模型制備:將大鼠用乙醚輕度麻醉,使其俯臥于打擊裝置上,以135°起始角下落單擺打擊大鼠的枕外隆突,選擇具備打擊后馬上出現(xiàn)昏迷(1~3 min),意識迅速恢復,大體檢驗無肉眼損傷,組織學檢 WP=4 查未見腦出血和挫傷的大鼠定為成功復制腦震蕩。 健康Wistar大鼠90只,體重200g,雌雄不拘,隨機分組。實驗分為:對照組、腦震蕩組、和CCK組。CCK組預先靜脈注射CCK-8 (4μg/100g) ,余同腦震蕩組。觀察打擊后大鼠腦組織的病理改變,測定腦組織及血清中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,用免疫組化的方法檢測TNF-α和IL-1β在腦組織中表達以及血清中C反應(yīng)蛋白(CRP)含量;觀察腦震蕩后及預先注射CCK-8上述指標的變化并探討其意義。 結(jié)果: 1 組織病理變化 對照組:腦組織結(jié)構(gòu)清晰,未見異常變化。腦震蕩組:大鼠打擊后6h可見 皮質(zhì)和小腦等部位輕度水腫、血管淤血,胼胝體、腦干、小腦白質(zhì)等部可見神經(jīng)髓鞘排列紊亂、斷裂、彎曲腫脹,12h 及24h上述變化更加明顯見。CCK組:病理變化和腦震蕩組一致,沒有明顯差別。 2 腦組織MDA含量和SOD活性變化: 腦組織MDA在對照組為1.10±0.11 nmol/mg prot,腦震蕩2h組為2.27±0.94 nmol/mg(與對照組比較明顯升高P0.01),腦震蕩6h組為1.30±0.14 nmol/mg(較腦震蕩2h組降低,與對照組比較P0.05),腦震蕩12h組為1.15±0.18 nmol/mg,接近正常水平。CCK 2h組測定值為1.37±0.94 nmol/mg prot(與腦震蕩組比較P0.05,與對照組比較P0.05)。 腦組織SOD活性在對照組為13.15±2.07 NU/mg prot,腦震蕩2h組11.12±0.79 NU/mg prot(與對照組比 WP=5 較明顯下降P0.05), 腦震蕩6h組12.41±1.87 NU/mg prot(與對照組比較P0.05),CCK 2h組為12.81±1.27 NU/mg prot(與腦震蕩2h組比較P0.05)。 3 腦組織中TNF-α和IL-1β免疫組化結(jié)果 對照組腦組織大腦皮層、海馬等部位TNF-α和IL-1β不表達或表達較少。腦震蕩后6h及12h在大腦皮質(zhì),海馬部位表達量較對照組明顯增加。CCK組在相應(yīng)時間點TNF-α和IL-1β表達較對照組表達增加但較腦震蕩組相應(yīng)部位表達量降低。 4血清中MDA含量和SOD活性變化 血清MDA對照組為5.22±0.63 nmol/ml,腦震蕩2h組為6.59± 0.86(與對照組比較明顯升高P0.01),腦震蕩6h組為5.35±0.70 nmol/ml(較腦震蕩2h組降低,與對照組比較P0.05), CCK 2h組為 5.33 ±0.86(與腦震蕩組比較P0.05)。 血清SOD活性在對照組291.84±58.11NU/ml,腦震蕩2h組為176.00±18.99 NU/ml(與對照組比較 下降P 0.01),腦震蕩6h組為205.61 ±103.71 NU/ml (較腦震蕩2h組回升,與對照組比較P 0.05),CCK 2h組為232.16±41.47 NU/ml(與腦震蕩組比較P 0.05),,CCK 6h組為256.83±49.06 NU/ml(與腦震蕩組比較P0.05)。 5 血清中CRP含量變化 腦震蕩組打擊后2h血液中CRP含量為3.21±1.55 mg/l,較對照組(1.59±0.54mg/l)升高,6h增高為4.37±2.01 mg/l,(與對照組比較P 0.05),至12h達到高峰為10.35± 1.90 mg/l, (與對照組比較P 0.01), 24h后為 WP=6 5.13±2.66mg/l, (與對照組比較P 0.05),48h為3.03±2.05 mg/l,(與對照組比較P 0.05)基本恢復正常。 CCK組打擊后2h亦開始升高,在相應(yīng)時間點,CCK組血中CRP濃度比腦震蕩組下降;CCK6h組為2.71±0.44 mg/l,(與腦震蕩組比較P 0.05),CCK12h 組為3.20 ± 0.63 mg/l (與腦震蕩組比較P0.01 ,)。 結(jié)論:1. 腦震蕩大鼠存在繼發(fā)性的氧化損傷和TNF-α、IL-1β表達上調(diào)。2. 腦震蕩后有血清CRP、MDA、SOD的變化,可用來反映腦組織損傷。3. CCK-8可減輕大鼠腦震蕩后腦的氧化損傷和炎性損傷。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:河北醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2003
【分類號】:D919

【參考文獻】

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本文編號:1722830

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